Ir-reazzjonijiet katina tal-polimerażi (PCR) huma wieħed mill-metodi magħrufa sew użati fil-laboratorji tax-xjenza tal-ħajja.
Il-pjanċi tal-PCR huma prodotti minn plastik tal-ewwel klassi għal ipproċessar u analiżi eċċellenti tal-kampjuni jew tar-riżultati miġbura.
Għandhom ħitan irqaq u omoġenji biex jipprovdu trasferiment termali preċiż.
Bi tħejjija għal applikazzjonijiet f'ħin reali, sezzjonijiet żgħar ta' DNA jew RNA jiġu iżolati u maħżuna fi pjanċi tal-PCR.
Il-pjanċi tal-PCR huma effiċjenti ħafna fis-siġillar bis-sħana u jirrestrinġu wkoll il-fluss tas-sħana.
Madankollu, għalkemm il-pjanċi tal-PCR huma effettivi u affidabbli, l-iżbalji u l-ineżattezzi jinqalgħu faċilment waqt l-ipproċessar tal-kampjuni.
Għalhekk, jekk inti interessat li tikseb xi ħaġa tajba u ta’ kwalità għoljaPjanċi tal-PCR.Huwa ideali li tikkuntattja manifattur affidabbli tal-pjanċi tal-PCR. B'dan inti ċert li se tikseb l-aħjar ftehim.
Hawn huma xi prekawzjonijiet li għandek issegwi biex tevita kontaminazzjonijiet ta' reaġenti jew kampjuni u tipprevjeni li l-ineżattezzi jidħlu fir-riżultati.
Sterilizzazzjoni tal-Inħawi
Pożittivi jew negattivi mhux korretti jseħħu minħabba l-preżenza ta' impuritajiet, li jġiegħlek tiddubita r-riżultati.
L-impuritajiet u l-kontaminanti jseħħu f'diversi forom bħal DNA mhux relatat jew addittivi kimiċi li eventwalment inaqqsu l-effiċjenza u l-effettività tar-reazzjoni.
Hemm bosta modi kif titnaqqas ħafna r-rata ta' kontaminazzjoni tal-pjanċa tal-PCR.
L-użu ta' ponot tal-filtru sterilizzati huwa mod ieħor utli biex tevita li l-impuritajiet jidħlu fil-kampjuni tiegħek permezz tal-pipetti.
Iddedika sett ta' tagħmir kompletament nadif, li jikkonsisti minn pipetti u xtillieri, esklussivament għall-użu tal-PCR. Dan jiggarantixxi trasferiment negliġibbli ta' impuritajiet jew kontaminanti madwar il-laboratorju.
Uża bliċ, etanol fuq il-pipetti, l-ixkafef u l-bankijiet biex timsaħ il-kontaminanti.
Alloka spazju riservat għar-reazzjonijiet PCR kollha tiegħek biex tnaqqas aktar il-kontaminazzjoni tal-partiċelli.
Uża ingwanti nodfa f'kull pass u ibdelhom ta' spiss.
Pjanċi tal-PCR
Spezzjona l-Konċentrazzjoni u l-Purità tat-Template.
L-indafa tal-bank tat-testijiet u t-tagħmir użat meta jiġu analizzati kampjuni bil-PCR għandha tinżamm. Huwa essenzjali li jiġi vvalidat il-grad ta' purità tal-kampjuni qabel l-analiżi u l-ipproċessar.
Ġeneralment, l-analizzaturi jqisu l-konċentrazzjoni u l-livell ta' purità tal-kampjuni tad-DNA.
Ipprova li l-proporzjon tal-assorbenza għal 260nm/280nm ma għandux ikun inqas minn 1.8. Filwaqt li t-tul tal-mewġ sussegwenti bejn 230nm u 320nm jintuża biex jidentifika l-impuritajiet.
F'każ wieħed, melħ kaotropiku u komposti organiċi oħra jinstabu b'rata ta' assorbenza ta' 230nm. Filwaqt li t-turbidità fil-kampjuni tad-DNA tiġi wkoll skoperta u vverifikata b'rata ta' assorbenza ta' 320nm.
Evita li timla żżejjed il-Pjanċi tal-PCR bil-prodott
Għalkemm huwa mixtieq li jitħaddmu diversi prodotti simultanjament, dan jirriżulta f'kontaminazzjoni inkroċjata tal-pjanċi tal-PCR.
It-tagħbija żejda tal-pjanċi tal-PCR bi prodotti differenti toħloq ħela u tagħmilha estremament diffiċli biex jiġu aċċertati l-kampjuni.
Żomm Rekords tar-Reaġenti tal-PCR tal-Alikwot
Ċikli kontinwi ta' ffriżar/tidwib u użu frekwenti ta' alikwot jistgħu jagħmlu ħsara lir-reaġenti tal-PCR, l-enzimi u d-DNTPs permezz tar-rikristallizzazzjoni.
Dejjem agħmel ħiltek biex timmonitorja r-rata tal-alikwott użata waqt li tkun qed tipprepara l-kampjuni li għandhom jiġu analizzati.
LIMS preferibbli huwa aktar adattat biex jikkontrolla l-inventarju u l-ammont ta' reaġenti u kampjuni ffriżati jew imdewba.
Agħżel l-Aħjar Temperatura tat-Tisħin.
L-għażla u l-użu tat-temperatura ħażina tat-temprar huwa metodu ieħor li bih ir-riżultati tal-PCR ikun fihom żbalji.
Xi kultant, ir-reazzjoni ma tmurx kif ippjanat. Huwa mixtieq li titnaqqas it-temperatura tat-temprar sabiex tiġi ffaċilitata reazzjoni ta' suċċess.
Madankollu, it-tnaqqis tat-temperatura jżid iċ-ċansijiet ta' pożittivi foloz u d-dehra ta' dimeri tal-primer.
Huwa sinifikanti li tikkonferma l-analiżi tal-kurva tat-tidwib meta tuża l-pjanċi tal-PCR peress li huwa indikatur tajjeb tal-għażla tat-temperatura korretta tat-temprar.
Is-softwer tad-disinn tal-primer jgħin fid-disinn, jipprovdi t-temperatura t-tajba tat-temprar u jnaqqas direttament l-iżball fil-pjanċi tal-PCR.
Għandek bżonn pjanċa PCR ta' kwalità għolja?
Fil-każ li kont qed tikkunsidra fejn issib manifattur affidabbli ta'Pjanċi tal-PCR. M'għandekx għalfejn tfittex aktar għax qiegħed fil-post it-tajjeb.
Ġentilmentikklikkja hawn biex tikkuntattjanagħal prodotti u servizzi ta' kwalità għolja bi prezz li ma jiswikx ħafna flus.
Ħin tal-posta: 30 ta' Ottubru 2021