5 yksinkertaista vinkkiä virheiden estämiseen PCR-levyjen kanssa työskenneltäessä

Polymeraasiketjureaktiot (PCR) ovat yksi yleisesti tunnetuista biotieteiden laboratorioissa käytetyistä menetelmistä.

PCR-levyt on valmistettu ensiluokkaisesta muovista näytteiden tai kerättyjen tulosten erinomaista käsittelyä ja analysointia varten.

Niissä on ohuet ja homogeeniset seinät, jotka takaavat tarkan lämmönsiirron.

Valmistettaessa reaaliaikaisia ​​sovelluksia, pieni osa DNA:ta tai RNA:ta eristetään ja varastoidaan PCR-levyille.

PCR-levyt ovat erittäin tehokkaita kuumasaumauksessa ja rajoittavat myös lämmön virtausta.

Kuitenkin niin tehokkaita ja luotettavia kuin PCR-levyt ovat, virheet ja epätarkkuudet esiintyvät helposti näytteitä käsiteltäessä.

Siksi, jos olet kiinnostunut saamaan hyvää ja laadukastaPCR-levyt.On ihanteellista ottaa yhteyttä luotettavaan PCR-levyjen valmistajaan.Tämän avulla olet varma, että saat parhaan tarjouksen.

Tässä on joitain varotoimia, joita on noudatettava, jotta vältetään reagenssien tai näytteiden kontaminaatio ja estetään epätarkkuuksien pääsy tuloksiin.

Ympäristön sterilointi
Vääriä positiivisia tai negatiivisia asioita esiintyy epäpuhtauksien vuoksi, mikä saa sinut epäilemään tuloksia.

Epäpuhtaudet ja epäpuhtaudet esiintyvät eri muodoissa, kuten toisiinsa liittymättömänä DNA:na tai kemiallisina lisäaineina, jotka lopulta heikentävät reaktion tehokkuutta ja tehokkuutta.

On olemassa lukuisia tapoja vähentää huomattavasti PCR-levyn kontaminaationopeutta.

Steriloitujen suodatinkärkien käyttäminen on toinen hyödyllinen tapa estää epäpuhtauksien pääsy näytteihisi pipettien kautta.

Käytä täysin puhdasta laitteistoa, joka koostuu pipeteistä ja telineistä, yksinomaan PCR:n käyttöön.Tämä takaa mitättömän epäpuhtauksien tai epäpuhtauksien siirtymisen laboratorion ympärille.

Käytä valkaisuaineita, etanolia pipeteissä, telineissä ja penkeissä epäpuhtauksien pyyhkimiseen.

Minimoi hiukkaskontaminaation entisestään varaamalla varattu tila kaikille PCR-reaktioille.

Käytä puhtaita käsineitä joka vaiheessa ja vaihda ne usein.

PCR-levyt
Tarkista mallin pitoisuus ja puhtaus.
PCR:llä näytteiden analysoinnissa käytettyjen laitteiden ja laitteiden puhtaus on säilytettävä.On tärkeää validoida näytteiden puhtausaste ennen analysointia ja käsittelyä.

Yleensä analysaattorit ottavat huomioon DNA-näytteiden pitoisuuden ja puhtaustason.

Pyri 260nm/280nm:n absorbanssisuhteen olemaan vähintään 1,8.Samalla kun myöhempiä aallonpituuksia välillä 230 nm ja 320 nm käytetään epäpuhtauksien tunnistamiseen.

Eräässä tapauksessa kaotrooppisia suoloja ja muita orgaanisia yhdisteitä havaitaan 230 nm:n absorbanssinopeudella.DNA-näytteiden sameus havaitaan ja varmistetaan myös 320 nm:n absorbanssinopeudella.

Vältä PCR-levyjen ylikuormittamista tuotteella
Niin paljon kuin halutaan käyttää useita tuotteita samanaikaisesti, se johtaa PCR-levyjen ristikontaminaatioon.

PCR-levyjen ylikuormittaminen erilaisilla tuotteilla tuhlaa ja tekee näytteiden tunnistamisen erittäin vaikeaksi.

Pidä kirjaa alikvooteista PCR-reagensseista
Jatkuvat jäädytys-/sulatusjaksot ja toistuva alikvootin käyttö voivat vahingoittaa PCR-reagensseja, entsyymejä ja DNTP:itä uudelleenkiteytymisen vuoksi.

Pyri aina valvomaan käytetyn alikvootin määrää valmistellessasi analysoitavia näytteitä.

Edullinen LIMS soveltuu paremmin varaston ja jäädytettyjen tai sulatettujen reagenssien ja näytteiden määrän hallitsemiseen.

Valitse paras hehkutuslämpötila.
Väärän hehkutuslämpötilan valitseminen ja käyttö on jälleen yksi menetelmä, jossa PCR-tulokset sisältävät virheitä.

Joskus reaktio ei mene suunnitelmien mukaan.On toivottavaa alentaa hehkutuslämpötilaa onnistuneen reaktion helpottamiseksi.

Lämpötilan alentaminen lisää kuitenkin väärien positiivisten tulosten ja alukedimeerien esiintymisen todennäköisyyttä.

On tärkeää vahvistaa sulamiskäyrän analyysi PCR-levyjä käytettäessä, koska se on hyvä indikaattori oikean hehkutuslämpötilan valinnassa.

Primer-suunnitteluohjelmisto auttaa suunnittelussa, oikean hehkutuslämpötilan tarjoaminen vähentää suoraan virheitä PCR-levyissä.

Tarvitsetko korkealaatuisen PCR-levyn?
Jos olet miettinyt mistä löytää luotettavan valmistajanPCR-levyt.Älä etsi enää, koska olet oikeassa paikassa.

Ystävällisestiota meihin yhteyttä napsauttamalla tätäkorkealaatuisista tuotteista ja palveluista hintaan, joka ei riko pankkia.


Postitusaika: 30.10.2021