E reazzione in catena di polimerasi (PCR) sò unu di i metudi largamente cunnisciuti utilizati in laboratori di scienza di a vita.
I platti PCR sò pruduciuti da plastica di prima classe per un processu è analisi eccellente di campioni o risultati raccolti.
Hanu pareti sottili è omogenei per furnisce un trasferimentu termale precisu.
In preparazione per l'applicazioni in tempu reale, a sezione minuti di DNA o RNA sò isolati è almacenati in platti PCR.
I platti di PCR sò assai efficaci in u termosigillamentu è limitanu ancu u flussu di calore.
Tuttavia, cum'è efficaci è affidabili sò e placche PCR, l'errore è l'imprecisioni si sdrughjenu facilmente durante u processu di campioni.
Dunque, s'è vo site interessatu à ottene una qualità bona è altapiastre di PCR.Hè ideale per cuntattà un fabricatore affidabile di placche PCR.Cù questu vi assicuratevi di ottene u megliu affare.
Eccu alcune precauzioni da seguità per evità contaminazioni di reagenti o campioni è impediscenu l'imprecisioni di scaccià in i risultati.
Sterilizazione di u circondu
I pusitivi o negativi incorretti si sò per via di a prisenza di impurità, chì facenu dubbità i risultati.
L'impurità è i contaminanti si trovanu in diverse forme, cum'è DNA senza relazione o additivi chimichi chì eventualmente diminuiscenu l'efficienza è l'efficacità di a reazione.
Ci hè parechje manere di riduce assai a rata di contaminazione di a placa PCR.
L'usu di punte di filtri sterilizzati hè un altru modu utile per prevene l'impurità di intruduce in i vostri campioni attraversu e pipette.
Dedicate un inseme cumpletamente pulito di l'equipaggiu, cumpostu di pipette è rack, esclusivamente per l'usu di PCR.Questu guarantisci un trasferimentu insignificante di impurità o contaminanti intornu à u laboratoriu.
Aduprate bleaches, etanolu nantu à e pipette, rack è banche per sguassà i contaminanti.
Assegnate un spaziu riservatu per tutte e vostre reazzioni PCR per minimizzà ancu a contaminazione di particelle.
Aduprate guanti puliti à ogni passu è rimpiazzali spessu.
piastre di PCR
Inspect the Concentration and Purity of the Template.
A pulizia di u bancu è di l'equipaggiu utilizatu quandu analizà e mostre cù a PCR deve esse mantinuta.Hè essenziale per cunvalidà u gradu di purezza di i campioni prima di l'analisi è di trasfurmazioni.
In generale, l'analizzatori piglianu in considerazione a concentrazione è u livellu di purità di i campioni di DNA.
Pruvate u rapportu di assorbanza per 260nm / 280nm ùn deve esse menu di 1.8.Mentre chì e lunghezze d'onda successive trà 230 nm è 320 nm sò usate per identificà impurità.
À un esempiu, i sali caotropichi è altri composti organici sò rilevati à una rata di assorbanza di 230 nm.Mentre a turbidità in i campioni di DNA sò ancu rilevati è verificati à una rata di assorbanza di 320 nm.
Evite sovraccaricare i piatti PCR cù u pruduttu
Quantu hè vulsutu di eseguisce parechji prudutti simultaneamente, risultatu in a contaminazione incruciata di e placche PCR.
Overloading the plates PCR with different products waste è rende estremamente difficiuli di cercà i campioni.
Mantene i registri di i Reagenti PCR Aliquot
I cicli continui di congelazione / scongelu è l'usu frequente di aliquote puderanu dannà i reagenti di PCR, l'enzimi è i DNTP per via di a recristallizazione.
Pruvate sempre di monitorà a tarifa di aliquota utilizata mentre preparanu i campioni da analizà.
LIMS preferibile hè più adattatu per cuntrullà l'inventariu è a quantità di reagenti è campioni congelati o scongelati.
Sceglite a megliu temperatura di ricottura.
A scelta è l'usu di a temperatura d'annealing sbagliata hè un altru mètudu chì i risultati PCR cuntenenu errore.
Calchì volta, a reazione ùn viaghja micca cum'è previstu.Hè vulsutu riduce a temperatura di annealing per facilità una reazione successu.
Tuttavia, calà a temperatura aumenta a probabilità di falsi pusitivi è l'apparizione di dimeri di primer.
Hè significativu per cunfirmà l'analisi di a curva di fusione quandu si usanu e placche PCR, perchè hè un bon indicatore di selezzione di a temperatura di annealing curretta.
U software di cuncepimentu di l'iniziu aiuta à cuncepimentu, furnisce una temperatura di annealing ghjusta è riduce direttamente l'errore in e piastre PCR.
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Tempu di pubblicazione: 30-oct-2021