Полимеразды тізбекті реакциялар (ПТР) өмір туралы ғылым зертханаларында қолданылатын кеңінен танымал әдістердің бірі болып табылады.
ПТР пластиналары үлгілерді немесе жиналған нәтижелерді тамаша өңдеу және талдау үшін бірінші класты пластмассадан жасалған.
Оларда дәл жылу беруді қамтамасыз ететін жұқа және біртекті қабырғалары бар.
Нақты уақыттағы қолданбаларға дайындық кезінде ДНҚ немесе РНҚ-ның минуттық бөлімі оқшауланады және ПТР пластиналарында сақталады.
ПТР пластиналары жылумен тығыздауда жоғары тиімді және жылу ағынын шектейді.
Дегенмен, ПТР тақталары қаншалықты тиімді және сенімді болса, үлгілерді өңдеу кезінде қателер мен дәлсіздіктер оңай жойылады.
Сондықтан, егер сіз жақсы және жоғары сапаны алуға мүдделі болсаңызПТР тақталары.Сенімді ПТР пластинасының өндірушісімен байланысу өте қолайлы.Осы арқылы сіз ең жақсы мәміле алуға сенімді боласыз.
Мұнда реагенттер немесе үлгілердің ластануын болдырмау және нәтижелерге дәлсіздіктердің түсуін болдырмау үшін орындалатын кейбір сақтық шаралары берілген.
Айналадағыларды зарарсыздандыру
Қате оң немесе теріс қоспалардың болуына байланысты пайда болады, бұл нәтижеге күмән келтіреді.
Қоспалар мен ластаушылар бір-бірімен байланысы жоқ ДНҚ немесе химиялық қоспалар сияқты әртүрлі формаларда кездеседі, нәтижесінде реакцияның тиімділігі мен тиімділігі төмендейді.
ПТР пластинасының ластану жылдамдығын айтарлықтай төмендетудің көптеген жолдары бар.
Зарарсыздандырылған сүзгі ұштарын пайдалану - тамшуырлар арқылы үлгілеріңізге қоспалардың енуін болдырмаудың тағы бір пайдалы жолы.
Тамшуырлар мен сөрелерден тұратын толығымен таза жабдық жинағын тек ПТР қолдану үшін арнаңыз.Бұл зертхананың айналасында қоспалардың немесе ластаушы заттардың болмашы тасымалдануына кепілдік береді.
Ластаушы заттарды сүрту үшін тамшуырларда, сөрелерде және орындықтарда ағартқыштарды, этанолды пайдаланыңыз.
Бөлшектердің ластануын одан әрі азайту үшін барлық ПТР реакцияларыңыз үшін резервтік орын бөліңіз.
Әр қадамда таза қолғапты пайдаланыңыз және оларды жиі ауыстырыңыз.
ПТР тақталары
Үлгінің концентрациясы мен тазалығын тексеріңіз.
ПТР көмегімен үлгілерді талдау кезінде қолданылатын орындық пен жабдықтың тазалығын сақтау керек.Талдау және өңдеу алдында үлгілердің тазалық дәрежесін растау өте маңызды.
Әдетте анализаторлар ДНҚ үлгілерінің концентрациясы мен тазалық деңгейін ескереді.
260 нм/280 нм үшін сіңіру коэффициенті 1,8 кем болмауы керек.Қоспаларды анықтау үшін 230 нм мен 320 нм арасындағы кейінгі толқын ұзындығы пайдаланылады.
Мысалы, хаотропты тұздар және басқа органикалық қосылыстар 230 нм сіңіру жылдамдығында анықталады.Сонымен қатар ДНҚ үлгілеріндегі бұлыңғырлық 320 нм сіңіру жылдамдығында анықталады және тексеріледі.
ПТР пластиналарын өніммен шамадан тыс жүктеуден аулақ болыңыз
Қаншалықты бір уақытта бірнеше өнімді іске қосу қажет болса, бұл ПТР пластиналарының айқаспалы ластануына әкеледі.
ПТР пластинкаларын әртүрлі өнімдер қалдықтарымен шамадан тыс жүктеу үлгілерді анықтауды өте қиындатады.
Аликвот ПТР реагенттерінің жазбаларын сақтаңыз
Үздіксіз мұздату/еріту циклдары және аликвотты жиі пайдалану қайта кристалдану арқылы ПТР реагенттеріне, ферменттерге және DNTP-ге зақым келтіруі мүмкін.
Талдауға арналған үлгілерді дайындау кезінде әрқашан пайдаланылған аликвоттық мөлшерлемені бақылауға тырысыңыз.
Қолайлы LIMS инвентаризацияны және мұздатылған немесе еріген реагенттер мен үлгілердің мөлшерін бақылау үшін қолайлырақ.
Ең жақсы күйдіру температурасын таңдаңыз.
Қате күйдіру температурасын таңдау және пайдалану ПТР нәтижелерінде қате бар тағы бір әдіс.
Кейде реакция жоспарланғандай болмайды.Сәтті реакцияны жеңілдету үшін жасыту температурасын төмендету қажет.
Дегенмен, температураны төмендету жалған позитивтердің және праймер димерлерінің пайда болу мүмкіндігін арттырады.
ПТР пластиналарын пайдалану кезінде балқу қисығының талдауын растау маңызды, өйткені бұл дұрыс күйдіру температурасын таңдаудың жақсы көрсеткіші болып табылады.
Праймерді жобалауға арналған бағдарламалық құрал ПТР пластиналарындағы қателерді тікелей азайта отырып, дұрыс жасыту температурасын жобалауға, қамтамасыз етуге көмектеседі.
Жоғары сапалы ПТР пластинасы қажет пе?
Егер сіз сенімді өндірушіні қайдан табуға болатынын ойласаңызПТР тақталары.Енді іздемеңіз, себебі сіз дұрыс жердесіз.
Мейірімділікпенбізбен байланысу үшін осы жерді басыңызбанкті бұзбайтын баға бойынша жоғары сапалы өнімдер мен қызмет көрсету үшін.
Жіберу уақыты: 30 қазан 2021 ж