Standardizatio processuum eorum optimizationem et subsequentem constitutionem atque harmonizationem complectitur, permittens optimam functionem diuturnam – ab usore independentem. Standardizatio qualitatem eventuum summae, necnon reproducibilitatem et comparabilitatem eorum, praestat.
Finis PCR (classicae) est generatio resultatus fidus et reproducibilis. Pro quibusdam applicationibus, proventus...Productum PCREtiam pertinens est. In his reactionibus, cura adhibenda est ne exempla laedantur et ut processus PCR stabilis maneat. Hoc significat introductionem contaminationum quae ad eventus falsos positivos vel falsos negativos ducere vel etiam reactionem PCR inhibere possunt, minimizare. Praeterea, condiciones reactionis quam maxime identicae esse debent pro singulis exemplis intra cursum et etiam ad reactiones subsequentes (eiusdem methodi) transferri possunt. Hoc refertur ad compositionem reactionum necnon ad genus moderationis temperaturae in cyclatore. Errores usoris, scilicet, quantum fieri potest vitandi sunt.
Infra, demonstrabimus difficultates quae occurrunt in praeparatione et per totum cursum PCR – necnon modos solutionum qui existunt respectu instrumentorum et rerum consumptibilium ad standardizationem fluxuum PCR adhibitarum.
Praeparatio reactionis
Dispensatio partium reactionis in vasa PCR, vel laminas, respective, multas difficultates superandas complectitur:
Conditiones reactionis
Exacta et accurata singularum partium dosis necessaria est cum condiciones reactionis quam identicissimae petuntur. Praeter bonam artem pipettandi, instrumentum rectum eligere est criticum. Mixtiones magistrales PCR saepe continent substantias quae viscositatem augent vel spumam generant. Dum pipettatur, hae ad madefactionem substantialem ducunt.apices pipettarum, ita accuratiam pipettationis minuens. Usus systematum dispensationis directae vel apicibus pipettarum alternativis quae minus madefactioni pronae sunt accuratiam et praecisionem processus pipettationis augere potest.
Contaminationes
Dum dispensantur, aerosola generantur quae, si intus pipettae attingere sinuntur, aliud specimen in proximo gradu pipettationis contaminare possunt. Hoc impediri potest per usum apicum filtrantium vel systematum translationis directae.
Res consumibiles, ut putaconsiliaVasa et laminae quae in processu PCR adhibentur non debent continere substantias quae specimen laedunt aut exitum falsificant. Hae includunt DNA, DNases, RNases et inhibitores PCR, necnon componentes quae potentia ex materia per reactionem exhaurire possunt – substantiae quae "leachables" appellantur.
Error usoris
Quo plura exempla tractantur, eo maius periculum erroris est. Facile fieri potest ut exemplum in vas falsum vel puteum falsum pipettetur. Hoc periculum insigniter reduci potest per notationem puteorum facile perspicuam. Per automationem graduum dispensationis, "factor humanus", id est, errores et variationes ab usore relatae, ad minimum reducuntur, ita reproducibilitas augentur, praesertim in casu parvorum voluminum reactionis. Hoc requirit ut laminae satis stabilitatis dimensionalis in statione laboris adhibeantur. Codices lineares adnexi legibilitatem machinalem additam praebent, quae vestigationem exemplorum per totum processum simplificat.
Programmatio thermocyclatoris
Instrumenti programmatio et tempus consumens et erroribus obnoxia esse potest. Variae proprietates cyclatoris thermalis PCR una operantur ut hunc gradum processus simplificent et, quod potissimum est, ut tutum reddant:
Facilis operatio et bona ductio usoris fundamentum sunt programmandi efficacis. Hoc fundamento innixa, administratio usorum tessera protecta impediet ne programmata propria ab aliis usoribus mutentur. Si plures cyclatores (eiusdem generis) in usu sunt, utile est si programma directe ex uno instrumento ad alterum per USB vel nexum transferri possit. Programmata computatralia administrationem centraliter et securam programmatum, iurium usorum et documentorum in computatro permittunt.
Cursus PCR
Per cursum, ADN in vase reactionis amplificatur, ubi singula exempla condicionibus reactionis identicis et constantibus subiici debent. Haec ad processum pertinent:
Temperatio moderanda
Excellens accuratio in moderatione temperaturae et homogenitas blocci cyclatoris fundamentum sunt ad aequabilem condicionem temperaturae omnium exemplorum. Qualitas alta elementorum calefacientium et refrigerantium (elementa Peltier), necnon modus quo haec blocco connectuntur, sunt factores decisivi qui periculum discrepantiae temperaturae, quae "effectus marginis" appellatur, determinabunt.
Evaporatio
Concentrationes singularum partium reactionis per cursum reactionis propter evaporationem non mutari debent. Alioquin fieri potest ut perpauca...Productum PCRgenerari potest, vel nulla omnino. Ergo essentiale est evaporationem minuere per firmam obsignationem. Hoc in casu, operculum calefactum thermocyclatoris et obsignatio vasis inter se coniunctim operantur. Variae optiones obsignationis praesto sunt proLaminae PCR (nexus: Articulus de obsignatione), qua optima obsignatio per obsignationem calore efficitur. Aliae clausurae etiam idoneae esse possunt, dummodo pressio contactus operculi cyclatoris ad obsignationem electam aptari possit.
Standardizatio processus instituta est ut eventus accurati et reproducibiles longo tempore conserventur. Hoc includit regularem apparatum conservationem ut semper in bona conditione operandi sit. Omnia consumibilia constanti qualitate alta esse debent per omnes partes productas, et earum certa disponibilitas praestanda est.
Tempus publicationis: Nov-XXIX-MMXXII