5 jednostavnih savjeta za sprječavanje pogrešaka pri radu s PCR pločama

Lančane reakcije polimerazom (PCR) jedna su od široko poznatih metoda koja se koristi u laboratorijima za znanost o životu.

PCR ploče proizvedene su od prvoklasne plastike za izvrsnu obradu i analizu uzoraka ili prikupljenih rezultata.

Imaju tanke i homogene stijenke za precizan toplinski prijenos.

U pripremi za primjenu u stvarnom vremenu, sitni dijelovi DNK ili RNK izdvajaju se i pohranjuju u PCR ploče.

PCR ploče su vrlo učinkovite u toplinskom zatvaranju i također ograničavaju protok topline.

Međutim, koliko god PCR ploče bile učinkovite i pouzdane, pogreške i netočnosti lako se uklanjaju tijekom obrade uzoraka.

Stoga, ako ste zainteresirani za dobivanje dobre i visoke kvalitetePCR ploče.Idealno je kontaktirati pouzdanog proizvođača PCR ploča.Uz to ste sigurni da ćete dobiti najbolju ponudu.

Evo nekih mjera opreza koje treba slijediti kako biste izbjegli kontaminaciju reagensa ili uzoraka i spriječili da se netočnosti uvuku u rezultate.

Sterilizacija okoline
Netočni pozitivni ili negativni rezultati nastaju zbog prisutnosti nečistoća, zbog čega sumnjate u rezultate.

Nečistoće i kontaminanti pojavljuju se u različitim oblicima kao što su nepovezani DNA ili kemijski dodaci koji na kraju smanjuju učinkovitost i djelotvornost reakcije.

Postoje brojni načini za značajno smanjenje stope kontaminacije PCR ploče.

Korištenje steriliziranih vrhova filtera još je jedan koristan način za sprječavanje ulaska nečistoća u vaše uzorke kroz pipete.

Posvetite potpuno čist komplet opreme, koji se sastoji od pipeta i nosača, isključivo za korištenje PCR-a.To će jamčiti zanemariv prijenos nečistoća ili kontaminanata po laboratoriju.

Upotrijebite izbjeljivače, etanol na pipetama, policama i stolovima za brisanje onečišćenja.

Dodijelite rezervirani prostor za sve vaše PCR reakcije kako biste dodatno smanjili kontaminaciju česticama.

Koristite čiste rukavice na svakom koraku i često ih mijenjajte.

PCR ploče
Provjerite koncentraciju i čistoću predloška.
Potrebno je održavati čistoću stola i opreme koja se koristi pri analizi uzoraka s PCR-om.Bitno je potvrditi stupanj čistoće uzoraka prije analize i obrade.

Općenito, analizatori uzimaju u obzir koncentraciju i razinu čistoće DNK uzoraka.

Nastojte da omjer apsorbancije za 260nm/280nm ne smije biti manji od 1,8.Dok se naknadne valne duljine između 230 nm i 320 nm koriste za identifikaciju nečistoća.

Na primjer, kaotropne soli i drugi organski spojevi detektiraju se pri brzini apsorbancije od 230 nm.Dok se zamućenost u uzorcima DNK također otkriva i provjerava pri stopi apsorbancije od 320 nm.

Izbjegavajte pretrpavanje PCR ploča proizvodom
Koliko god je poželjno koristiti više proizvoda istovremeno, to rezultira unakrsnom kontaminacijom PCR ploča.

Preopterećenje PCR ploča s različitim proizvodima otpada i izuzetno otežava utvrđivanje uzoraka.

Vodite evidenciju o alikvotnim PCR reagensima
Kontinuirani ciklusi zamrzavanja/odmrzavanja i česta uporaba alikvota mogu oštetiti PCR reagense, enzime i DNTP rekristalizacijom.

Uvijek nastojte pratiti količinu alikvota koji se koristi tijekom pripreme uzoraka za analizu.

Poželjni LIMS je prikladniji za kontrolu inventara i količine zamrznutih ili odmrznutih reagensa i uzoraka.

Odaberite najbolju temperaturu žarenja.
Odabir i korištenje krive temperature žarenja još je jedna metoda koja sadrži pogrešku u rezultatima PCR-a.

Ponekad reakcija ne ide prema planu.Poželjno je smanjiti temperaturu žarenja kako bi se omogućila uspješna reakcija.

Međutim, snižavanje temperature povećava šanse za lažno pozitivne rezultate i pojavu dimera primera.

Važno je potvrditi analizu krivulje taljenja pri korištenju PCR ploča jer je to dobar pokazatelj odabira točne temperature žarenja.

Softver za dizajn temeljnog premaza pomaže pri projektiranju, pružanje odgovarajuće temperature žarenja s izravnim smanjenjem pogreške u PCR pločama.

Trebate visokokvalitetnu PCR ploču?
U slučaju da ste razmišljali gdje pronaći pouzdanog proizvođačaPCR ploče.Ne tražite više jer ste na pravom mjestu.

Ljubaznokliknite ovdje da nas kontaktirateza proizvode i usluge visoke kvalitete po cijeni koja neće slomiti banku.


Vrijeme objave: 30. listopada 2021