5 vienkārši padomi, kā novērst kļūdas, strādājot ar PCR plāksnēm

Polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) ir viena no plaši pazīstamajām metodēm, ko izmanto dzīvības zinātnes laboratorijās.

PCR plāksnes ir izgatavotas no pirmās klases plastmasas, lai nodrošinātu izcilu paraugu vai savākto rezultātu apstrādi un analīzi.

Tiem ir plānas un viendabīgas sienas, lai nodrošinātu precīzu siltuma pārnesi.

Gatavojoties lietošanai reāllaikā, neliela DNS vai RNS daļa tiek izolēta un uzglabāta PCR plāksnēs.

PCR plāksnes ir ļoti efektīvas karstuma blīvēšanā un ierobežo arī siltuma plūsmu.

Tomēr, cik efektīvas un uzticamas ir PCR plāksnes, paraugu apstrādes laikā kļūdas un neprecizitātes tiek viegli novērstas.

Tāpēc, ja jūs interesē iegūt labu un kvalitatīvuPCR plāksnes.Ideāli ir sazināties ar uzticamu PCR plākšņu ražotāju.Ar to jūs esat pārliecināts, ka iegūsit vislabāko piedāvājumu.

Šeit ir daži piesardzības pasākumi, kas jāievēro, lai izvairītos no reaģentu vai paraugu piesārņošanas un neprecizitātes iekļūšanas rezultātos.

Apkārtnes sterilizācija
Nepareizi pozitīvi vai negatīvi rezultāti rodas piemaisījumu klātbūtnes dēļ, kas liek šaubīties par rezultātiem.

Piemaisījumi un piesārņotāji rodas dažādās formās, piemēram, nesaistītā DNS vai ķīmiskās piedevās, kas galu galā samazina reakcijas efektivitāti un efektivitāti.

Ir daudzi veidi, kā ievērojami samazināt PCR plāksnes piesārņojuma ātrumu.

Sterilizētu filtru uzgaļu izmantošana ir vēl viens noderīgs veids, kā novērst piemaisījumu iekļūšanu jūsu paraugos caur pipetēm.

Piešķiriet pilnīgi tīru aprīkojuma komplektu, kas sastāv no pipetēm un statīviem, tikai PCR lietošanai.Tas garantēs nenozīmīgu piemaisījumu vai piesārņotāju pārvietošanos pa laboratoriju.

Izmantojiet balinātājus, etanolu uz pipetēm, statīviem un soliem, lai notīrītu piesārņotājus.

Piešķiriet rezervētu vietu visām PCR reakcijām, lai vēl vairāk samazinātu daļiņu piesārņojumu.

Lietojiet tīrus cimdus katrā solī un bieži nomainiet tos.

PCR plāksnes
Pārbaudiet veidnes koncentrāciju un tīrību.
Jāuztur stenda un aprīkojuma tīrība, ko izmanto, analizējot paraugus ar PCR.Pirms analīzes un apstrādes ir svarīgi apstiprināt paraugu tīrības pakāpi.

Parasti analizatori ņem vērā DNS paraugu koncentrāciju un tīrības līmeni.

Centieties, lai absorbcijas attiecība 260 nm/280 nm nedrīkst būt mazāka par 1,8.Lai gan piemaisījumu identificēšanai tiek izmantoti nākamie viļņa garumi no 230 nm līdz 320 nm.

Piemēram, haotropos sāļus un citus organiskos savienojumus nosaka ar absorbcijas ātrumu 230 nm.Kaut arī duļķainība DNS paraugos tiek atklāta un pārbaudīta arī ar absorbcijas ātrumu 320 nm.

Nepārslogojiet PCR plates ar produktu
Lai gan ir vēlams vienlaikus darbināt vairākus produktus, tas rada PCR plākšņu savstarpēju piesārņojumu.

Pārslogojot PCR plāksnes ar dažādiem produktiem, tiek izšķērdēti un ir ārkārtīgi grūti noteikt paraugus.

Veiciet PCR reaģentu alikvotu uzskaiti
Nepārtraukti sasaldēšanas/atkausēšanas cikli un bieža alikvotas daļas izmantošana var sabojāt PCR reaģentus, fermentus un DNTP pārkristalizācijas rezultātā.

Gatavojot analizējamos paraugus, vienmēr centieties uzraudzīt izmantotās alikvotas daļas ātrumu.

Vēlamais LIMS ir vairāk piemērots, lai kontrolētu inventāru un sasaldēto vai atkausēto reaģentu un paraugu daudzumu.

Izvēlieties labāko atkausēšanas temperatūru.
Nepareizas atkausēšanas temperatūras izvēle un izmantošana ir vēl viena metode, kurā PCR rezultāti satur kļūdu.

Dažreiz reakcija nenotiek, kā plānots.Vēlams samazināt atkausēšanas temperatūru, lai veicinātu veiksmīgu reakciju.

Tomēr temperatūras pazemināšana palielina viltus pozitīvu rezultātu un grunts dimeru parādīšanās iespējamību.

Lietojot PCR plāksnes, ir svarīgi apstiprināt kušanas līknes analīzi, jo tas ir labs rādītājs pareizas atkausēšanas temperatūras izvēlei.

Primer projektēšanas programmatūra palīdz projektēšanā, pareizas atkausēšanas temperatūras nodrošināšana ar tiešu kļūdu samazināšanu PCR plāksnēs.

Vai jums nepieciešama augstas kvalitātes PCR plāksne?
Gadījumā, ja esat apsvēris, kur atrast uzticamu ražotājuPCR plāksnes.Vairs nemeklējiet, jo atrodaties īstajā vietā.

laipninoklikšķiniet šeit, lai sazinātos ar mumsaugstas kvalitātes produktiem un pakalpojumiem par cenu, kas nepārkāps banku.


Izlikšanas laiks: 30. oktobris 2021