Tha cunbhalachadh phròiseasan a’ gabhail a-steach an leasachadh agus an stèidheachadh agus an co-chòrdadh às dèidh sin, a’ leigeil le coileanadh as fheàrr san fhad-ùine – neo-eisimeileach bhon neach-cleachdaidh. Tha cunbhalachadh a’ dèanamh cinnteach à toraidhean àrd-inbhe, a bharrachd air an ath-riochdachadh agus an coimeasachd.
Is e amas PCR (clasaigeach) toradh earbsach agus ath-riochdachail a chruthachadh. Airson cuid de thagraidhean, is e toradh anToradh PCRtha seo buntainneach cuideachd. Airson nan ath-bheachdan sin, feumar a bhith faiceallach gus dèanamh cinnteach nach tèid sampallan a mhilleadh agus gu bheil sruth-obrach PCR seasmhach. Gu sònraichte, tha seo ag eadar-theangachadh gu bhith a’ lughdachadh toirt a-steach truailleadh a dh’ fhaodadh leantainn gu toraidhean meallta dearbhach no meallta àicheil no eadhon casg a chuir air ath-bhualadh PCR. A bharrachd air an sin, bu chòir na suidheachaidhean ath-bhualadh a bhith cho co-ionann sa ghabhas airson gach sampall fa leth taobh a-staigh ruith agus cuideachd a bhith comasach a ghluasad gu ath-bheachdan às deidh sin (den aon dhòigh). Tha seo a’ toirt iomradh air co-dhèanamh nan ath-bheachdan a bharrachd air an t-seòrsa smachd teothachd anns an rothaichear. Gu dearbh, feumar mearachdan cleachdaiche a sheachnadh cho mòr ‘s as urrainn.
Gu h-ìosal, seallaidh sinn na dùbhlain a tha romhainn rè ullachadh agus fad ruith PCR – agus na dòighean-obrach airson fuasglaidhean a tha ann a thaobh ionnstramaidean agus stuthan consumichte a thathas a’ cleachdadh airson cunbhalachadh sruthan-obrach PCR.
Ullachadh ath-bhualadh
Tha iomadh dùbhlan ann a dh’fheumar faighinn thairis air nuair a thathar a’ cur phàirtean den ath-bhualadh ann an soithichean no pleitean PCR:
Cumhaichean ath-bhualadh
Tha dòsadh ceart is mionaideach nan co-phàirtean fa leth riatanach nuair a thathar ag amas air na suidheachaidhean freagairt as co-ionann a choileanadh. A bharrachd air deagh dhòigh-obrach pipettaidh, tha e deatamach an inneal ceart a thaghadh. Bidh stuthan ann am measgachaidhean maighstir PCR gu tric a bhios ag àrdachadh slaodachd no a’ gineadh cobhar. Rè a’ phròiseis pipettaidh, bidh iad sin ag adhbhrachadh fliuchadh mòr den ...molaidhean pipette, agus mar sin a’ lughdachadh cruinneas pìobaireachd. Faodaidh cleachdadh shiostaman sgaoilidh dhìreach no cinn-phìobaireachd eile nach eil cho buailteach do fhliuchadh cruinneas agus mionaideachd a’ phròiseis pìobaireachd a leasachadh.
Truailleadh
Rè a’ phròiseis sgaoilidh, bidh aerosolan air an cruthachadh agus, ma leigeas iad leotha ruighinn taobh a-staigh a’ phìoba, dh’ fhaodadh iad sampall eile a thruailleadh aig an ath cheum pìobaidheachd. Faodar seo a sheachnadh le bhith a’ cleachdadh cinn-sìoltachain no siostaman gluasaid dhìreach.
Stuthan consumichte leithidmolaidheanChan fhaod stuthan a bhith anns na soithichean agus na pleitean a thathar a’ cleachdadh ann an sruth-obrach PCR a chuireas an sampall ann an cunnart no a dh’fhulangas an toradh. Tha iad sin a’ gabhail a-steach DNA, DNases, RNases agus luchd-bacadh PCR, a bharrachd air co-phàirtean a dh’ fhaodadh a bhith a’ sileadh a-mach às an stuth rè an ath-bhualadh – stuthan ris an canar stuthan a ghabhas sileadh.
Mearachd cleachdaiche
Mar as motha de shamhlaichean a thèid a phròiseasadh, ’s ann as àirde a’ chunnart mearachd. Faodaidh e tachairt gu furasta gun tèid sampall a phìobaireachd a-steach don t-soitheach ceàrr no don tobar ceàrr. Faodar an cunnart seo a lùghdachadh gu mòr le bhith a’ comharrachadh nan tobraichean gu furasta. Tro bhith a’ fèin-ghluasad cheumannan sgaoilidh, tha am “bàillidh daonna”, i.e. mearachdan agus atharrachaidhean co-cheangailte ris an neach-cleachdaidh, air an lughdachadh, agus mar sin a’ meudachadh ath-riochdachadh, gu sònraichte a thaobh meudan beaga ath-bhualadh. Tha seo ag iarraidh pleitean le seasmhachd tomhasach gu leòr a bhith air an cleachdadh ann an stèisean-obrach. Bidh còdan-barra ceangailte a’ toirt seachad barrachd so-leughaidh inneal, a tha a’ sìmpleachadh tracadh shamhlaichean tron phròiseas gu lèir.
Prògramadh an teirm-chuairteir
Faodaidh prògramadh ionnstramaid a bhith a’ toirt ùine mhòr agus buailteach do mhearachdan. Bidh diofar fheartan rothaiche teirmeach PCR ag obair còmhla gus an ceum pròiseas seo a dhèanamh nas sìmplidhe agus, nas cudromaiche, gus a dhèanamh sàbhailte:
’S e obrachadh furasta agus deagh stiùireadh luchd-cleachdaidh bunait prògramadh èifeachdach. A’ togail air a’ bhunait seo, cuiridh rianachd luchd-cleachdaidh fo dhìon facal-faire casg air prògraman neach fhèin bho bhith air an atharrachadh le luchd-cleachdaidh eile. Ma tha grunn chuairtearan (den aon seòrsa) gan cleachdadh, tha e buannachdail ma ghabhas prògram a ghluasad gu dìreach bho aon inneal gu inneal eile tro USB no ceangal. Leigidh bathar-bog coimpiutair le rianachd meadhanach is tèarainte phrògraman, chòraichean luchd-cleachdaidh agus sgrìobhainnean air coimpiutair.
Ruith PCR
Rè an ruith, thèid DNA a mheudachadh anns an t-soitheach ath-bhualaidh, far am bu chòir gach sampall a bhith fo chumhachan ath-bhualaidh co-ionann, cunbhalach. Tha na taobhan a leanas buntainneach don phròiseas:
Smachd teòthachd
Tha cruinneas sàr-mhath ann an smachd teothachd agus aon-ghnèitheachd bloc an rothaichear mar bhunait airson suidheachadh teòthachd cothromach a h-uile sampall. Is e càileachd àrd nan eileamaidean teasachaidh is fuarachaidh (eileamaidean peltier), a bharrachd air an dòigh anns a bheil iad sin ceangailte ris a’ bhloc, na factaran cinnteach a dh’innseas dè an cunnart a th’ ann bho eadar-dhealachaidhean teothachd ris an canar “buaidh an oir”.
Galachadh
Cha bu chòir dùmhlachd nan co-phàirtean fa leth den ath-bhualadh atharrachadh rè na h-ath-bhualadh air sgàth falmhachadh. Rud eile, tha e comasach nach bi mòran ann.Toradh PCRdh’fhaodadh gun tèid gineadh, no gun gin idir. Mar sin tha e deatamach gun tèid falmhachadh a lughdachadh le bhith a’ dèanamh cinnteach à seula tèarainte. Anns a’ chùis seo, bidh mullach teasachaidh an teirm-chuairteir agus seula an t-soithich ag obair làmh ri làimh. Tha diofar roghainnean seulachaidh rim faighinn airsonPlàtaichean PCR (ceangal: Artaigil mu sheulachadh), agus mar sin gheibhear an ròn as fheàrr tro bhith a’ seulachadh teas. Dh’fhaodadh dùnadh eile a bhith freagarrach cuideachd, fhad ‘s as urrainnear cuideam conaltraidh mullach an inneil-rothaireachd atharrachadh a rèir an ròin a chaidh a thaghadh.
Tha cunbhalachadh phròiseasan an sàs gus toraidhean ceart is ath-riochdachail a dhìon san fhad-ùine. Tha seo a’ toirt a-steach cumail suas cunbhalach an uidheamachd gus dèanamh cinnteach gu bheil e an-còmhnaidh ann an deagh staid obrach. Bu chòir a h-uile stuth consumichte a bhith de chàileachd àrd cunbhalach thar gach baidse a thèid a thoirt a-mach, agus feumar gealltainn gum bi iad rim faighinn gu earbsach.
Àm puist: 29 dhen t-Samhain 2022