5 consells senzills per evitar errors en treballar amb plaques de PCR

Les reaccions en cadena de la polimerasa (PCR) són un dels mètodes més coneguts que s'utilitzen als laboratoris de ciències de la vida.

Les plaques de PCR es produeixen a partir de plàstics de primera classe per a un excel·lent processament i anàlisi de mostres o resultats recollits.

Tenen parets primes i homogènies per proporcionar una transferència tèrmica precisa.

En preparació per a aplicacions en temps real, s'aïllen una secció minúscula d'ADN o ARN i s'emmagatzemen en plaques de PCR.

Les plaques de PCR són altament eficients en el segellat tèrmic i també restringeixen el flux de calor.

No obstant això, per eficaç i fiable que són les plaques de PCR, els errors i les imprecisions s'estan fàcilment mentre es processen les mostres.

Per tant, si esteu interessats en obtenir un bon i d'alta qualitatPlaques de PCR.És ideal contactar amb un fabricant fiable de plaques PCR.Amb això estàs segur d'aconseguir la millor oferta.

A continuació s'indiquen algunes precaucions a seguir per evitar contaminacions de reactius o mostres i evitar que s'introdueixin imprecisions als resultats.

Esterilització de l'entorn
Es produeixen positius o negatius incorrectes per la presència d'impureses, la qual cosa fa dubtar dels resultats.

Les impureses i els contaminants es presenten en diverses formes, com ara ADN no relacionat o additius químics que eventualment disminueixen l'eficiència i l'eficàcia de la reacció.

Hi ha moltes maneres de reduir considerablement la taxa de contaminació de la placa de PCR.

L'ús de puntes de filtre esterilitzades és una altra manera útil d'evitar que les impureses s'introdueixin a les mostres a través de les pipetes.

Dedicar un conjunt d'equips completament net, format per pipetes i bastidors, exclusivament per a l'ús de PCR.Això garantirà una transferència insignificant d'impureses o contaminants al voltant del laboratori.

Utilitzeu lleixius, etanol a les pipetes, bastidors i bancs per netejar els contaminants.

Assigna un espai reservat per a totes les teves reaccions de PCR per minimitzar encara més la contaminació per partícules.

Utilitzeu guants nets a cada pas i substituïu-los amb freqüència.

Plaques de PCR
Inspeccioneu la concentració i la puresa de la plantilla.
S'ha de mantenir la neteja del banc i de l'equip utilitzat en l'anàlisi de mostres amb la PCR.És fonamental validar el grau de puresa de les mostres abans de l'anàlisi i processament.

En general, els analitzadors tenen en compte la concentració i el nivell de puresa de les mostres d'ADN.

Procureu que la relació d'absorbància per a 260 nm/280 nm no sigui inferior a 1,8.Mentre que les longituds d'ona posteriors entre 230 nm i 320 nm s'utilitzen per identificar impureses.

En un cas, es detecten sals caotròpiques i altres compostos orgànics a una taxa d'absorbància de 230 nm.Mentre que la terbolesa en mostres d'ADN també es detecta i es verifica a una taxa d'absorbància de 320 nm.

Eviteu sobrecarregar les plaques de PCR amb el producte
Per molt que es vulgui executar diversos productes simultàniament, provoca una contaminació creuada de les plaques de PCR.

La sobrecàrrega de les plaques de PCR amb residus de diferents productes i fa que sigui extremadament difícil determinar les mostres.

Mantenir registres dels reactius de PCR al·lícuotes
Els cicles continus de congelació/descongelació i l'ús freqüent d'aliquotes poden danyar els reactius de PCR, els enzims i els DNTP mitjançant la recristal·lització.

Intenteu controlar sempre la taxa d'aliquota utilitzada mentre prepareu les mostres per analitzar.

El LIMS preferible és més adequat per controlar l'inventari i la quantitat de reactius i mostres congelats o descongelats.

Trieu la millor temperatura de recuit.
Escollir i utilitzar la temperatura de recuit incorrecta és un altre mètode que els resultats de la PCR contenen errors.

De vegades, la reacció no surt com estava previst.Es desitja reduir la temperatura de recuit per tal de facilitar una reacció reeixida.

Tanmateix, baixar la temperatura augmenta les possibilitats de falsos positius i l'aparició de dímers d'imprimació.

És important confirmar l'anàlisi de la corba de fusió quan s'utilitzen les plaques de PCR, ja que és un bon indicador per seleccionar la temperatura de recuit correcta.

El programari de disseny d'imprimació ajuda a dissenyar, proporcionar una temperatura de recuit adequada amb redueix directament l'error a les plaques de PCR.

Necessites una placa PCR d'alta qualitat?
En cas que hagi estat considerant on trobar un fabricant fiable dePlaques de PCR.No cerquis més perquè ets al lloc correcte.

Amablementfeu clic aquí per contactar amb nosaltresper a productes i serveis d'alta qualitat a un preu que no trencarà el banc.


Hora de publicació: 30-octubre-2021