O le faʻatulagaina o faʻagasologa e aofia ai lo latou faʻataʻitaʻiga ma le faʻavaeina mulimuli ane ma le faʻatasi, faʻatagaina le faʻatinoina o le faʻatinoga umi - tutoatasi mai le tagata faʻaoga.Fa'ata'ita'iga fa'amautinoa le maualuga o taunu'uga, fa'apea fo'i ma lo latou toe fa'aleleia ma fa'atusatusa.
Ole sini ole PCR ole fa'atupuina ole taunu'uga fa'atuatuaina ma toe fa'aleleia.Mo nisi talosaga, o le fua o lePCR oloae talafeagai foi.Mo nei tali, e tatau ona faʻaeteete ina ia mautinoa e le faʻafefeteina faʻataʻitaʻiga ma o loʻo tumau pea le PCR workflow.Aemaise lava, o le fa'aliliuina lea i le fa'aitiitia o le fa'aofiina o fa'ama'i e mafai ona ta'ita'iina ai i'uga lelei sese po'o fa'ai'uga leaga sese po'o le taofia fo'i o le tali a le PCR.E le gata i lea, o tulaga tali e tatau ona tutusa lelei mo faʻataʻitaʻiga taʻitoʻatasi i totonu o le taʻavale ma faʻafeiloaʻi foi i tali mulimuli ane (o le auala lava e tasi).E faasino lea i le tu'ufa'atasiga o tali fa'apea fo'i le ituaiga e pulea le vevela i totonu o le uila.O mea sese a tagata faʻaoga, ioe, e tatau ona aloese mai le tele e mafai ai.
I lalo ifo, o le a matou faʻaalia luʻitau e feagai i le taimi o sauniuniga ma le taimi atoa o le PCR - ma auala i fofo o loʻo i ai e faʻatatau i meafaigaluega ma mea faʻaaogaina mo le faʻavasegaina o le PCR workflows.
Sauniuniga tali
O le tuʻuina atu o vaega tali i totonu o PCR-vaa, poʻo papatusi, i le faasologa, e aofia ai le tele o luitau e tatau ona foia:
Tulaga tali
O le sa'o ma le sa'o o tui o vaega ta'itasi e matua'i mana'omia lava pe a fa'amoemoe mo tulaga e sili ona tali tutusa e mafai.I le faaopoopo atu i se faiga paipa lelei, o le filifilia o le meafaigaluega sa'o e taua tele.PCR master-mixes e masani ona iai ni mea e fa'ateleina ai le viscosity po'o le fa'atupu foam.I le faagasologa o le paipa, o nei mea e taitai atu ai i le tele o le susu o lepito paipa, ma faʻaitiitia ai le saʻo o paipa.O le fa'aogaina o faiga tu'u sa'o po'o isi fa'amatalaga paipa e fa'aitiitia le susu e mafai ona fa'aleleia atili ai le sa'o ma le sa'o o le faiga o paipa.
Fa'aleagaina
A'o fa'agasolo le tu'uina atu, e fa'atupuina aerosol, pe a fa'ataga e o'o i totonu ole paipa, e ono fa'aleagaina ai se isi fa'ata'ita'iga ile isi la'asaga paipa.E mafai ona puipuia lenei mea e ala i le faʻaogaina o faʻamatalaga faamama poʻo faiga tuusao.
Mea fa'aaoga e pei ofesoasoani, va'a ma ipu o lo'o fa'aaogaina i le PCR workflow e le tatau ona i ai ni mea e fa'afefe ai le fa'ata'ita'iga pe fa'asese le taunu'uga.O nei mea e aofia ai DNA, DNases, RNases ma PCR inhibitors, faʻapea foʻi ma vaega e ono faʻafefe mai mea i le taimi o le gaioiga - o mea e taʻua o le leachables.
Fa'aoga sese
O le tele o faʻataʻitaʻiga e faʻatautaia, o le maualuga o le faʻalavelave faʻalavelave.E faigofie ona tupu o se faʻataʻitaʻiga e paipa i totonu o le vaʻa sese poʻo le vaieli sese.O lenei tulaga lamatia e mafai ona matua faaitiitia e ala i le faigofie ona iloagofie o le makaina o vaieli.E ala i le otometi o laʻasaga tuʻufaʻatasia, o le "tagata soifua", o lona uiga, o mea sese ma fesuiaiga e fesoʻotaʻi i tagata faʻaoga, e faʻaitiitia, ma faʻateleina ai le toe gaosia, aemaise lava i le tulaga o le laititi o le tali.Ole mea lea e mana'omia ai papatusi ia lava le mautu e fa'aogaina ile fale faigaluega.O fa'amaufa'ailoga fa'apipi'i e maua ai le fa'aopoopoina o masini faitau, lea e fa'afaigofie ai le su'eina o fa'ata'ita'iga i le faagasologa atoa.
Polokalama o le thermocycler
O le fa'apolokalameina o se meafaigaluega e mafai ona fa'amaonia e alu ai le taimi fa'apea fo'i ma mea sese.E galulue fa'atasi vaega eseese o le uila afi PCR e fa'afaigofie ai lenei laasaga ma, e sili ona taua, ia saogalemu:
Faigofie le faʻaogaina ma le faʻaogaina lelei o le faʻaogaina o le faʻavae o polokalame lelei.Fausia i luga o lenei faʻavae, faʻaupuga-puipuia pulega faʻaoga o le a taofia ai e le tagata lava ia polokalame mai le suia e isi tagata faʻaoga.Afai e tele uila uila (o le ituaiga tutusa) o loʻo faʻaogaina, e aoga pe a mafai ona faʻafeiloaʻi saʻo se polokalame mai le tasi mea faigaluega i le isi e ala i le USB poʻo le fesoʻotaʻiga.O polokalame faakomepiuta e mafai ai ona fa'atotonu ma malupuipuia le fa'afoeina o polokalame, aia tatau a tagata fa'aoga ma pepa i luga o se komepiuta.
PCR tamoe
I le taimi o le taʻavale, e faʻateleina le DNA i totonu o le vaʻa tali, lea e tatau ona tuʻuina atu faʻataʻitaʻiga taʻitasi i tulaga tutusa, faʻaauau tali.O vaega nei e talafeagai mo le faagasologa:
Puleaina o le vevela
Sa'o lelei i le pulea o le vevela ma le tutusa o le poloka uila o le faavae lea mo le fa'amautuina o le vevela o fa'ata'ita'iga uma.O le maualuga o le faʻamafanafana ma le malulu elemene (elemene peltier), faʻapea foʻi ma le auala o loʻo fesoʻotaʻi ai nei mea i le poloka, o mea ia e filifili ai e fuafua ai le lamatiaga o le vevela o le vevela e taʻua o le "edge effect"
Fa'asao
E le tatau ona suia le fa'atonuga o vaega fa'aletagata ta'ito'atasi i le gasologa o le tali ona o le fa'asao.A leai, e mafai ona itiiti lavaPCR oloae mafai ona gaosia, pe leai lava.O lea e taua ai le fa'aitiitia o le fa'asao e ala i le fa'amautinoaina o se fa'amaufa'ailoga mautu.I lenei tulaga, o le tapuni vevela o le thermocycler ma le faʻamaufaʻailoga o le vaʻa e galulue faʻatasi.O avanoa fa'amaufa'ailoga eseese e avanoa moPapatusi PCR (so'otaga: Fa'amaufa'ailoga), lea e maua ai le faʻamaufaʻailoga sili ona lelei e ala i le faʻamauina o le vevela.O isi tapuni e mafai foi ona talafeagai, pe afai e mafai ona fetuutuunai le faʻafesoʻotaʻi o le tapuni uila i le faʻamaufaʻailoga filifilia.
O lo'o fa'atulagaina le fa'avasegaina o fa'agasologa ina ia puipuia ai fa'ai'uga sa'o ma toe fa'afo'iina i se taimi umi.E aofia ai ma le tausiga faifaipea o meafaigaluega ina ia mautinoa o loʻo lelei i taimi uma.O mea fa'aaoga uma e tatau ona fa'atumauina le tulaga maualuga i vaega uma o lo'o gaosia, ma e tatau ona fa'amaonia lo latou avanoa fa'alagolago.
Taimi meli: Nov-29-2022