5 едноставни совети за спречување на грешки при работа со PCR плочи

Полимеразните верижни реакции (PCR) се еден од широко познатите методи кои се користат во лабораториите за наука за животот.

ПЦР плочите се произведени од првокласна пластика за одлична обработка и анализа на примероците или собраните резултати.

Тие имаат тенки и хомогени ѕидови за да обезбедат прецизен термички пренос.

Во подготовка за апликации во реално време, минутен дел од ДНК или РНК се изолирани и складирани во ПЦР плочи.

ПЦР плочите се многу ефикасни во топлинско запечатување и исто така го ограничуваат протокот на топлина.

Сепак, колку што се ефективни и доверливи ПЦР плочите, грешките и неточностите лесно се намалуваат додека се обработуваат примероците.

Затоа, ако сте заинтересирани да добиете добар и квалитетенПЦР плочи.Идеално е да контактирате со доверлив производител на PCR плоча.Со ова вие сте сигурни дека ќе ја добиете најдобрата зделка.

Еве неколку мерки на претпазливост што треба да ги следите за да избегнете контаминации на реагенси или примероци и да спречите неточности да навлезат во резултатите.

Стерилизирање на околината
Неточни позитивни или негативни страни се јавуваат поради присуството на нечистотии, што ве тера да се сомневате во резултатите.

Нечистотиите и загадувачите се јавуваат во различни форми како што се неповрзани ДНК или хемиски адитиви кои на крајот ја намалуваат ефикасноста и ефективноста на реакцијата.

Постојат бројни начини за значително намалување на стапката на контаминација на PCR плочата.

Користењето на стерилизирани врвови за филтер е уште еден корисен начин да спречите нечистотии да навлезат во вашите примероци преку пипетите.

Посветете комплетно чист сет на опрема, која се состои од пипети и лавици, исклучиво за употреба на PCR.Ова ќе гарантира занемарлив пренос на нечистотии или загадувачи околу лабораторијата.

Користете избелувачи, етанол на пипетите, решетките и клупите за да ги избришете загадувачите.

Доделете резервиран простор за сите ваши PCR реакции за дополнително да ја минимизирате контаминацијата со честички.

Користете чисти ракавици на секој чекор и често менувајте ги.

ПЦР плочи
Проверете ја концентрацијата и чистотата на шаблонот.
Треба да се одржува чистотата на клупата и опремата што се користи при анализа на примероците со PCR.Од суштинско значење е да се потврди степенот на чистота на примероците пред анализа и обработка.

Општо земено, анализаторите ја земаат предвид концентрацијата и нивото на чистота на примероците на ДНК.

Настојувајте, односот на апсорпција за 260 nm/280 nm не смее да биде помал од 1,8.Додека последователните бранови должини помеѓу 230nm и 320nm се користат за да се идентификуваат нечистотиите.

На пример, хаотропните соли и други органски соединенија се откриени со стапка на апсорпција од 230 nm.Додека заматеноста во примероците на ДНК се исто така откриени и потврдени со стапка на апсорпција од 320 nm.

Избегнувајте преоптоварување на PCR плочите со производот
Колку и да се сака да се извршуваат повеќе производи истовремено, тоа резултира со вкрстена контаминација на PCR плочите.

Преоптоварувањето на PCR плочите со отпад од различни производи и го отежнува утврдувањето на примероците.

Водете евиденција за Aliquot PCR реагенси
Континуираните циклуси на замрзнување/одмрзнување и честа употреба на одреден дел може да ги оштетат PCR реагенсите, ензимите и DNTP-овите преку рекристализација.

Секогаш настојувајте да ја следите стапката на аликвоти што се користи додека подготвувате примероци за анализа.

Претпочитаниот LIMS е посоодветен за контрола на залихите и количеството на замрзнати или одмрзнати реагенси и примероци.

Изберете ја најдобрата температура на жарење.
Изборот и користењето на погрешна температура на жарење е уште еден метод, резултатите од PCR содржат грешка.

Понекогаш, реакцијата не оди според планираното.Пожелно е да се намали температурата на жарење за да се олесни успешната реакција.

Сепак, намалувањето на температурата ги зголемува шансите за појава на лажни позитиви и димери на прајмер.

Значајно е да се потврди анализата на кривата на топење кога се користат PCR плочите бидејќи тоа е добар показател за избор на правилна температура на жарење.

Софтверот за дизајн на прајмер помага при дизајнирање, обезбедување на вистинска температура на жарење со директно намалување на грешката во ПЦР плочите.

Дали ви треба висококвалитетна ПЦР плоча?
Во случај да размислувате каде да најдете сигурен производител наПЦР плочи.Не барајте повеќе бидејќи сте на вистинското место.

Љубезнокликнете овде за да не контактиратеза висококвалитетни производи и услуги по цена што нема да ја наруши банката.


Време на објавување: 30-10-2021 година