ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಅವುಗಳ ಅತ್ಯುತ್ತಮೀಕರಣ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಸ್ಥಾಪನೆ ಮತ್ತು ಸಮನ್ವಯತೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಬಳಕೆದಾರರಿಂದ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಖಾತ್ರಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಜೊತೆಗೆ ಅವುಗಳ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ.
(ಕ್ಲಾಸಿಕ್) PCR ನ ಗುರಿ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಮತ್ತು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದು. ಕೆಲವು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳಿಗೆ, ಇಳುವರಿಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಸಹ ಪ್ರಸ್ತುತವಾಗಿದೆ. ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ, ಮಾದರಿಗಳು ರಾಜಿಯಾಗದಂತೆ ಮತ್ತು PCR ಕೆಲಸದ ಹರಿವು ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುವುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಾಳಜಿ ವಹಿಸಬೇಕು. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಇದು ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ ಅಥವಾ ತಪ್ಪು ಋಣಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಅಥವಾ PCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವ ಮಾಲಿನ್ಯಗಳ ಪರಿಚಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಒಂದು ರನ್ನೊಳಗಿನ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಮಾದರಿಗೆ ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಒಂದೇ ಆಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ನಂತರದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ (ಅದೇ ವಿಧಾನದ) ವರ್ಗಾಯಿಸಬಹುದಾಗಿದೆ. ಇದು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಹಾಗೂ ಸೈಕ್ಲರ್ನಲ್ಲಿನ ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಪ್ರಕಾರವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಬಳಕೆದಾರ ದೋಷಗಳನ್ನು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ತಪ್ಪಿಸಬೇಕು.
ಕೆಳಗೆ, ಪಿಸಿಆರ್ ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಅದರ ಚಾಲನೆಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಎದುರಾಗುವ ಸವಾಲುಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಕಾರ್ಯಪ್ರವಾಹಗಳ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕೆ ಬಳಸುವ ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ಪರಿಹಾರಗಳ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ನಾವು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತೇವೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸಿದ್ಧತೆ
ಕ್ರಮವಾಗಿ ಪಿಸಿಆರ್-ನಾಳಗಳು ಅಥವಾ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಘಟಕಗಳನ್ನು ವಿತರಿಸುವುದು ಬಹು ಸವಾಲುಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಅದನ್ನು ನಿವಾರಿಸಬೇಕು:
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಿಕೊಂಡಾಗ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಘಟಕಗಳ ನಿಖರ ಮತ್ತು ನಿಖರವಾದ ಡೋಸಿಂಗ್ ಅತ್ಯಗತ್ಯ. ಉತ್ತಮ ಪೈಪೆಟ್ಟಿಂಗ್ ತಂತ್ರದ ಜೊತೆಗೆ, ಸರಿಯಾದ ಸಾಧನವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ಬಹಳ ಮುಖ್ಯ. ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಸ್ಟರ್-ಮಿಶ್ರಣಗಳು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಸ್ನಿಗ್ಧತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಅಥವಾ ಫೋಮ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಪೈಪೆಟ್ಟಿಂಗ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಇವು ಗಣನೀಯವಾಗಿ ತೇವಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ.ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿಗಳು, ಹೀಗಾಗಿ ಪೈಪ್ ಹಾಕುವ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ನೇರ ವಿತರಣಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ಅಥವಾ ತೇವಕ್ಕೆ ಕಡಿಮೆ ಒಳಗಾಗುವ ಪರ್ಯಾಯ ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿಗಳ ಬಳಕೆಯು ಪೈಪ್ ಹಾಕುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ನಿಖರತೆ ಮತ್ತು ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು.
ಮಾಲಿನ್ಯಗಳು
ವಿತರಿಸುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಏರೋಸಾಲ್ಗಳು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತವೆ, ಇವು ಪೈಪೆಟ್ನ ಒಳಭಾಗವನ್ನು ತಲುಪಲು ಅನುಮತಿಸಿದರೆ, ಮುಂದಿನ ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಮತ್ತೊಂದು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕಲುಷಿತಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಫಿಲ್ಟರ್ ಟಿಪ್ಸ್ ಅಥವಾ ನೇರ ಸ್ಥಳಾಂತರ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ ಇದನ್ನು ತಡೆಯಬಹುದು.
ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳು ಉದಾಹರಣೆಗೆಸಲಹೆಗಳು, PCR ಕೆಲಸದ ಹರಿವಿನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಪಾತ್ರೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು ಮಾದರಿಯನ್ನು ರಾಜಿ ಮಾಡುವ ಅಥವಾ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಸುಳ್ಳು ಮಾಡುವ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಾರದು. ಇವುಗಳಲ್ಲಿ DNA, DNases, RNases ಮತ್ತು PCR ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳು, ಹಾಗೆಯೇ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವಸ್ತುವಿನಿಂದ ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ಸೋರಿಕೆಯಾಗಬಹುದಾದ ಘಟಕಗಳು - ಲೀಚಬಲ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ವಸ್ತುಗಳು ಸೇರಿವೆ.
ಬಳಕೆದಾರರ ದೋಷ
ಹೆಚ್ಚು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದಷ್ಟೂ ದೋಷದ ಅಪಾಯ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ತಪ್ಪು ಪಾತ್ರೆ ಅಥವಾ ತಪ್ಪು ಬಾವಿಗೆ ಪೈಪ್ ಮೂಲಕ ಸುಲಭವಾಗಿ ಹಾಕಬಹುದು. ಬಾವಿಗಳ ಸುಲಭವಾಗಿ ಗ್ರಹಿಸಬಹುದಾದ ಗುರುತು ಹಾಕುವ ಮೂಲಕ ಈ ಅಪಾಯವನ್ನು ಗಣನೀಯವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ವಿತರಣಾ ಹಂತಗಳ ಯಾಂತ್ರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ, "ಮಾನವ ಅಂಶ", ಅಂದರೆ ದೋಷಗಳು ಮತ್ತು ಬಳಕೆದಾರ-ಸಂಬಂಧಿತ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಸಣ್ಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಮಾಣಗಳ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ. ಇದಕ್ಕೆ ಕಾರ್ಯಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಆಯಾಮದ ಸ್ಥಿರತೆಯ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ. ಲಗತ್ತಿಸಲಾದ ಬಾರ್ಕೋಡ್ಗಳು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಯಂತ್ರ-ಓದುವಿಕೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಮಾದರಿ ಟ್ರ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಥರ್ಮೋಸೈಕ್ಲರ್ನ ಪ್ರೋಗ್ರಾಮಿಂಗ್
ಉಪಕರಣವನ್ನು ಪ್ರೋಗ್ರಾಮಿಂಗ್ ಮಾಡುವುದು ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ದೋಷ-ಪೀಡಿತವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಬಹುದು. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಹಂತವನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ, ಅದನ್ನು ಸುರಕ್ಷಿತವಾಗಿಸಲು ವಿಭಿನ್ನ PCR ಥರ್ಮಲ್ ಸೈಕ್ಲರ್ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು ಒಟ್ಟಾಗಿ ಕೆಲಸ ಮಾಡುತ್ತವೆ:
ಸುಲಭ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ಬಳಕೆದಾರ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನವು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಪ್ರೋಗ್ರಾಮಿಂಗ್ನ ಆಧಾರವಾಗಿದೆ. ಈ ಅಡಿಪಾಯದ ಮೇಲೆ ನಿರ್ಮಿಸುವುದರಿಂದ, ಪಾಸ್ವರ್ಡ್-ರಕ್ಷಿತ ಬಳಕೆದಾರ ಆಡಳಿತವು ಒಬ್ಬರ ಸ್ವಂತ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂಗಳನ್ನು ಇತರ ಬಳಕೆದಾರರು ಬದಲಾಯಿಸುವುದನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಬಹು ಸೈಕ್ಲರ್ಗಳು (ಒಂದೇ ರೀತಿಯ) ಬಳಕೆಯಲ್ಲಿದ್ದರೆ, USB ಅಥವಾ ಸಂಪರ್ಕದ ಮೂಲಕ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ಒಂದು ಉಪಕರಣದಿಂದ ಇನ್ನೊಂದಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ವರ್ಗಾಯಿಸಬಹುದಾದರೆ ಅದು ಪ್ರಯೋಜನಕಾರಿಯಾಗಿದೆ. ಕಂಪ್ಯೂಟರ್ ಸಾಫ್ಟ್ವೇರ್ ಕಂಪ್ಯೂಟರ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂಗಳು, ಬಳಕೆದಾರರ ಹಕ್ಕುಗಳು ಮತ್ತು ದಾಖಲೆಗಳ ಕೇಂದ್ರ ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷಿತ ಆಡಳಿತವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಪಿಸಿಆರ್ ಪರೀಕ್ಷೆ
ಓಟದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಪಾತ್ರೆಯಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ವರ್ಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಒಂದೇ ರೀತಿಯ, ಸ್ಥಿರವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಿಗೆ ಒಳಪಡಿಸಬೇಕು. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೆ ಈ ಕೆಳಗಿನ ಅಂಶಗಳು ಪ್ರಸ್ತುತವಾಗಿವೆ:
ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣ
ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ನಿಖರತೆ ಮತ್ತು ಸೈಕ್ಲರ್ ಬ್ಲಾಕ್ನ ಏಕರೂಪತೆಯು ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳ ಸಮ ತಾಪಮಾನ ಕಂಡೀಷನಿಂಗ್ಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿದೆ. ತಾಪನ ಮತ್ತು ತಂಪಾಗಿಸುವ ಅಂಶಗಳ (ಪೆಲ್ಟಿಯರ್ ಅಂಶಗಳು) ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟ, ಹಾಗೆಯೇ ಇವುಗಳನ್ನು ಬ್ಲಾಕ್ಗೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸುವ ವಿಧಾನವು "ಅಂಚಿನ ಪರಿಣಾಮ" ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ತಾಪಮಾನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳ ಅಪಾಯವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಅಂಶಗಳಾಗಿವೆ.
ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆ
ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆಯಿಂದಾಗಿ ಕ್ರಿಯೆಯ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕ್ರಿಯೆಯ ಘಟಕಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಬದಲಾಗಬಾರದು. ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಅದು ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಇರುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ.ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು, ಅಥವಾ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗದೇ ಇರಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ ಸುರಕ್ಷಿತ ಸೀಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು ಬಹಳ ಮುಖ್ಯ. ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಥರ್ಮೋಸೈಕ್ಲರ್ನ ಬಿಸಿಮಾಡಿದ ಮುಚ್ಚಳ ಮತ್ತು ಹಡಗಿನ ಸೀಲಿಂಗ್ ಪರಸ್ಪರ ಕೈಜೋಡಿಸುತ್ತದೆ. ವಿಭಿನ್ನ ಸೀಲಿಂಗ್ ಆಯ್ಕೆಗಳು ಲಭ್ಯವಿದೆ.ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು (ಲಿಂಕ್: ಸೀಲಿಂಗ್ ಲೇಖನ), ಆ ಮೂಲಕ ಶಾಖ ಸೀಲಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸೀಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸೈಕ್ಲರ್ ಮುಚ್ಚಳದ ಸಂಪರ್ಕ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿದ ಸೀಲ್ಗೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದಾದವರೆಗೆ ಇತರ ಮುಚ್ಚುವಿಕೆಗಳು ಸಹ ಸೂಕ್ತವಾಗಬಹುದು.
ದೀರ್ಘಾವಧಿಯಲ್ಲಿ ನಿಖರ ಮತ್ತು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಕಾಪಾಡುವ ಸಲುವಾಗಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಜಾರಿಯಲ್ಲಿದೆ. ಉಪಕರಣಗಳು ಯಾವಾಗಲೂ ಉತ್ತಮ ಕೆಲಸದ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿರುವುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಇದರ ನಿಯಮಿತ ನಿರ್ವಹಣೆಯೂ ಸೇರಿದೆ. ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಎಲ್ಲಾ ಲಾಟ್ಗಳಲ್ಲಿ ಎಲ್ಲಾ ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳು ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ್ದಾಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಲಭ್ಯತೆಯನ್ನು ಖಾತರಿಪಡಿಸಬೇಕು.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ನವೆಂಬರ್-29-2022
