5 jednoduchých tipov, ako predísť chybám pri práci s PCR platňami

Polymerázové reťazové reakcie (PCR) sú jednou zo široko známych metód používaných v laboratóriách biologických vied.

PCR platne sú vyrobené z prvotriednych plastov pre vynikajúce spracovanie a analýzu vzoriek alebo zozbieraných výsledkov.

Majú tenké a homogénne steny na zabezpečenie presného prenosu tepla.

Pri príprave na aplikácie v reálnom čase sú malé časti DNA alebo RNA oddelené a uložené na platniach PCR.

Doštičky PCR sú vysoko účinné pri tepelnom tesnení a obmedzujú aj tok tepla.

Napriek tomu, že sú doštičky PCR účinné a spoľahlivé, chyby a nepresnosti sa pri spracovaní vzoriek ľahko vylučujú.

Preto, ak máte záujem získať dobrú a vysokú kvalituPCR platne.Ideálne je kontaktovať spoľahlivého výrobcu PCR platní.Vďaka tomu máte istotu, že dostanete najlepšiu ponuku.

Tu je niekoľko preventívnych opatrení, ktoré je potrebné dodržiavať, aby ste predišli kontaminácii činidiel alebo vzoriek a zabránili vniknutiu nepresností do výsledkov.

Sterilizácia okolia
Nesprávne pozitíva alebo negatíva sa vyskytujú v dôsledku prítomnosti nečistôt, čo vedie k pochybnostiam o výsledkoch.

Nečistoty a kontaminanty sa vyskytujú v rôznych formách, ako je nepríbuzná DNA alebo chemické prísady, ktoré nakoniec znižujú účinnosť a účinnosť reakcie.

Existuje mnoho spôsobov, ako výrazne znížiť mieru kontaminácie PCR platne.

Použitie sterilizovaných filtračných špičiek je ďalším užitočným spôsobom, ako zabrániť vniknutiu nečistôt do vzoriek cez pipety.

Venujte úplne čistú sadu zariadení pozostávajúcu z pipiet a stojanov výlučne na použitie PCR.To zaručí zanedbateľný prenos nečistôt alebo kontaminantov po laboratóriu.

Na utretie kontaminantov použite bielidlá, etanol na pipetách, stojanoch a laviciach.

Prideľte vyhradený priestor pre všetky vaše reakcie PCR, aby ste ešte viac minimalizovali kontamináciu časticami.

Pri každom kroku používajte čisté rukavice a často ich vymieňajte.

PCR platne
Skontrolujte koncentráciu a čistotu šablóny.
Čistota stola a zariadenia používaného pri analýze vzoriek pomocou PCR by sa mala udržiavať.Pred analýzou a spracovaním je nevyhnutné overiť stupeň čistoty vzoriek.

Vo všeobecnosti analyzátory berú do úvahy koncentráciu a úroveň čistoty vzoriek DNA.

Usilujte sa, aby pomer absorbancie pre 260nm/280nm nebol menší ako 1,8.Zatiaľ čo následné vlnové dĺžky medzi 230 nm a 320 nm sa používajú na identifikáciu nečistôt.

V jednom prípade sa chaotropné soli a iné organické zlúčeniny detegujú pri rýchlosti absorbancie 230 nm.Zatiaľ čo turbidita vo vzorkách DNA sa tiež deteguje a overuje pri rýchlosti absorbancie 320 nm.

Zabráňte preťaženiu doštičiek PCR produktom
Nakoľko je potrebné spustiť viacero produktov súčasne, vedie to ku krížovej kontaminácii doštičiek PCR.

Preťaženie doštičiek PCR rôznymi produktmi plytvá a mimoriadne sťažuje zistenie vzoriek.

Uchovávajte záznamy alikvotných reagencií PCR
Nepretržité cykly zmrazovania/rozmrazovania a časté používanie alikvotnej časti môže rekryštalizáciou poškodiť reagencie PCR, enzýmy a DNTP.

Pri príprave vzoriek na analýzu sa vždy snažte monitorovať množstvo použitého alikvotu.

Výhodný LIMS je vhodnejší na kontrolu zásob a množstva činidiel a vzoriek zmrazených alebo rozmrazených.

Vyberte si najlepšiu teplotu žíhania.
Výber a použitie nesprávnej teploty žíhania je ďalšou metódou, pri ktorej výsledky PCR obsahujú chybu.

Niekedy reakcia neprebehne podľa plánu.Je žiaduce znížiť teplotu žíhania, aby sa uľahčila úspešná reakcia.

Zníženie teploty však zvyšuje šance na falošné pozitíva a výskyt dimérov primérov.

Pri použití PCR platní je dôležité potvrdiť analýzu krivky topenia, pretože je to dobrý indikátor výberu správnej teploty žíhania.

Softvér na návrh priméru pomáha pri navrhovaní, zabezpečení správnej teploty žíhania s priamou redukciou chýb v PCR platniach.

Potrebujete vysokokvalitnú PCR platňu?
V prípade, že ste zvažovali, kde nájsť spoľahlivého výrobcuPCR platne.Už nehľadajte, pretože ste na správnom mieste.

láskavokliknite sem a kontaktujte násza vysoko kvalitné produkty a služby za cenu, ktorá vás nezruinuje.


Čas odoslania: 30. októbra 2021