پولیمریز چین ری ایکشنز (PCR) لائف سائنس لیبارٹریوں میں استعمال ہونے والے وسیع پیمانے پر معروف طریقوں میں سے ایک ہے۔
پی سی آر پلیٹیں بہترین پروسیسنگ اور جمع کیے گئے نمونوں یا نتائج کے تجزیہ کے لیے فرسٹ کلاس پلاسٹک سے تیار کی جاتی ہیں۔
عین مطابق تھرمل ٹرانسفر فراہم کرنے کے لیے ان میں پتلی اور یکساں دیواریں ہیں۔
ریئل ٹائم ایپلی کیشنز کی تیاری میں، ڈی این اے یا آر این اے کے منٹ سیکشن کو پی سی آر پلیٹوں میں الگ کر کے محفوظ کیا جاتا ہے۔
پی سی آر پلیٹیں ہیٹ سیل کرنے میں انتہائی کارآمد ہیں اور گرمی کے بہاؤ کو بھی محدود کرتی ہیں۔
تاہم، پی سی آر پلیٹیں جتنی موثر اور قابل اعتماد ہیں، نمونوں کی پروسیسنگ کے دوران غلطی اور غلطیاں آسانی سے ختم ہوجاتی ہیں۔
لہذا، اگر آپ ایک اچھا اور اعلی معیار حاصل کرنے میں دلچسپی رکھتے ہیںپی سی آر پلیٹیں۔قابل اعتماد پی سی آر پلیٹ بنانے والے سے رابطہ کرنا مثالی ہے۔اس کے ساتھ آپ کو بہترین ڈیل حاصل کرنے کا یقین ہے۔
ری ایجنٹس یا نمونوں کی آلودگی سے بچنے اور نتائج میں غلطیاں پیدا ہونے سے روکنے کے لیے کچھ احتیاطی تدابیر یہ ہیں۔
گردونواح کو جراثیم سے پاک کرنا
نجاست کی موجودگی کی وجہ سے غلط مثبت یا منفی پائے جاتے ہیں، جس سے آپ کو نتائج پر شک ہوتا ہے۔
نجاست اور آلودگی مختلف شکلوں میں پائے جاتے ہیں جیسے کہ غیر متعلقہ ڈی این اے یا کیمیائی اضافی جو بالآخر رد عمل کی کارکردگی اور تاثیر کو کم کر دیتے ہیں۔
پی سی آر پلیٹ کی آلودگی کی شرح کو بہت حد تک کم کرنے کے بہت سے طریقے ہیں۔
جراثیم سے پاک فلٹر ٹپس کا استعمال ایک اور مفید طریقہ ہے جس سے نجاست کو پائپیٹ کے ذریعے آپ کے نمونوں میں رینگنے سے روکا جا سکتا ہے۔
پی سی آر کے استعمال کے لیے مکمل طور پر صاف ستھرا سامان، پائپٹس اور ریک پر مشتمل وقف کریں۔یہ لیبارٹری کے ارد گرد نجاست یا آلودگیوں کی نہ ہونے کے برابر منتقلی کی ضمانت دے گا۔
آلودگیوں کو صاف کرنے کے لیے پائپیٹ، ریک اور بینچوں پر بلیچ، ایتھنول کا استعمال کریں۔
ذرات کی آلودگی کو مزید کم کرنے کے لیے اپنے تمام PCR رد عمل کے لیے ایک مخصوص جگہ مختص کریں۔
ہر قدم پر صاف دستانے استعمال کریں اور انہیں کثرت سے تبدیل کریں۔
پی سی آر پلیٹیں۔
سانچے کے ارتکاز اور پاکیزگی کا معائنہ کریں۔
پی سی آر کے ساتھ نمونوں کا تجزیہ کرتے وقت استعمال ہونے والے بینچ اور آلات کی صفائی کو برقرار رکھا جانا چاہیے۔تجزیہ اور پروسیسنگ سے پہلے نمونوں کی پاکیزگی کی ڈگری کی توثیق کرنا ضروری ہے۔
عام طور پر، تجزیہ کار ڈی این اے کے نمونوں کے ارتکاز اور پاکیزگی کی سطح کو مدنظر رکھتے ہیں۔
260nm/280nm کے لیے جذب کا تناسب 1.8 سے کم نہیں ہونا چاہیے۔جبکہ بعد میں طول موج 230nm اور 320nm کے درمیان نجاست کی شناخت کے لیے استعمال کی جاتی ہے۔
مثال کے طور پر، chaotropic نمکیات اور دیگر نامیاتی مرکبات 230nm جذب کی شرح پر پائے جاتے ہیں۔جبکہ ڈی این اے کے نمونوں میں ٹربائڈیٹی کا بھی پتہ چلا اور 320nm کی جاذبیت کی شرح سے تصدیق کی جاتی ہے۔
مصنوعات کے ساتھ پی سی آر پلیٹوں کو اوور لوڈ کرنے سے گریز کریں۔
ایک ساتھ ایک سے زیادہ پروڈکٹس کو چلانے کی جس قدر خواہش ہوتی ہے، اس کے نتیجے میں پی سی آر پلیٹوں کی کراس آلودگی ہوتی ہے۔
پی سی آر پلیٹوں کو مختلف مصنوعات کے فضلے کے ساتھ اوور لوڈ کرنا اور نمونوں کا پتہ لگانا انتہائی مشکل بنا دیتا ہے۔
ایلی کوٹ پی سی آر ری ایجنٹس کا ریکارڈ رکھیں
مسلسل منجمد/پگھلنے کے چکر اور ایلی کوٹ کا بار بار استعمال پی سی آر ری ایجنٹس، انزائمز اور ڈی این ٹی پیز کو دوبارہ ری اسٹالائزیشن کے ذریعے نقصان پہنچا سکتا ہے۔
تجزیہ کرنے کے لیے نمونے تیار کرتے وقت استعمال کیے جانے والے ایلی کوٹ کی شرح کو ہمیشہ مانیٹر کرنے کی کوشش کریں۔
ترجیحی LIMS انوینٹری اور ری ایجنٹس اور نمونوں کی مقدار کو کنٹرول کرنے کے لیے زیادہ موزوں ہے۔
اینیلنگ کا بہترین درجہ حرارت چنیں۔
غلط اینیلنگ درجہ حرارت کو چننا اور استعمال کرنا پی سی آر کے نتائج میں غلطی کا ایک اور طریقہ ہے۔
بعض اوقات، ردعمل منصوبہ بندی کے مطابق نہیں ہوتا ہے۔ایک کامیاب رد عمل کی سہولت کے لیے اینیلنگ کے درجہ حرارت کو کم کرنے کی خواہش کی جاتی ہے۔
تاہم، درجہ حرارت کو کم کرنے سے جھوٹے مثبت اور پرائمر ڈائمر کے ظاہر ہونے کے امکانات بڑھ جاتے ہیں۔
پی سی آر پلیٹوں کا استعمال کرتے وقت پگھلنے والے منحنی خطوط کے تجزیہ کی تصدیق کرنا اہم ہے کیونکہ یہ صحیح اینیلنگ درجہ حرارت کو منتخب کرنے کا ایک اچھا اشارہ ہے۔
پرائمر ڈیزائن سافٹ ویئر ڈیزائننگ میں مدد کرتا ہے، صحیح اینیلنگ درجہ حرارت کے ساتھ پی سی آر پلیٹوں میں غلطی کو براہ راست کم کرتا ہے۔
اعلیٰ معیار کی پی سی آر پلیٹ کی ضرورت ہے؟
اگر آپ اس بات پر غور کر رہے ہیں کہ ایک قابل اعتماد کارخانہ دار کو کہاں تلاش کرنا ہے۔پی سی آر پلیٹیں۔.مزید تلاش نہ کریں کیونکہ آپ صحیح جگہ پر ہیں۔
مہربانی سےہم سے رابطہ کرنے کے لیے یہاں کلک کریں۔اعلی معیار کی مصنوعات اور خدمات کے لیے ایسی قیمت پر جو بینک کو نہیں توڑے گی۔
پوسٹ ٹائم: اکتوبر 30-2021