پوليميرس زنجير رد عمل (PCR) زندگي جي سائنس جي ليبارٽريز ۾ استعمال ٿيندڙ وسيع طريقن مان هڪ آهي.
پي سي آر پليٽون فرسٽ ڪلاس پلاسٽڪ مان تيار ڪيون وينديون آهن بهترين پروسيسنگ ۽ تجزيو لاءِ نمونن يا نتيجن جي گڏ ڪيل.
انهن وٽ ٿلهي ۽ هڪجهڙائي واريون ڀتيون آهن جيڪي صحيح حرارتي منتقلي مهيا ڪن ٿيون.
حقيقي وقت جي ايپليڪيشنن جي تياري ۾، ڊي اين اي يا آر اين اي جي منٽ سيڪشن کي PCR پليٽن ۾ الڳ ۽ محفوظ ڪيو ويو آهي.
پي سي آر پليٽ گرميءَ جي سگهه ۾ انتهائي ڪارآمد آهن ۽ گرميءَ جي وهڪري کي به محدود ڪن ٿيون.
بهرحال، جيئن ته پي سي آر پليٽون موثر ۽ قابل اعتماد آهن، نموني جي پروسيسنگ دوران غلطيون ۽ غلطيون آسانيءَ سان ختم ٿي وينديون آهن.
تنهن ڪري، جيڪڏهن توهان هڪ سٺو ۽ اعلي معيار حاصل ڪرڻ ۾ دلچسپي وٺندا آهيوPCR پليٽ.اهو هڪ قابل اعتماد PCR پليٽ ڪاريگر سان رابطو ڪرڻ لاء مثالي آهي.انهي سان توهان کي يقين آهي ته توهان بهترين ڊيل حاصل ڪري سگهو ٿا.
هتي ڪجهه احتياطي تدبيرون آهن جن تي عمل ڪيو وڃي ته جيئن ريجنٽ يا نمونن جي آلودگي کان بچڻ لاءِ ۽ غلطين کي نتيجن ۾ داخل ٿيڻ کان روڪيو وڃي.
ماحول کي جراثيم ڪرڻ
ناپاڪيءَ جي موجودگيءَ جي ڪري غلط مثبت يا ناڪاري واقعا ٿين ٿا، جيڪي توهان کي نتيجن تي شڪ ڪن ٿا.
نجاست ۽ آلودگي مختلف شڪلن ۾ ٿينديون آهن جهڙوڪ غير لاڳاپيل ڊي اين اي يا ڪيميائي اضافو جيڪي آخرڪار رد عمل جي ڪارڪردگي ۽ اثرائتي کي گهٽائي ڇڏيندا آهن.
PCR پليٽ جي آلودگي جي شرح کي گھٽائڻ لاء ڪيترائي طريقا آھن.
جراثيم واري فلٽر جي صلاحن کي استعمال ڪرڻ هڪ ٻيو مفيد طريقو آهي جيڪو پائپن ذريعي توهان جي نموني ۾ داخل ٿيڻ کان نجاست کي روڪڻ لاء.
خاص طور تي پي سي آر جي استعمال لاءِ سامان جو مڪمل طور تي صاف سيٽ، پائپٽس ۽ ريڪ تي مشتمل.هي ليبارٽري جي چوڌاري نجاست يا آلودگي جي غير معمولي منتقلي جي ضمانت ڏيندو.
آلودگي کي ختم ڪرڻ لاءِ بليچز، پائپن تي ايٿانول، ريڪ ۽ بينچ استعمال ڪريو.
ذرات جي آلودگي کي وڌيڪ گھٽائڻ لاءِ پنھنجي PCR جي سڀني رد عملن لاءِ مخصوص جاءِ مختص ڪريو.
هر قدم تي صاف دستانو استعمال ڪريو ۽ انهن کي بار بار تبديل ڪريو.
PCR پليٽ
ٽيمپليٽ جي ڪنسنٽريشن ۽ پاڪائي جو معائنو ڪريو.
پي سي آر سان نمونن جو تجزيو ڪرڻ وقت استعمال ٿيل بينچ ۽ سامان جي صفائي کي برقرار رکڻ گهرجي.اهو ضروري آهي ته تجزيو ۽ پروسيسنگ کان اڳ نموني جي پاڪائي جي درجي کي درست ڪرڻ.
عام طور تي، تجزيه ڪندڙ ڊي اين اي نموني جي حراست ۽ پاڪائي جي سطح تي غور ڪن ٿا.
ڪوشش ڪريو 260nm/280nm لاءِ جذب جو تناسب 1.8 کان گهٽ نه هجڻ گهرجي.جڏهن ته 230nm ۽ 320nm جي وچ ۾ ايندڙ ويڪرائي ڦاڪ استعمال ڪيا ويندا آهن نجاست کي سڃاڻڻ لاءِ.
مثال طور، 230nm جاذب جي شرح تي چاوٽروپڪ لوڻ ۽ ٻيا نامياتي مرکبات معلوم ڪيا ويا آهن.جڏهن ته ڊي اين اي نموني ۾ turbidity پڻ 320nm جي جذب جي شرح تي ڳولي ۽ تصديق ڪئي وئي آهي.
پراڊڪٽ سان پي سي آر پليٽ کي اوور لوڊ ڪرڻ کان پاسو ڪريو
جيترو اهو هڪ ئي وقت ڪيترن ئي پروڊڪٽس کي هلائڻ جي خواهشمند آهي، ان جي نتيجي ۾ پي سي آر پليٽن جي ڪراس آلودگي جو نتيجو آهي.
پي سي آر پليٽن کي اوور لوڊ ڪرڻ سان مختلف پراڊڪٽس جي فضول خرچي ۽ نمونن کي معلوم ڪرڻ انتهائي مشڪل بڻائي ٿو.
Aliquot PCR Reagents جا رڪارڊ رکو
مسلسل فريز/ٿائو چڪر ۽ aliquot جو بار بار استعمال پي سي آر ريجنٽس، اينزائمز ۽ ڊي اين ٽي پيز کي ٻيهر ريسٽالائيزيشن ذريعي نقصان پهچائي سگھي ٿو.
هميشه ڪوشش ڪريو aliquot جي شرح کي مانيٽر ڪرڻ جي لاءِ استعمال ٿيل نمونن کي تيار ڪرڻ دوران.
ترجيحي LIMS وڌيڪ موزون آھي انوینٽري کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ ۽ ريجينٽس ۽ نمونن جي مقدار کي منجمد يا گلائي.
بهترين annealing گرمي پد چونڊيو.
غلط اينيلنگ گرمي پد کي کڻڻ ۽ استعمال ڪرڻ اڃا تائين هڪ ٻيو طريقو آهي PCR نتيجن ۾ غلطي.
ڪڏهن ڪڏهن، رد عمل جي منصوبابندي وانگر نه ٿو وڃي.اهو هڪ ڪامياب ردعمل کي آسان ڪرڻ لاء اينيلنگ جي درجه حرارت کي گهٽائڻ جي خواهش آهي.
بهرحال، گرمي پد کي گهٽائڻ سان غلط مثبت ۽ پرائمر ڊيمرز جي ظاهر ٿيڻ جا موقعا وڌائي ٿي.
اهو ضروري آهي ته پگھلڻ واري وکر جي تجزيي جي تصديق ڪرڻ لاءِ جڏهن PCR پليٽ استعمال ڪري رهيا آهيو ته اهو صحيح اينيلنگ جي درجه حرارت کي چونڊڻ جو هڪ سٺو اشارو آهي.
پرائمر ڊيزائن سافٽ ويئر ڊيزائننگ سان مدد ڪري ٿو، صحيح اينيلنگ جي درجه حرارت جي فراهمي سان سڌو سنئون پي سي آر پليٽن ۾ غلطي گھٽائي ٿي.
هڪ اعلي معيار جي PCR پليٽ جي ضرورت ۾؟
ان صورت ۾ توهان غور ڪيو ويو آهي ته ڪٿي ڳولڻ لاء هڪ قابل اعتماد ڪارخانوPCR پليٽ.وڌيڪ ڳولا نه ڪريو ڇو ته توهان صحيح جڳهه تي آهيو.
مهربانياسان سان رابطو ڪرڻ لاءِ هتي ڪلڪ ڪريواعلي معيار جي پروڊڪٽس ۽ خدمت لاء هڪ قيمت تي جيڪا بينڪ کي ٽوڙي نه سگهندي.
پوسٽ جو وقت: آڪٽوبر-30-2021