De standerdisearring fan prosessen omfettet har optimalisaasje en dêropfolgjende oprjochting en harmonisaasje, wêrtroch optimale prestaasjes op lange termyn mooglik binne - ûnôfhinklik fan 'e brûker.Standerdisearring soarget foar resultaten fan hege kwaliteit, lykas har reprodusearberens en fergelykberens.
It doel fan (klassike) PCR is it generearjen fan in betrouber en reprodusearjend resultaat.Foar bepaalde applikaasjes, de opbringst fan dePCR produktis ek relevant.Foar dizze reaksjes moatte soarch wurde nommen om te soargjen dat samples net kompromitteare wurde en dat de PCR-workflow stabyl bliuwt.Spesifyk fertaalt dit nei it minimalisearjen fan de ynfiering fan kontaminaasjes dy't liede kinne ta falske positive of falske negative resultaten of sels de PCR-reaksje remme.Fierder moatte de reaksjebetingsten sa identyk mooglik wêze foar elke yndividuele stekproef binnen in run en ek oerdraachber wêze kinne nei folgjende reaksjes (fan deselde metoade).Dit ferwiist nei de gearstalling fan 'e reaksjes en ek nei it type temperatuerkontrôle yn' e fytser.Brûkerflaters moatte fansels safolle mooglik foarkommen wurde.
Hjirûnder sille wy de útdagings demonstrearje dy't tsjinkomme by de tarieding en yn 'e rin fan in PCR - en de oanpak foar oplossingen dy't besteane oangeande ynstruminten en verbruiksartikelen brûkt foar de standerdisearring fan 'e PCR-workflows.
Reaksje tarieding
It dispensearjen fan reaksjekomponinten yn respektivelik PCR-skippen, as platen, omfettet meardere útdagings dy't moatte wurde oerwûn:
Reaksje betingsten
De krekte en krekte dosering fan de yndividuele komponinten is ûnmisber by it stribjen nei de meast identike reaksjebetingsten mooglik.Neist in goede pipetteertechnyk is it selektearjen fan it juste ark kritysk.PCR-mastermixen befetsje faak stoffen dy't de viskositeit ferheegje of skom generearje.Tidens it pipettingproses liede dizze ta substansjele wietting fan 'epipet tips, sadwaande it ferminderjen fan pipetting accuracy.It gebrûk fan systemen foar direkte dispensing as alternative pipettetips dy't minder gefoelich binne foar wietsjen kinne de krektens en krektens fan it pipettingproses ferbetterje.
Fersmoargingen
Tidens it dispenseringsproses wurde aerosolen genereare dy't, as tastien om de binnenkant fan 'e pipet te berikken, in oar monster potinsjeel kinne kontaminearje tidens de folgjende pipetteerstap.Dit kin foarkommen wurde troch filtertips of direkte ferpleatsingssystemen te brûken.
Verbruiksartikelen lykastips, skippen en platen dy't brûkt wurde yn 'e PCR-workflow moatte gjin stoffen befetsje dy't de stekproef kompromittearje of it resultaat ferfalskje.Dizze omfetsje DNA, DNases, RNases en PCR-ynhibitoren, lykas komponinten dy't mooglik út it materiaal lekje kinne tidens de reaksje - stoffen bekend as leachables.
Meidogger flater
Hoe mear samples wurde ferwurke, hoe heger it flaterrisiko.It kin maklik barre dat in monster yn it ferkearde skip of de ferkearde put pipet wurdt.Dit risiko kin flink fermindere wurde troch maklik te ûnderskieden markearring fan 'e putten.Troch de automatisearring fan dispenseringsstappen wurdt de "minsklike faktor", dat wol sizze, flaters en brûker-relatearre fariaasjes, minimalisearre, sadat de reprodusearberens tanimme, benammen yn it gefal fan lytse reaksjevoluminten.Dit fereasket platen fan foldwaande dimensionale stabiliteit te brûken yn in wurkstasjonStencils.Taheakke barcodes jouwe ekstra masinelêsberens, wat it folgjen fan samples troch it heule proses simplifies makket.
Programming fan de thermocycler
It programmearjen fan in ynstrumint kin blike te wêzen tiidslinend en ek flaterbestindich.Ferskillende funksjes fan PCR-thermyske fytsers wurkje gear om dizze prosesstap te ferienfâldigjen en, it wichtichste, om it feilich te meitsjen:
Maklike operaasje en goede brûkersbegelieding binne de basis fan effisjinte programmearring.Bouwend op dizze stifting sil wachtwurdbeskerme brûkersadministraasje foarkomme dat jins eigen programma's wurde feroare troch oare brûkers.As meardere fytsers (fan itselde type) yn gebrûk binne, is it foardielich as in programma direkt fan it iene ynstrumint nei it oare kin wurde oerdroegen fia USB of ferbining.Kompjûtersoftware makket sintrale en feilige administraasje fan programma's, brûkersrjochten en dokuminten op in kompjûter mooglik.
PCR rinne
Tidens de rin wurdt DNA fersterke yn it reaksjefet, wêrby't elk monster moat wurde ûnderwurpen oan identike, konsekwinte reaksjebetingsten.De folgjende aspekten binne relevant foar it proses:
Temperatuer kontrôle
Prachtige krektens yn temperatuerkontrôle en homogeniteit fan it cyclerblok binne de basis foar sels temperatuerkondysje fan alle samples.De hege kwaliteit fan 'e ferwaarming- en koeleleminten (peltier-eleminten), lykas de manier wêrop dizze ferbûn binne mei it blok, binne de beslissende faktoaren dy't it risiko fan temperatuerferskillen sille bepale bekend as it "râneffekt"
Ferdamping
De konsintraasjes fan 'e yndividuele reaksjekomponinten moatte net feroarje yn' e rin fan 'e reaksje fanwegen ferdamping.Oars, is it mooglik dat hiel lytsPCR produktkin oanmakke wurde, of hielendal gjin.It is dêrom krúsjaal om ferdamping te minimalisearjen troch in feilige segel te garandearjen.Yn dit gefal wurkje it ferwaarme deksel fan 'e thermocycler en it segel fan it skip hân yn hân.Ferskillende sealing opsjes binne beskikber foarPCR platen (keppeling: Sealing article), wêrby't de bêste seal wurdt berikt troch waarmte sealing.Oare slutingen kinne ek gaadlik wêze, salang't de kontaktdruk fan it cyclerdeksel oanpast wurde kin oan 'e selektearre segel.
Prosesstanderdisearring is yn plak om krekte en reprodusearjende resultaten op 'e lange termyn te beskermjen.Dit omfettet regelmjittich ûnderhâld fan 'e apparatuer om te soargjen dat it altyd yn goede wurkjende steat is.Alle verbruiksartikelen moatte fan konsekwint hege kwaliteit wêze oer alle produsearre partijen, en har betroubere beskikberens moat wurde garandearre.
Post tiid: Nov-29-2022