5 เคล็ดลับง่ายๆ ในการป้องกันข้อผิดพลาดเมื่อทำงานกับเพลต PCR

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) เป็นหนึ่งในวิธีที่รู้จักกันอย่างแพร่หลายที่ใช้ในห้องปฏิบัติการวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต

เพลต PCR ผลิตจากพลาสติกชั้นหนึ่งเพื่อการประมวลผลและการวิเคราะห์ตัวอย่างหรือผลลัพธ์ที่รวบรวมได้อย่างดีเยี่ยม

มีผนังบางและเป็นเนื้อเดียวกันเพื่อให้ถ่ายเทความร้อนได้อย่างแม่นยำ

เพื่อเตรียมพร้อมสำหรับการใช้งานแบบเรียลไทม์ ส่วนขนาดเล็กของ DNA หรือ RNA จะถูกแยกออกและจัดเก็บไว้ในเพลต PCR

แผ่น PCR มีประสิทธิภาพสูงในการปิดผนึกความร้อนและจำกัดการไหลของความร้อนเช่นกัน

อย่างไรก็ตาม เนื่องจากเพลต PCR มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้ ข้อผิดพลาดและความไม่ถูกต้องจึงเกิดขึ้นได้ง่ายขณะประมวลผลตัวอย่าง

ดังนั้นหากคุณสนใจอยากได้ของดีและมีคุณภาพสูงแผ่นพีซีอาร์เหมาะอย่างยิ่งที่จะติดต่อผู้ผลิตเพลต PCR ที่เชื่อถือได้ด้วยเหตุนี้คุณจึงมั่นใจได้ว่าจะได้รับข้อเสนอที่ดีที่สุด

ต่อไปนี้เป็นข้อควรระวังที่ควรปฏิบัติตามเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของรีเอเจนต์หรือตัวอย่าง และป้องกันไม่ให้ความไม่ถูกต้องคืบคลานเข้าไปในผลลัพธ์

การฆ่าเชื้อบริเวณโดยรอบ
ผลบวกหรือผลลบที่ไม่ถูกต้องเกิดขึ้นเนื่องจากการมีสิ่งเจือปนซึ่งทำให้คุณสงสัยในผลลัพธ์

สิ่งเจือปนและสิ่งปนเปื้อนเกิดขึ้นในรูปแบบต่างๆ เช่น DNA หรือสารเคมีที่ไม่เกี่ยวข้อง ซึ่งท้ายที่สุดจะลดประสิทธิภาพและประสิทธิผลของปฏิกิริยา

มีหลายวิธีในการลดอัตราการปนเปื้อนของเพลต PCR ได้อย่างมาก

การใช้ทิปตัวกรองที่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นอีกวิธีที่มีประโยชน์ในการป้องกันไม่ให้สิ่งเจือปนเล็ดลอดเข้าไปในตัวอย่างของคุณผ่านทางปิเปต

ทุ่มเทชุดอุปกรณ์ที่สะอาดหมดจด ซึ่งประกอบด้วยปิเปตและชั้นวาง สำหรับการใช้ PCR โดยเฉพาะสิ่งนี้จะรับประกันการถ่ายเทสิ่งเจือปนหรือสารปนเปื้อนรอบๆ ห้องปฏิบัติการได้เล็กน้อย

ใช้สารฟอกขาว เอทานอลบนปิเปต ชั้นวาง และม้านั่งเพื่อเช็ดสิ่งปนเปื้อน

จัดสรรพื้นที่ที่สงวนไว้สำหรับปฏิกิริยา PCR ทั้งหมดของคุณเพื่อลดการปนเปื้อนของอนุภาคให้เหลือน้อยที่สุด

ใช้ถุงมือที่สะอาดทุกขั้นตอนและเปลี่ยนบ่อยๆ

แผ่นพีซีอาร์
ตรวจสอบความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของเทมเพลต
ควรรักษาความสะอาดของม้านั่งและอุปกรณ์ที่ใช้ในการวิเคราะห์ตัวอย่างด้วย PCRการตรวจสอบความถูกต้องของระดับความบริสุทธิ์ของตัวอย่างก่อนการวิเคราะห์และการประมวลผลถือเป็นสิ่งสำคัญ

โดยทั่วไป เครื่องวิเคราะห์จะพิจารณาถึงระดับความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของตัวอย่าง DNA

พยายามอัตราส่วนการดูดกลืนแสงสำหรับ 260nm/280nm จะต้องไม่น้อยกว่า 1.8ในขณะที่ความยาวคลื่นต่อมาระหว่าง 230 นาโนเมตรถึง 320 นาโนเมตรจะถูกนำมาใช้เพื่อระบุสิ่งเจือปน

ตัวอย่างเช่น เกลือคาโอโทรปิกและสารประกอบอินทรีย์อื่นๆ จะถูกตรวจพบที่อัตราการดูดกลืนแสง 230 นาโนเมตรในขณะที่ความขุ่นในตัวอย่าง DNA ก็จะถูกตรวจจับและตรวจสอบด้วยอัตราการดูดกลืนแสงที่ 320 นาโนเมตร

หลีกเลี่ยงการใส่เพลต PCR มากเกินไปกับผลิตภัณฑ์
แม้ว่าจะต้องการใช้งานผลิตภัณฑ์หลายรายการพร้อมกัน ก็ส่งผลให้เกิดการปนเปื้อนข้ามเพลต PCR ได้

การบรรทุกเพลต PCR มากเกินไปโดยมีของเสียจากผลิตภัณฑ์ต่างๆ และทำให้การตรวจสอบตัวอย่างเป็นเรื่องยากมาก

เก็บบันทึกของรีเอเจนต์ Aliquot PCR
รอบการแช่แข็ง/ละลายอย่างต่อเนื่องและการใช้ส่วนลงตัวบ่อยครั้งอาจทำให้รีเอเจนต์ PCR เอนไซม์ และ DNTP เสียหายผ่านการตกผลึกซ้ำ

พยายามติดตามอัตราส่วนลงตัวที่ใช้ในขณะเตรียมตัวอย่างที่จะวิเคราะห์เสมอ

LIMS ที่ต้องการนั้นเหมาะสมกว่าในการควบคุมสินค้าคงคลังและปริมาณของรีเอเจนต์และตัวอย่างที่แช่แข็งหรือละลาย

เลือกอุณหภูมิการหลอมที่ดีที่สุด
การเลือกและใช้อุณหภูมิการหลอมที่ไม่ถูกต้องเป็นอีกวิธีหนึ่งที่ผลลัพธ์ PCR มีข้อผิดพลาด

บางครั้งปฏิกิริยาก็ไม่เป็นไปตามแผนที่วางไว้ต้องการลดอุณหภูมิการหลอมเพื่อให้เกิดปฏิกิริยาได้สำเร็จ

อย่างไรก็ตาม การลดอุณหภูมิลงจะเพิ่มโอกาสในการเกิดผลบวกลวงและการเกิดไดเมอร์ของไพรเมอร์

การยืนยันการวิเคราะห์กราฟการหลอมเหลวเมื่อใช้เพลต PCR ถือเป็นสิ่งสำคัญ เนื่องจากเป็นตัวบ่งชี้ที่ดีในการเลือกอุณหภูมิการหลอมที่ถูกต้อง

ซอฟต์แวร์การออกแบบสีรองพื้นช่วยในการออกแบบ จัดเตรียมอุณหภูมิการอบอ่อนที่เหมาะสม โดยช่วยลดข้อผิดพลาดในเพลต PCR ได้โดยตรง

ต้องการเพลต PCR คุณภาพสูงใช่ไหม
ในกรณีที่คุณกำลังพิจารณาว่าจะหาผู้ผลิตที่เชื่อถือได้จากที่ไหนแผ่นพีซีอาร์.ไม่ต้องค้นหาอีกต่อไปเพราะคุณมาถูกที่แล้ว

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อติดต่อเราเพื่อสินค้าและบริการคุณภาพสูงในราคาที่ไม่ทำลายธนาคาร


เวลาโพสต์: Oct-30-2021