5 Mẹo Đơn Giản Để Ngăn Ngừa Lỗi Khi Làm Việc Với Đĩa PCR

Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) là một trong những phương pháp được biết đến rộng rãi được sử dụng trong các phòng thí nghiệm khoa học đời sống.

Các tấm PCR được sản xuất từ ​​​​nhựa hạng nhất để xử lý và phân tích các mẫu hoặc kết quả thu được một cách xuất sắc.

Chúng có thành mỏng và đồng nhất để truyền nhiệt chính xác.

Để chuẩn bị cho các ứng dụng thời gian thực, từng phần nhỏ DNA hoặc RNA được tách riêng và lưu trữ trong các đĩa PCR.

Các tấm PCR có hiệu quả cao trong việc hàn nhiệt và hạn chế dòng nhiệt.

Tuy nhiên, vì các đĩa PCR hiệu quả và đáng tin cậy nên lỗi và độ chính xác sẽ dễ dàng giảm bớt trong khi xử lý mẫu.

Vì vậy, nếu bạn quan tâm đến việc có được một sản phẩm tốt và chất lượng caoTấm PCR.Lý tưởng nhất là liên hệ với nhà sản xuất đĩa PCR đáng tin cậy.Với điều này bạn được đảm bảo nhận được thỏa thuận tốt nhất.

Dưới đây là một số biện pháp phòng ngừa cần tuân theo để tránh làm nhiễm bẩn thuốc thử hoặc mẫu và ngăn ngừa những sai sót làm ảnh hưởng đến kết quả.

Khử trùng môi trường xung quanh
Kết quả dương tính hoặc âm tính không chính xác xảy ra do sự hiện diện của tạp chất, khiến bạn nghi ngờ kết quả.

Các tạp chất và chất gây ô nhiễm xảy ra ở nhiều dạng khác nhau như DNA không liên quan hoặc các chất phụ gia hóa học, cuối cùng làm giảm hiệu suất và hiệu quả của phản ứng.

Có nhiều cách để giảm đáng kể tỷ lệ nhiễm bẩn của đĩa PCR.

Sử dụng đầu lọc đã tiệt trùng là một cách hữu ích khác để ngăn chặn tạp chất xâm nhập vào mẫu của bạn qua pipet.

Dành một bộ thiết bị hoàn toàn sạch sẽ, bao gồm pipet và giá đỡ, dành riêng cho việc sử dụng PCR.Điều này sẽ đảm bảo việc chuyển giao không đáng kể các tạp chất hoặc chất gây ô nhiễm xung quanh phòng thí nghiệm.

Sử dụng chất tẩy, ethanol trên pipet, giá đỡ và băng ghế để lau sạch chất gây ô nhiễm.

Phân bổ một không gian dành riêng cho tất cả các phản ứng PCR của bạn để giảm thiểu ô nhiễm hạt hơn nữa.

Sử dụng găng tay sạch ở mỗi bước và thay chúng thường xuyên.

Tấm PCR
Kiểm tra nồng độ và độ tinh khiết của mẫu.
Cần duy trì độ sạch của bàn và thiết bị được sử dụng khi phân tích mẫu bằng PCR.Điều cần thiết là phải xác nhận mức độ tinh khiết của mẫu trước khi phân tích và xử lý.

Nói chung, máy phân tích sẽ xem xét nồng độ và mức độ tinh khiết của mẫu DNA.

Cố gắng tỷ lệ hấp thụ cho 260nm/280nm không được nhỏ hơn1,8.Trong khi bước sóng tiếp theo trong khoảng từ 230nm đến 320nm được sử dụng để xác định tạp chất.

Ví dụ, muối chaotropic và các hợp chất hữu cơ khác được phát hiện ở tốc độ hấp thụ 230nm.Trong khi độ đục trong các mẫu DNA cũng được phát hiện và xác minh ở tốc độ hấp thụ 320nm.

Tránh để quá nhiều đĩa PCR với sản phẩm
Dù muốn chạy nhiều sản phẩm cùng lúc nhưng điều đó sẽ dẫn đến lây nhiễm chéo các đĩa PCR.

Việc nạp quá nhiều sản phẩm PCR vào các đĩa PCR sẽ gây lãng phí và gây khó khăn cho việc xác định mẫu.

Lưu giữ hồ sơ về thuốc thử PCR Aliquot
Các chu kỳ đông lạnh/rã đông liên tục và việc sử dụng thường xuyên lượng dịch có thể làm hỏng thuốc thử PCR, enzyme và DNTP thông qua quá trình kết tinh lại.

Luôn cố gắng theo dõi tỷ lệ phần được sử dụng trong khi chuẩn bị mẫu để phân tích.

LIMS thích hợp hơn sẽ phù hợp hơn để kiểm soát lượng hàng tồn kho cũng như lượng thuốc thử và mẫu được đông lạnh hoặc tan băng.

Chọn nhiệt độ ủ tốt nhất.
Chọn và sử dụng sai nhiệt độ ủ cũng là một phương pháp khác cho kết quả PCR có lỗi.

Đôi khi, phản ứng không diễn ra như dự kiến.Người ta mong muốn giảm nhiệt độ ủ để tạo điều kiện cho phản ứng thành công.

Tuy nhiên, việc giảm nhiệt độ sẽ làm tăng khả năng xảy ra kết quả dương tính giả và xuất hiện chất làm mờ lớp sơn lót.

Điều quan trọng là phải xác nhận việc phân tích đường cong nóng chảy khi sử dụng các đĩa PCR vì đây là một chỉ báo tốt để chọn nhiệt độ ủ chính xác.

Phần mềm thiết kế mồi hỗ trợ thiết kế, cung cấp nhiệt độ ủ phù hợp giúp giảm trực tiếp lỗi trên các đĩa PCR.

Bạn Cần Một Đĩa PCR Chất Lượng Cao?
Trong trường hợp bạn đang cân nhắc tìm nhà sản xuất đáng tin cậy ở đâuTấm PCR.Không cần tìm kiếm nữa vì bạn đang ở đúng nơi.

vui lòngNhấn vào đây để liên hệ với chúng tôiđể có được các sản phẩm và dịch vụ chất lượng cao với mức giá hợp lý.


Thời gian đăng: Oct-30-2021