Falcelinta silsiladda polymerase (PCR) waa mid ka mid ah hababka caanka ah ee loo isticmaalo shaybaarrada sayniska nolosha.
Taarikada PCR waxaa laga soo saaraa balaastikada heerka koowaad si loo habeeyo iyo falanqaynta muunado ama natiijadii la soo ururiyay oo heer sare ah.
Waxay leeyihiin darbiyo dhuuban oo isku mid ah si ay u bixiyaan kulayl sax ah.
Isku diyaarinta codsiyada wakhtiga dhabta ah, qaybta daqiiqadaha ee DNA ama RNA waa la qarinayaa waxaana lagu kaydiyaa taarikada PCR.
Taarikada PCR-du aad bay ugu hufan yihiin xidhitaanka kulaylka waxayna xaddidaan socodka kulaylka sidoo kale.
Si kastaba ha ahaatee, sida wax ku ool ah oo la isku halayn karo ee taarikada PCR, khaladka iyo khaladaadka ayaa si sahal ah u dabar go'aya marka la samaynayo muunado.
Sidaa darteed, haddii aad xiisaynayso inaad hesho tayo wanaagsan oo tayo sare lehTaarikada PCR.Way ku habboon tahay in lala xidhiidho soo-saare saxan PCR ah oo la isku halayn karo.Taas waxaad ku hubinaysaa inaad hesho heshiiska ugu fiican.
Waa kuwan qaar ka mid ah taxaddarrada la raaco si looga fogaado wasakhaynta reagents ama muunadaha loogana hortago khaladaadka inay ku soo qulqulaan natiijooyinka.
Nadiifinta hareeraha
Wanaag ama xumaan aan sax ahayn ayaa u dhacda sababtoo ah joogitaanka wasakhda, taas oo kaa dhigaysa inaad ka shakido natiijooyinka.
Wasakhda iyo wasakhdu waxay u dhacdaa qaabab kala duwan sida DNA-da aan xidhiidh la lahayn ama kiimiko lagu daro taasoo aakhirka hoos u dhigta waxtarka iyo waxtarka falcelinta.
Waxaa jira siyaabo badan oo si weyn loo yareeyo heerka wasakheynta saxanka PCR.
Isticmaalka talooyinka shaandhada jeermis-dilaha ah waa hab kale oo faa'iido leh oo looga hortagayo wasakhda inay ku soo degto shaybaarkaaga iyada oo loo marayo tuubooyinka.
U diyaari qalab gebi ahaanba nadiif ah, oo ka kooban tuubooyinka iyo racks, oo si gaar ah loogu isticmaalo PCR.Tani waxay dammaanad qaadi doontaa wareejinta dayacan ee wasakhda ama wasakhda agagaarka shaybaarka.
Isticmaal bleaches, ethanol dusheeda pipettes, racks iyo kursiyada si aad u tirtirto wasakhda.
U qoondee meel gaar ah dhammaan falcelinta PCR-gaaga si aad u yarayso wasakhaynta walxaha.
Isticmaal galoofyada nadiifka ah tallaabo kasta oo baddal si joogto ah.
Taarikada PCR
Eeg sida ay isugu urursan yihiin iyo nadiifnimada Template-ka.
Nadaafadda kursiga iyo qalabka loo isticmaalo marka la falanqaynayo muunado PCR waa in la ilaaliyaa.Waa lagama maarmaan in la ansixiyo heerka nadiifnimada shaybaarada ka hor falanqaynta iyo habaynta.
Guud ahaan, falanqeeyayaasha waxay tixgaliyaan xoogga saarista iyo heerka daahirsanaanta ee shaybaarada DNA-da.
Ku dadaal saamiga nuugista ee 260nm/280nm waa inuusan ka yarayn 1.8.Halka hirarka xiga ee u dhexeeya 230nm iyo 320nm loo isticmaalo in lagu aqoonsado wasakhda.
Tusaale ahaan, cusbada fowdada ah iyo xeryahooda kale ee organic waxaa lagu ogaadaa heerka nuugista 230nm.Halka turbidity ee shaybaarada DNA sidoo kale la ogaado oo lagu xaqiijiyay heerka nuugista ee 320nm.
Iska ilaali in aad alaabta PCR ku rarto
Inta la rabo in la wada sameeyo badeecooyin badan isku mar, waxay keentaa wasakhaynta taarikada PCR-ga.
Ku-kordhinta taarikada PCR-ka ee leh qashinka alaabada kala duwan waxayna ka dhigaysaa mid aad u adag in la hubiyo shaybaarrada.
Hayso Diiwaanada Aliquot PCR Reagents
Wareegyada qaboojinta/dhalaalida joogtada ah iyo isticmaalka joogtada ah ee aliquot waxay dhaawici kartaa reagents PCR, enzymes iyo DNTP iyada oo loo marayo recrystalization.
Had iyo jeer ku dadaal inaad la socoto qiyaasta aliquot ee la isticmaalo markaad diyaarinayso muunado la lafaguro.
LIMS-da la door bidayo ayaa aad ugu habboon in la xakameeyo agabka iyo cadadka reagen-yaasha iyo muunadaha barafoobay ama dhalaalay.
Dooro Heerkulka ugu Wanaagsan.
Xulashada iyo isticmaalka heerkulka jilitaanka khaldan waa hab kale oo natiijooyinka PCR ay ku jiraan khalad.
Mararka qaarkood, falcelintu uma socoto sidii la qorsheeyay.Waxaa la rabaa in la yareeyo heerkulka jilbiska si loo fududeeyo falcelinta guusha leh.
Si kastaba ha noqotee, hoos u dhigista heerkulka waxay kordhisaa fursadaha faa'iidooyin been abuur ah iyo muuqaalka hore ee dimers.
Waa muhiim in la xaqiijiyo falanqaynta qalooca dhalaalka marka la isticmaalayo taarikada PCR maadaama ay tahay tilmaame wanaagsan oo lagu dooranayo heerkulka saxda ah ee nuglaanta.
Naqshadaynta softiweerka aasaasiga ah ee leh naqshadaynta, bixinta heerkulka saxda ah ee nuglaanta oo si toos ah u yaraynaysa qaladka taarikada PCR.
Ma u baahan tahay saxan PCR tayo sare leh?
Haddii ay dhacdo in aad ka fikiraysay halka aad ka heli lahayd soo saaraha la isku halayn karoTaarikada PCR.Mar dambe ha raadin sababtoo ah waxaad joogtaa meesha saxda ah.
Si naxariis lehhalkan guji si aad nala soo xidhiidhoalaabta iyo adeega tayada sare leh ee aan jabin doonin bangiga.
Waqtiga boostada: Oct-30-2021