5 Këshilla të thjeshta për të parandaluar gabimet kur punoni me pllaka PCR

Reaksionet zinxhir polimeraza (PCR) janë një nga metodat e njohura gjerësisht të përdorura në laboratorët e shkencës së jetës.

Pllakat PCR prodhohen nga plastika e klasit të parë për përpunim dhe analizë të shkëlqyer të mostrave ose rezultateve të mbledhura.

Ato kanë mure të holla dhe homogjene për të siguruar transferim të saktë termik.

Në përgatitje për aplikime në kohë reale, seksioni i minutës së ADN-së ose ARN-së izolohet dhe ruhet në pllaka PCR.

Pllakat PCR janë shumë efikase në izolimin termik dhe gjithashtu kufizojnë rrjedhën e nxehtësisë.

Megjithatë, sa më efektive dhe të besueshme të jenë pllakat PCR, gabimet dhe pasaktësitë fshihen lehtësisht gjatë përpunimit të mostrave.

Prandaj, nëse jeni të interesuar të merrni një cilësi të mirë dhe të lartëPllakat PCR.Është ideale të kontaktoni një prodhues të besueshëm të pllakave PCR.Me këtë ju jeni të sigurt për të marrë marrëveshjen më të mirë.

Këtu janë disa masa paraprake që duhen ndjekur për të shmangur kontaminimet e reagentëve ose mostrave dhe për të parandaluar që pasaktësitë të futen në rezultate.

Sterilizimi i rrethinës
Pozitive apo negative të pasakta ndodhin për shkak të pranisë së papastërtive, gjë që ju bën të dyshoni për rezultatet.

Papastërtitë dhe ndotësit ndodhin në forma të ndryshme si ADN-ja e palidhur ose aditivë kimikë të cilët përfundimisht ulin efikasitetin dhe efektivitetin e reaksionit.

Ka shumë mënyra për të reduktuar në masë të madhe shkallën e kontaminimit të pllakës PCR.

Përdorimi i majave të filtrave të sterilizuar është një mënyrë tjetër e dobishme për të parandaluar që papastërtitë të zvarriten në mostrat tuaja përmes pipetave.

Kushtojini një grup plotësisht të pastër pajisjesh, të përbërë nga pipeta dhe rafte, ekskluzivisht për përdorimin e PCR.Kjo do të garantojë një transferim të papërfillshëm të papastërtive ose ndotësve përreth laboratorit.

Përdorni zbardhues, etanol në pipeta, rafte dhe stola për të fshirë ndotësit.

Alokoni një hapësirë ​​të rezervuar për të gjitha reagimet tuaja PCR për të minimizuar më tej ndotjen e grimcave.

Përdorni doreza të pastra në çdo hap dhe ndërrojini ato shpesh.

Pllakat PCR
Inspektoni përqendrimin dhe pastërtinë e shabllonit.
Duhet të ruhet pastërtia e stolit dhe pajisjeve të përdorura gjatë analizimit të mostrave me PCR.Është thelbësore të vërtetohet shkalla e pastërtisë së mostrave përpara analizës dhe përpunimit.

Në përgjithësi, analizuesit marrin parasysh përqendrimin dhe nivelin e pastërtisë së mostrave të ADN-së.

Përpiquni që raporti i absorbimit për 260nm/280nm nuk duhet të jetë më i vogël se 1.8.Ndërsa gjatësia e valës pasuese midis 230 nm dhe 320 nm përdoren për të identifikuar papastërtitë.

Në një rast, kripërat kaotropike dhe komponimet e tjera organike zbulohen në shkallën e absorbimit 230 nm.Ndërsa turbullira në mostrat e ADN-së zbulohet dhe verifikohet gjithashtu në një shkallë absorbimi prej 320 nm.

Shmangni mbingarkimin e pllakave PCR me produkt
Sa më shumë që dëshirohet të përdoren shumë produkte njëkohësisht, rezulton në kontaminim të kryqëzuar të pllakave PCR.

Mbingarkimi i pllakave PCR me mbetje të produkteve të ndryshme dhe e bën jashtëzakonisht të vështirë konstatimin e mostrave.

Mbani shënime për reagentët Aliquot PCR
Ciklet e vazhdueshme të ngrirjes/shkrirjes dhe përdorimi i shpeshtë i një sasie të caktuar mund të dëmtojë reagentët PCR, enzimat dhe DNTP-të nëpërmjet rikristalizimit.

Gjithmonë përpiquni të monitoroni shkallën e sasisë së përdorur gjatë përgatitjes së mostrave për t'u analizuar.

LIMS i preferuar është më i përshtatshëm për të kontrolluar inventarin dhe sasinë e reagentëve dhe mostrave të ngrira ose shkrirë.

Zgjidhni temperaturën më të mirë të pjekjes.
Zgjedhja dhe përdorimi i temperaturës së gabuar të pjekjes është një metodë tjetër që rezultatet e PCR përmbajnë gabime.

Ndonjëherë, reagimi nuk shkon siç është planifikuar.Kërkohet të ulet temperatura e pjekjes për të lehtësuar një reagim të suksesshëm.

Megjithatë, ulja e temperaturës rrit shanset e shfaqjes së dimerëve fals pozitivë dhe primerit.

Është e rëndësishme të konfirmohet analiza e kurbës së shkrirjes kur përdoren pllaka PCR pasi është një tregues i mirë i zgjedhjes së temperaturës së duhur të pjekjes.

Softueri i projektimit të primerit ndihmon në dizajnimin, sigurimin e temperaturës së duhur të pjekjes duke reduktuar drejtpërdrejt gabimin në pllakat PCR.

Keni nevojë për një pllakë PCR me cilësi të lartë?
Në rast se keni menduar se ku të gjeni një prodhues të besueshëmPllakat PCR.Mos kërkoni më sepse jeni në vendin e duhur.

Me mirësiklikoni këtu për të na kontaktuarpër produkte dhe shërbime me cilësi të lartë me një çmim që nuk do të prishë bankën.


Koha e postimit: Tetor-30-2021