5 jednoduchých tipů, jak předejít chybám při práci s PCR destičkami

Polymerázové řetězové reakce (PCR) jsou jednou z široce známých metod používaných v laboratořích biologických věd.

PCR destičky jsou vyrobeny z prvotřídních plastů pro vynikající zpracování a analýzu vzorků nebo odebraných výsledků.

Mají tenké a homogenní stěny, které zajišťují přesný přenos tepla.

V rámci přípravy na aplikace v reálném čase jsou nepatrné části DNA nebo RNA odděleny a uloženy v PCR destičkách.

PCR destičky jsou vysoce účinné při tepelném utěsnění a také omezují tok tepla.

Jakkoli jsou však PCR destičky účinné a spolehlivé, chyby a nepřesnosti při zpracování vzorků snadno uniknou.

Proto, pokud máte zájem o získání dobré a vysoké kvalityPCR destičky.Ideální je kontaktovat spolehlivého výrobce PCR destiček.Díky tomu máte jistotu, že dostanete tu nejlepší nabídku.

Zde jsou některá opatření, která je třeba dodržet, abyste zabránili kontaminaci činidel nebo vzorků a zabránili vniknutí nepřesností do výsledků.

Sterilizace okolí
Nesprávná pozitiva nebo negativa se vyskytují kvůli přítomnosti nečistot, což vede k pochybnostem o výsledcích.

Nečistoty a kontaminanty se vyskytují v různých formách, jako je nepříbuzná DNA nebo chemické přísady, které nakonec snižují účinnost a účinnost reakce.

Existuje mnoho způsobů, jak výrazně snížit míru kontaminace PCR destičky.

Použití sterilizovaných filtračních špiček je dalším užitečným způsobem, jak zabránit vnikání nečistot do vzorků přes pipety.

Věnujte zcela čistou sadu vybavení, skládající se z pipet a stojanů, výhradně pro použití PCR.To zaručí zanedbatelný přenos nečistot nebo kontaminantů po laboratoři.

Používejte bělidla, etanol na pipetách, stojanech a stolech k setření nečistot.

Přidělte vyhrazený prostor pro všechny vaše reakce PCR, abyste dále minimalizovali kontaminaci částicemi.

Při každém kroku používejte čisté rukavice a často je vyměňujte.

PCR destičky
Zkontrolujte koncentraci a čistotu šablony.
Při analýze vzorků pomocí PCR by měla být zachována čistota lavice a zařízení.Před analýzou a zpracováním je nezbytné ověřit stupeň čistoty vzorků.

Analyzátory obecně berou v úvahu koncentraci a úroveň čistoty vzorků DNA.

Snažte se, aby poměr absorbance pro 260nm/280nm nebyl menší než 1,8.Zatímco následné vlnové délky mezi 230nm a 320nm se používají k identifikaci nečistot.

V jednom případě jsou chaotropní soli a další organické sloučeniny detekovány rychlostí absorbance 230 nm.Zatímco zákal ve vzorcích DNA je také detekován a ověřen při rychlosti absorbance 320 nm.

Vyhněte se přetížení PCR destiček produktem
Jakkoli je žádoucí zpracovávat více produktů současně, vede to ke křížové kontaminaci PCR destiček.

Přetížení PCR destiček různými produkty vede k plýtvání a extrémně ztěžuje zjištění vzorků.

Uchovávejte záznamy o alikvotních PCR reagenciích
Nepřetržité cykly zmrazování/rozmrazování a časté používání alikvotu může rekrystalizací poškodit reagencie PCR, enzymy a DNTP.

Vždy se snažte sledovat množství použitého alikvotu při přípravě vzorků k analýze.

Výhodnější LIMS je vhodnější pro kontrolu zásob a množství reagencií a vzorků zmražených nebo rozmražených.

Vyberte si nejlepší teplotu žíhání.
Výběr a použití nesprávné teploty žíhání je další metodou, ve které výsledky PCR obsahují chybu.

Někdy reakce neproběhne podle plánu.Je žádoucí snížit teplotu žíhání, aby se usnadnila úspěšná reakce.

Snížení teploty však zvyšuje pravděpodobnost falešně pozitivních výsledků a výskytu dimerů primerů.

Při použití PCR destiček je důležité potvrdit analýzu křivky tání, protože je to dobrý indikátor pro výběr správné teploty žíhání.

Software pro návrh primeru pomáhá při navrhování, zajištění správné teploty žíhání s přímou redukcí chyb v PCR destičkách.

Potřebujete vysoce kvalitní PCR destičku?
V případě, že jste přemýšleli, kde najít spolehlivého výrobcePCR destičky.Už nehledejte, protože jste na správném místě.

Laskavěklikněte zde a kontaktujte násza vysoce kvalitní produkty a služby za cenu, která vás nezruinuje.


Čas odeslání: 30. října 2021