پروسيس جي معيار ۾ شامل آهن انهن جي اصلاح ۽ بعد ۾ اسٽيبلشمينٽ ۽ همراهائيزيشن، اجازت ڏئي ٿي ڊگهي مدت جي بهتر ڪارڪردگي - صارف کان آزاد.معيار کي يقيني بڻائي ٿو اعلي معيار جا نتيجا، انهي سان گڏ انهن جي پيداوار ۽ مطابقت.
(کلاسڪ) پي سي آر جو مقصد هڪ قابل اعتماد ۽ ٻيهر پيدا ٿيندڙ نتيجن جو نسل آهي.ڪجهه ايپليڪيشنن لاء، جي پيداوارپي سي آر پراڊڪٽپڻ لاڳاپيل آهي.انهن رد عملن لاءِ، خيال رکڻ ضروري آهي ته ان ڳالهه کي يقيني بڻايو وڃي ته نمونن سان سمجهوتو نه ڪيو وڃي ۽ PCR جو ڪم فلو مستحڪم رهي.خاص طور تي، اهو ترجمو ڪري ٿو آلودگي جي تعارف کي گھٽائڻ لاء جيڪو غلط مثبت يا غلط منفي نتيجن جي ڪري سگھي ٿو يا پي سي آر جي رد عمل کي به روڪي سگھي ٿو.ان کان علاوه، رد عمل جي حالتن کي ممڪن طور تي هڪجهڙائي هجڻ گهرجي هر فرد جي نموني لاء هڪ رن اندر ۽ پڻ منتقلي جي قابل ٿي بعد ۾ رد عمل (ساڳي طريقي جي).هي رد عمل جي جوڙجڪ ڏانهن اشارو ڪري ٿو ۽ انهي سان گڏ سائيڪل ۾ درجه حرارت جي ڪنٽرول جي قسم ڏانهن.صارف جي غلطين، يقينا، ممڪن حد کان بچڻ گهرجي.
هيٺ، اسان انهن چيلنجز جو مظاهرو ڪنداسين جيڪي تياري دوران ۽ پي سي آر جي پوري ڊوڙ دوران پيش اچن ٿا - ۽ حلن جا طريقا جيڪي PCR ورڪ فلوز جي معياري ڪرڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ اوزارن ۽ استعمال ٿيندڙ سامان جي حوالي سان موجود آهن.
رد عمل جي تياري
رد عمل جي اجزاء کي پي سي آر ويسلز، يا پليٽن ۾ ورهائڻ، ترتيب سان، ڪيترن ئي چئلينجن تي مشتمل آهي جن تي غالب ٿيڻ گهرجي:
رد عمل جون حالتون
انفرادي اجزاء جي صحيح ۽ درست مقدار لازمي آهي جڏهن ممڪن آهي ته سڀ کان وڌيڪ هڪجهڙائي واري رد عمل جي حالتن جو مقصد.سٺي پائپنگ ٽيڪنڪ جي علاوه، صحيح اوزار چونڊڻ اهم آهي.پي سي آر ماسٽر ميڪس ۾ اڪثر شيون شامل هونديون آهن جيڪي ويسڪوسيٽي وڌائين ٿيون يا فوم پيدا ڪن ٿيون.پائپنگ جي عمل جي دوران، انهن جي اڳواڻي ۾ ڪافي گندگي جي ڪري ٿيpipette جون صلاحون, اهڙيء طرح pipetting جي درستگي کي گهٽائڻ.سڌو ڊسپينسنگ سسٽم جو استعمال يا متبادل پائيپٽ ٽوپس جيڪي ويٽنگ لاءِ گهٽ هوندا آهن پائپنگ جي عمل جي درستگي ۽ درستگي کي بهتر بڻائي سگهن ٿا.
آلودگي
ڊسپينسنگ جي عمل دوران، ايروسول ٺاهيا ويندا آهن، جن کي جيڪڏهن پائيپٽ جي اندر تائين پهچڻ جي اجازت ڏني وڃي، ممڪن طور تي ايندڙ پائپنگ واري مرحلي دوران ٻئي نموني کي آلوده ڪري سگهي ٿي.هن کي روڪي سگهجي ٿو فلٽر ٽوٽڪا استعمال ڪندي يا سڌو بي گھرڻ وارو نظام.
استعمال ٿيندڙ شيون جهڙوڪصلاحون, برتن ۽ پليٽ جيڪي پي سي آر جي ڪم جي فلو ۾ استعمال ڪيا ويا آهن انهن ۾ مواد شامل نه هجڻ گهرجي جيڪي نموني سان سمجهوتو ڪن ٿا يا نتيجن کي غلط ڪن ٿا.انهن ۾ شامل آهن DNA، DNases، RNases ۽ PCR inhibitors، گڏو گڏ اجزاء جيڪي ممڪن طور تي رد عمل جي دوران مواد مان ليچ ڪري سگھن ٿا - مواد جيڪي ليچ ايبل طور سڃاتل آهن.
استعمال ڪندڙ جي غلطي
وڌيڪ نمونن تي عمل ڪيو ويندو، اعلي غلطي جو خطرو.اهو آساني سان ٿي سگهي ٿو ته هڪ نمونو غلط برتن يا غلط کوهه ۾ پائپ ڪيو ويو آهي.اهو خطرو ڪافي حد تائين گهٽجي سگهي ٿو کوهن جي آسانيءَ سان نمايان نشانن سان.ڊسپينسنگ مرحلن جي آٽوميشن ذريعي، "انساني عنصر"، يعني، غلطيون ۽ صارف سان لاڳاپيل مختلف تبديليون، گھٽجي وينديون آهن، اهڙيء طرح پيداوار وڌائڻ، خاص طور تي ننڍن ردعمل جي مقدار جي صورت ۾.ان لاءِ ضروري آهي ته ڪافي جہتي استحڪام جي پليٽن کي ورڪ اسٽيشن ۾ ملازم ڪيو وڃي.منسلڪ بارڪوڊس اضافي مشين-پڙهڻ جي صلاحيت مهيا ڪن ٿا، جيڪا پوري عمل ۾ نموني ٽريڪنگ کي آسان بڻائي ٿي.
Thermocycler جي پروگرامنگ
پروگرامنگ هڪ اوزار ثابت ٿي سگهي ٿو وقت سازي سان گڏو گڏ غلطي جو شڪار.مختلف پي سي آر تھرمل سائيڪلر خاصيتون گڏجي ڪم ڪن ٿيون ھن عمل کي آسان ڪرڻ لاءِ ۽، سڀ کان اھم، ان کي محفوظ بڻائڻ لاءِ:
آسان آپريشن ۽ سٺي صارف جي رهنمائي موثر پروگرامنگ جو بنياد آهن.هن بنياد تي تعمير ڪندي، پاسورڊ-محفوظ صارف انتظاميه ٻين صارفين طرفان پنهنجي پروگرامن کي تبديل ڪرڻ کان روڪيندو.جيڪڏهن گھڻا سائيڪلر (ساڳئي قسم جا) استعمال ۾ آهن، اهو فائدي وارو آهي جيڪڏهن هڪ پروگرام سڌو سنئون هڪ اوزار کان ٻئي ڏانهن USB يا ڪنيڪشن ذريعي منتقل ڪري سگهجي ٿو.ڪمپيوٽر سافٽ ويئر هڪ ڪمپيوٽر تي پروگرامن، صارف جي حقن ۽ دستاويزن جي مرڪزي ۽ محفوظ انتظاميه کي فعال ڪري ٿو.
PCR هلائڻ
هلائڻ دوران، ڊي اين اي رد عمل جي برتن ۾ وڌايو ويندو آهي، جتي هر نموني کي هڪجهڙائي، مسلسل رد عمل جي حالتن جي تابع ٿيڻ گهرجي.ھيٺيون شيون ھن عمل سان لاڳاپيل آھن:
درجه حرارت ڪنٽرول
گرمي پد جي ڪنٽرول ۾ بهترين درستگي ۽ سائيڪلر بلاڪ جي هڪجهڙائي سڀني نمونن جي گرمي پد جي ڪنڊيشن لاء بنياد آهن.حرارتي ۽ کولنگ عناصر جي اعليٰ معيار (پيلٽير عناصر)، ۽ انهي طريقي سان جنهن ۾ اهي بلاڪ سان ڳنڍيل آهن، اهي فيصلا ڪندڙ عنصر آهن جيڪي درجه حرارت جي اختلافن جي خطري کي طئي ڪندا آهن جن کي ”ايج اثر“ جي نالي سان سڃاتو وڃي ٿو.
بخارات
انفرادي رد عمل جي اجزاء جي ڪنسنٽريشن کي رد عمل جي دوران تبديل نه ٿيڻ گهرجي بخار جي ڪري.ٻي صورت ۾، اهو ممڪن آهي ته تمام گهٽپي سي آر پراڊڪٽپيدا ٿي سگھي ٿو، يا ڪجھ به نه.تنهن ڪري اهو ضروري آهي ته هڪ محفوظ مهر کي يقيني بڻائڻ سان بخارات کي گهٽائڻ لاء.انهي حالت ۾، thermocycler جي گرم لٺ ۽ جهاز جي مهر هٿ ۾ ڪم ڪري ٿي.سيلنگ جا مختلف آپشن موجود آهنپي سي آر پليٽ (لنڪ: سيلنگ آرٽيڪل)، جنهن جي ذريعي بهترين مهر حاصل ڪئي وئي آهي گرمي مهر ذريعي.ٻيون بندشون به مناسب ٿي سگھن ٿيون، جيستائين سائيڪلر لڊ جي رابطي جي دٻاء کي منتخب ٿيل مهر کي ترتيب ڏئي سگھجي ٿو.
ڊگھي مدت ۾ صحيح ۽ ٻيهر پيدا ٿيندڙ نتيجن کي محفوظ ڪرڻ لاءِ پروسيس جي معيار کي ترتيب ڏنو ويو آهي.هن ۾ سامان جي باقاعده سار سنڀال شامل آهي انهي کي يقيني بڻائڻ ته اهو هميشه سٺي ڪم ڪندڙ حالت ۾ آهي.سڀ استعمال ٿيندڙ سامان مسلسل اعليٰ معيار جا هجڻ گهرجن، ۽ انهن جي قابل اعتماد دستيابي جي ضمانت هجڻ گهرجي.
پوسٽ جو وقت: نومبر-29-2022