पोलिमरेज चेन रियाक्सन (PCR) जीवन विज्ञान प्रयोगशालाहरूमा प्रयोग हुने व्यापक रूपमा ज्ञात विधिहरू मध्ये एक हो।
PCR प्लेटहरू उत्कृष्ट प्रशोधन र संकलन गरिएका नमूनाहरू वा नतिजाहरूको विश्लेषणका लागि प्रथम श्रेणीको प्लास्टिकबाट उत्पादन गरिन्छ।
तिनीहरूसँग सटीक थर्मल स्थानान्तरण प्रदान गर्न पातलो र एकसमान पर्खालहरू छन्।
वास्तविक समय अनुप्रयोगहरूको लागि तयारीमा, DNA वा RNA को मिनेट सेक्शन एकान्त र PCR प्लेटहरूमा भण्डारण गरिन्छ।
PCR प्लेटहरू तातो सीलमा अत्यधिक कुशल छन् र तापको प्रवाहलाई पनि प्रतिबन्धित गर्दछ।
यद्यपि, पीसीआर प्लेटहरू प्रभावकारी र भरपर्दो भएकाले, नमूनाहरू प्रशोधन गर्दा त्रुटि र अशुद्धताहरू सजिलैसँग हट्छन्।
तसर्थ, यदि तपाईं राम्रो र उच्च गुणस्तर प्राप्त गर्न इच्छुक हुनुहुन्छपीसीआर प्लेटहरू।भरपर्दो पीसीआर प्लेट निर्मातालाई सम्पर्क गर्नु उपयुक्त हुन्छ।यो संग तपाईं सबै भन्दा राम्रो सम्झौता प्राप्त गर्न निश्चित हुनुहुन्छ।
अभिकर्मक वा नमूनाहरूको प्रदूषणबाट बच्न र नतिजाहरूमा अशुद्धताहरू आउनबाट जोगाउन यहाँ केही सावधानीहरू पालना गर्न सकिन्छ।
वरपरको स्टेरिलाइजिङ
गलत सकारात्मक वा नकारात्मक अशुद्धताहरूको उपस्थितिको कारण हुन्छ, जसले तपाईंलाई नतिजाहरूमा शंका गर्छ।
अशुद्धता र प्रदूषकहरू विभिन्न रूपहरूमा हुन्छन् जस्तै असंबद्ध DNA वा रासायनिक additives जसले अन्ततः प्रतिक्रियाको दक्षता र प्रभावकारिता घटाउँछ।
त्यहाँ धेरै तरिकाहरू छन् पीसीआर प्लेटको प्रदूषण दर कम गर्न।
निर्जंतुक फिल्टर युक्तिहरू प्रयोग गरेर पिपेटहरू मार्फत तपाईंको नमूनाहरूमा अशुद्धताहरू आउनबाट रोक्नको लागि अर्को उपयोगी तरिका हो।
PCR को प्रयोगको लागि मात्र पिपेट र र्याकहरू समावेश गरी पूर्ण रूपमा सफा उपकरणहरू समर्पित गर्नुहोस्।यसले प्रयोगशाला वरपर अशुद्धता वा प्रदूषकहरूको नगण्य स्थानान्तरणको ग्यारेन्टी गर्नेछ।
प्रदूषकहरू मेटाउनको लागि पिपेट, र्याक र बेन्चहरूमा ब्लीच, इथानोल प्रयोग गर्नुहोस्।
कण संदूषणलाई थप न्यूनीकरण गर्नका लागि तपाइँका सबै PCR प्रतिक्रियाहरूको लागि एक आरक्षित ठाउँ आवंटित गर्नुहोस्।
प्रत्येक चरणमा सफा पन्जा प्रयोग गर्नुहोस् र तिनीहरूलाई बारम्बार बदल्नुहोस्।
पीसीआर प्लेटहरू
टेम्प्लेटको एकाग्रता र शुद्धता निरीक्षण गर्नुहोस्।
पीसीआर मार्फत नमूनाहरू विश्लेषण गर्दा प्रयोग हुने बेन्च र उपकरणको सरसफाइ कायम गर्नुपर्छ।विश्लेषण र प्रशोधन गर्नु अघि नमूनाहरूको शुद्धताको डिग्री प्रमाणित गर्न आवश्यक छ।
सामान्यतया, विश्लेषकहरूले DNA नमूनाहरूको एकाग्रता र शुद्धता स्तरलाई ध्यानमा राख्छन्।
प्रयास गर्नुहोस् 260nm/280nm को लागि अवशोषणको अनुपात 1.8 भन्दा कम हुनु हुँदैन।जबकि 230nm र 320nm बीचको तरंगदैर्ध्य अशुद्धताहरू पहिचान गर्न प्रयोग गरिन्छ।
एक उदाहरणमा, chaotropic लवण र अन्य जैविक यौगिकहरू 230nm अवशोषण दरमा पत्ता लगाइन्छ।जबकि डीएनए नमूनाहरूमा टर्बिडिटी पनि पत्ता लगाइन्छ र 320nm को अवशोषण दरमा प्रमाणित गरिन्छ।
उत्पादनमा पीसीआर प्लेटहरू ओभरलोड नगर्नुहोस्
जति धेरै उत्पादनहरू एकैसाथ चलाउन चाहन्छन्, यसले PCR प्लेटहरू क्रस-दूषित पार्ने परिणाम दिन्छ।
पीसीआर प्लेटमा विभिन्न उत्पादनको फोहोर ओभरलोड गर्दा नमूनाहरू पत्ता लगाउन निकै कठिन हुन्छ।
Aliquot PCR अभिकर्मकहरूको रेकर्ड राख्नुहोस्
निरन्तर फ्रिज/थाउ चक्र र एलीकोटको बारम्बार प्रयोगले PCR अभिकर्मक, इन्जाइमहरू र DNTP लाई पुन: स्थापना मार्फत क्षति पुर्याउन सक्छ।
विश्लेषण गर्नको लागि नमूनाहरू तयार गर्दा प्रयोग गरिएको एलिकोटको दरलाई सधैं अनुगमन गर्ने प्रयास गर्नुहोस्।
अधिमान्य LIMS सूची र अभिकर्मक र नमूनाहरू जमेको वा पग्लिएको मात्रा नियन्त्रण गर्न अधिक उपयुक्त छ।
उत्तम एनीलिंग तापमान छान्नुहोस्।
गलत एनिलिङ तापक्रम छान्नु र प्रयोग गर्नु अर्को तरिका हो PCR परिणामहरूमा त्रुटि हुन्छ।
कहिलेकाहीँ, प्रतिक्रिया योजना अनुसार जाँदैन।यो एक सफल प्रतिक्रिया को सुविधा को लागी annealing तापमान कम गर्न को लागी वांछित छ।
यद्यपि, तापक्रम घटाउँदा गलत सकारात्मक र प्राइमर डाइमरहरू देखा पर्ने सम्भावना बढ्छ।
PCR प्लेटहरू प्रयोग गर्दा पग्लने कर्भको विश्लेषण पुष्टि गर्न महत्त्वपूर्ण छ किनकि यो सही एनिलिङ तापक्रम चयन गर्ने राम्रो सूचक हो।
प्राइमर डिजाइन सफ्टवेयरले डिजाइन गर्न मद्दत गर्दछ, सही एनिलिङ तापक्रमको प्रावधानले सीधै PCR प्लेटहरूमा त्रुटि कम गर्दछ।
उच्च गुणस्तरको पीसीआर प्लेट चाहिन्छ?
यदि तपाईले भरपर्दो निर्माता कहाँ फेला पार्ने भनेर विचार गरिरहनुभएको छपीसीआर प्लेटहरू।थप खोजी नगर्नुहोस् किनभने तपाईं सही ठाउँमा हुनुहुन्छ।
दयालुहामीलाई सम्पर्क गर्न यहाँ क्लिक गर्नुहोस्उच्च गुणस्तरका उत्पादनहरू र सेवाहरूको लागि मूल्यमा जसले बैंकलाई तोड्दैन।
पोस्ट समय: अक्टोबर-30-2021