5 едноставни совети за спречување на грешки при работа со PCR плочи

Полимеразните верижни реакции (PCR) се еден од широко познатите методи што се користат во лабораториите за биолошки науки.

PCR плочите се произведени од првокласна пластика за одлична обработка и анализа на примероците или собраните резултати.

Тие имаат тенки и хомогени ѕидови за да обезбедат прецизен пренос на топлина.

Како подготовка за апликации во реално време, најмали делови од ДНК или РНК се одделуваат и складираат во PCR плочи.

PCR плочите се многу ефикасни во термичкото запечатување и исто така го ограничуваат протокот на топлина.

Сепак, колку и да се ефикасни и сигурни PCR плочите, грешките и неточностите лесно се јавуваат при обработката на примероците.

Затоа, ако сте заинтересирани да добиете добар и висок квалитетPCR плочи.Идеално е да контактирате со доверлив производител на PCR плочи. Со ова сте сигурни дека ќе ја добиете најдобрата понуда.

Еве неколку мерки на претпазливост што треба да се следат за да се избегне контаминација на реагенсите или примероците и да се спречи внесување неточности во резултатите.

Стерилизирање на околината
Неточни позитивни или негативни резултати се јавуваат поради присуството на нечистотии, што ве тера да се сомневате во резултатите.

Нечистотиите и загадувачите се јавуваат во различни форми, како што се неповрзана ДНК или хемиски адитиви, што на крајот ја намалува ефикасноста и ефективноста на реакцијата.

Постојат бројни начини за значително намалување на стапката на контаминација на PCR плочата.

Користењето стерилизирани врвови за филтрирање е уште еден корисен начин да се спречи навлегување на нечистотии во вашите примероци преку пипетите.

Наменете целосно чист сет опрема, составен од пипети и полици, исклучиво за употреба на PCR. Ова ќе гарантира занемарливо пренесување на нечистотии или загадувачи низ лабораторијата.

Користете белила, етанол на пипетите, полиците и клупите за да ги отстраните загадувачите.

Одвојте резервиран простор за сите ваши PCR реакции за дополнително да ја минимизирате контаминацијата со честички.

Носете чисти ракавици на секој чекор и менувајте ги често.

PCR плочи
Проверете ја концентрацијата и чистотата на шаблонот.
Треба да се одржува чистотата на работната маса и опремата што се користат при анализа на примероци со PCR. Од суштинско значење е да се потврди степенот на чистота на примероците пред анализата и обработката.

Општо земено, анализаторите ја земаат предвид концентрацијата и нивото на чистота на примероците од ДНК.

Потрудете се односот на апсорпција за 260nm/280nm да не биде помал од 1,8. Додека последователните бранови должини помеѓу 230nm и 320nm се користат за идентификација на нечистотии.

Во еден случај, хаотропните соли и други органски соединенија се детектираат со брзина на апсорпција од 230 nm. Додека заматеноста во примероците на ДНК исто така се детектира и потврдува со брзина на апсорпција од 320 nm.

Избегнувајте преоптоварување на PCR плочите со производот
Колку и да е пожелно да се користат повеќе производи истовремено, тоа резултира со вкрстена контаминација на PCR плочите.

Преоптоварувањето на PCR плочите со различни производи претставува отпад и го отежнува утврдувањето на примероците.

Водете евиденција за аликвотни PCR реагенси
Континуираните циклуси на замрзнување/одмрзнување и честата употреба на аликвот може да ги оштетат PCR реагенсите, ензимите и DNTP преку рекристализација.

Секогаш настојувајте да ја следите брзината на употребениот аликвот при подготовката на примероците што треба да се анализираат.

Преферираниот LIMS е посоодветен за контрола на инвентарот и количината на замрзнати или одмрзнати реагенси и примероци.

Изберете ја најдобрата температура за жарење.
Изборот и користењето на погрешна температура на жарење е уште еден метод во кој резултатите од PCR содржат грешки.

Понекогаш, реакцијата не оди според планот. Пожелно е да се намали температурата на жарење за да се олесни успешна реакција.

Сепак, намалувањето на температурата ги зголемува шансите за лажно позитивни резултати и појава на прајмер димери.

Значајно е да се потврди анализата на кривата на топење при употреба на PCR плочите бидејќи тоа е добар индикатор за избор на точна температура на жарење.

Софтверот за дизајн на прајмери ​​помага при дизајнирањето, обезбедувањето на соодветна температура на жарење со директно намалување на грешката во PCR плочите.

Ви треба висококвалитетна PCR плоча?
Доколку размислувате каде да најдете сигурен производител на...PCR плочиНе пребарувајте повеќе бидејќи сте на вистинското место.

Љубезнокликнете тука за да не контактиратеза висококвалитетни производи и услуги по цена што нема да ви биде премногу скапа.


Време на објавување: 30 октомври 2021 година