Полимеразын гинжин урвал (ПГУ) нь амьдралын шинжлэх ухааны лабораторид өргөн хэрэглэгддэг аргуудын нэг юм.
ПГУ-ын хавтангууд нь цуглуулсан дээж эсвэл үр дүнг маш сайн боловсруулж, дүн шинжилгээ хийхэд зориулж нэгдүгээр зэрэглэлийн хуванцараар үйлдвэрлэгддэг.
Нарийн дулаан дамжуулалтыг хангахын тулд тэдгээр нь нимгэн, нэгэн төрлийн ханатай.
Бодит цагийн хэрэглээнд бэлтгэхийн тулд ДНХ эсвэл РНХ-ийн минутын хэсгийг тусгаарлаж, ПГУ-ын ялтсуудад хадгалдаг.
ПГУ-ын хавтан нь дулааны битүүмжлэлд өндөр үр ашигтай бөгөөд дулааны урсгалыг хязгаарладаг.
Гэсэн хэдий ч ПГУ-ын ялтсууд нь үр дүнтэй, найдвартай байдаг тул дээжийг боловсруулах явцад алдаа, алдаа амархан арилдаг.
Тиймээс сайн, чанартай авах сонирхолтой болПГУ-ын хавтан.Найдвартай ПГУ-ын хавтан үйлдвэрлэгчтэй холбоо барих нь хамгийн тохиромжтой.Ингэснээр та хамгийн сайн гэрээг авах болно.
Урвалж эсвэл дээжийг бохирдуулахгүйн тулд зарим урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээг дагаж мөрдөх, үр дүнд алдаа гарахаас урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээг энд оруулав.
Хүрээлэн буй орчныг ариутгах
Буруу эерэг эсвэл сөрөг үр дүнд нь эргэлзэж буй хольц байгаатай холбоотойгоор үүсдэг.
Бохирдол ба бохирдуулагч нь харилцан хамааралгүй ДНХ эсвэл химийн нэмэлтүүд гэх мэт янз бүрийн хэлбэрээр үүсдэг бөгөөд энэ нь эцэстээ урвалын үр ашиг, үр нөлөөг бууруулдаг.
ПГУ-ын хавтангийн бохирдлыг бууруулах олон арга бий.
Ариутгасан шүүлтүүрийн зөвлөмжийг ашиглах нь соруураар дамжуулан сорьц руу бохирдол орохоос сэргийлэх бас нэг ашигтай арга юм.
Зөвхөн ПГУ-ын хэрэглээнд зориулагдсан пипетк болон тавиуруудаас бүрдсэн бүрэн цэвэрхэн тоног төхөөрөмжийг зориул.Энэ нь лабораторийн эргэн тойронд хольц эсвэл бохирдуулагчийг үл тоомсорлох баталгаа болно.
Цайруулагч бодис, этилийн спиртийг соруур, тавиур, вандан сандал дээр ашиглан бохирдуулагч бодисыг арчина.
Бөөмийн бохирдлыг багасгахын тулд бүх ПГУ-ын урвалд зориулж нөөц зайг хуваарилаарай.
Алхам бүрт цэвэр бээлий хэрэглэж, байнга солих хэрэгтэй.
ПГУ-ын хавтан
Загварын концентраци ба цэвэр байдлыг шалгана уу.
ПГУ-ын тусламжтайгаар дээжийг шинжлэхэд ашиглаж буй вандан сандал, тоног төхөөрөмжийн цэвэр байдлыг хангасан байх ёстой.Шинжилгээ, боловсруулалт хийхийн өмнө дээжийн цэвэр байдлын зэргийг баталгаажуулах нь чухал юм.
Ерөнхийдөө анализаторууд ДНХ-ийн дээжийн концентраци, цэвэр байдлын түвшинг харгалзан үздэг.
260нм/280нм-ийн шингээлтийн харьцаа 1.8-аас багагүй байх ёстой.230 нм-ээс 320 нм хүртэлх дараагийн долгионы уртыг бохирдлыг тодорхойлоход ашигладаг.
Жишээлбэл, хаотроп давс болон бусад органик нэгдлүүдийг 230 нм-ийн шингээлтийн хурдаар илрүүлдэг.ДНХ-ийн дээж дэх булингарыг мөн 320 нм-ийн шингээлтийн хурдаар илрүүлж, баталгаажуулдаг.
ПГУ-ын хавтанг бүтээгдэхүүнээр хэт ачаалахаас зайлсхий
Хэдий олон бүтээгдэхүүнийг нэгэн зэрэг ажиллуулахыг хүсч байгаа ч энэ нь ПГУ-ын ялтсуудыг хөндлөн бохирдуулдаг.
ПГУ-ын ялтсуудыг өөр өөр бүтээгдэхүүний хог хаягдлаар хэт ачаалах нь дээжийг тодорхойлоход маш хэцүү болгодог.
Aliquot PCR урвалжуудын бүртгэл хөтөл
Тасралтгүй хөлдөөх/гэсгээх мөчлөг болон аликвотыг байнга хэрэглэх нь дахин талстжих замаар ПГУ-ын урвалж, фермент, DNTP-ийг гэмтээж болзошгүй.
Шинжилгээнд хамрагдах дээжийг бэлтгэх явцад ашигласан аликвотын хэмжээг байнга хянаж байх хэрэгтэй.
LIMS нь бараа материал, хөлдөөсөн, гэссэн урвалж, дээжийн хэмжээг хянахад илүү тохиромжтой.
Хатаах хамгийн сайн температурыг сонго.
Хатаах температурыг буруу сонгох, ашиглах нь ПГУ-ын үр дүнд алдаа гардаг өөр нэг арга юм.
Заримдаа хариу үйлдэл нь төлөвлөсөн шиг болдоггүй.Амжилттай урвалыг хөнгөвчлөхийн тулд зөөлрүүлэх температурыг багасгахыг хүсч байна.
Гэсэн хэдий ч температурыг бууруулах нь хуурамч эерэг болон праймер димер харагдах магадлалыг нэмэгдүүлдэг.
ПГУ-ын хавтанг ашиглахдаа хайлах муруйны шинжилгээг баталгаажуулах нь чухал бөгөөд энэ нь хатаах температурыг зөв сонгох сайн үзүүлэлт юм.
Праймер дизайны програм хангамж нь ПГУ-ын ялтсуудын алдааг шууд багасгаж, зөв боловсруулалтын температурыг хангахад тусалдаг.
Өндөр чанартай ПГУ-ын хавтан хэрэгтэй байна уу?
Хэрэв та найдвартай үйлдвэрлэгчийг хаанаас олох талаар бодож байсан болПГУ-ын хавтан.Та зөв газартаа байгаа тул дахин хайх хэрэггүй.
Сайхан сэтгэлтэйэнд дарж бидэнтэй холбоо барина ууөндөр чанартай бүтээгдэхүүн үйлчилгээг үнэд хүргэхгүй.
Шуудангийн цаг: 2021 оны 10-р сарын 30