Áirítear le caighdeánú próiseas a n-uasmhéadú agus a mbunú agus a chomhchuibhiú ina dhiaidh sin, rud a cheadaíonn feidhmíocht optamach fhadtéarmach – neamhspleách ar an úsáideoir. Cinntíonn caighdeánú torthaí ardchaighdeáin, chomh maith lena n-in-athchruthaitheacht agus a n-inchomparáideacht.
Is é cuspóir PCR (clasaiceach) toradh iontaofa agus in-athchruthaithe a ghiniúint. I gcás feidhmeanna áirithe, is é toradh anTáirge PCRtá sé ábhartha freisin. Maidir leis na frithghníomhartha seo, ní mór a bheith cúramach chun a chinntiú nach ndéantar dochar do na samplaí agus go bhfanann an sreabhadh oibre PCR cobhsaí. Go sonrach, ciallaíonn sé seo go laghdaítear an méid truaillithe a d’fhéadfadh a bheith mar thoradh air, rud a d’fhéadfadh torthaí dearfacha bréagacha nó diúltacha bréagacha a bheith mar thoradh air nó fiú an t-imoibriú PCR a chosc. Ina theannta sin, ba cheart go mbeadh na coinníollacha imoibrithe chomh comhionann agus is féidir do gach sampla aonair laistigh de rith agus ba cheart go mbeadh siad inaistrithe chuig frithghníomhartha ina dhiaidh sin (den mhodh céanna). Tagraíonn sé seo do chomhdhéanamh na n-imoibrithe chomh maith leis an gcineál rialaithe teochta sa timthriallóir. Ar ndóigh, ba cheart earráidí úsáideora a sheachaint a oiread agus is féidir.
Thíos, léireoimid na dúshláin a bhíonn ann le linn ullmhúcháin agus le linn rith PCR – agus na cineálacha cur chuige maidir le réitigh atá ann maidir le hionstraimí agus tomhaltáin a úsáidtear chun sreafaí oibre PCR a chaighdeánú.
Ullmhúchán imoibrithe
Tá roinnt dúshlán i gceist le comhpháirteanna imoibrithe a dháileadh i soithigh PCR, nó i bplátaí, faoi seach, agus ní mór iad a shárú:
Coinníollacha imoibrithe
Tá dáileog chruinn agus chruinn na gcomhpháirteanna aonair riachtanach agus na coinníollacha imoibrithe is comhionanna is féidir á ndíriú. Chomh maith le teicníc mhaith pípéadaithe, tá sé ríthábhachtach an uirlis cheart a roghnú. Is minic a bhíonn substaintí i máistir-mheascáin PCR a mhéadaíonn slaodacht nó a ghineann cúr. Le linn an phróisis pípéadaithe, bíonn siad seo ina gcúis le fliuchadh suntasach an...leideanna pipéad, rud a laghdaíonn cruinneas na pípéadaithe. Is féidir le húsáid córas dáilte dírí nó bairr pípéad malartacha nach bhfuil chomh seans maith go bhfliuchfar iad cruinneas agus beachtas an phróisis pípéadaithe a fheabhsú.
Éillithe
Le linn an phróisis dáilte, gintear aerasóil agus má ligtear dóibh teacht isteach sa phípéad, d’fhéadfadh siad sampla eile a éilliú le linn an chéad chéim eile den phípéadú. Is féidir cosc a chur air seo trí úsáid a bhaint as bairr scagaire nó córais díláithrithe dírí.
Tomhaltáin amhailleideanna, ní mór nach mbeadh substaintí a chuireann an sampla i mbaol nó a bhréagnaíonn an toradh sna soithí agus sna plátaí a úsáidtear sa sreabhadh oibre PCR. Áirítear leis seo DNA, DNáisí, RNáisí agus coscairí PCR, chomh maith le comhpháirteanna a d'fhéadfadh sceitheadh ón ábhar le linn an imoibrithe – substaintí ar a dtugtar insceithithe.
Earráid úsáideora
Dá mhéad samplaí a phróiseáiltear, is ea is airde an riosca earráide. Is furasta sampla a phípéadú isteach sa soitheach mícheart nó sa tobar mícheart. Is féidir an riosca seo a laghdú go suntasach trí mharcáil shoiléir a dhéanamh ar na tobair. Trí uathoibriú na gcéimeanna dáilte, laghdaítear an “fachtóir daonna”, i.e. earráidí agus athruithe a bhaineann leis an úsáideoir, rud a mhéadaíonn atáirgtheacht, go háirithe i gcás toirteanna beaga imoibrithe. Éilíonn sé seo plátaí a bhfuil cobhsaíocht tríthoiseach leordhóthanach acu a úsáid i stáisiún oibre. Soláthraíonn barrachóid ceangailte inléiteacht bhreise meaisín, rud a shimplíonn rianú samplaí ar fud an phróisis ar fad.
Cláreagrú an teirmeachimthriallaí
Is féidir go dtógfaidh clárú uirlise go leor ama agus go mbeidh seans maith ann go ndéanfar earráidí. Oibríonn gnéithe éagsúla de thimthrialltán teirmeach PCR le chéile chun an chéim phróisis seo a shimpliú agus, thar aon rud eile, chun é a dhéanamh sábháilte:
Is iad oibriú éasca agus treoir mhaith úsáideora bunús na cláreoireachta éifeachtúla. Trí thógáil ar an mbonn seo, cuirfidh riarachán úsáideora atá cosanta ag pasfhocal cosc ar úsáideoirí eile a gcláir féin a athrú. Má tá il-chíoraitheoirí (den chineál céanna) in úsáid, is buntáisteach é más féidir clár a aistriú go díreach ó ionstraim amháin go ceann eile trí USB nó nascacht. Cuireann bogearraí ríomhaireachta ar chumas riarachán lárnach agus slán clár, cearta úsáideoirí agus doiciméad ar ríomhaire.
Rith PCR
Le linn an rith, déantar DNA a aimpliú sa soitheach imoibrithe, áit ar cheart gach sampla a chur faoi réir coinníollacha imoibrithe comhionanna, comhsheasmhacha. Tá na gnéithe seo a leanas ábhartha don phróiseas:
Rialú teochta
Is iad cruinneas den scoth i rialú teochta agus aonchineálacht an bhloic timthriallaithe bunús le haghaidh riochtú teochta cothrom na samplaí uile. Is iad ardchaighdeán na n-eilimintí téimh agus fuaraithe (eilimintí peltier), chomh maith leis an gcaoi a bhfuil siad seo ceangailte leis an mbloc, na tosca cinntitheacha a chinnfidh an riosca maidir le neamhréireachtaí teochta ar a dtugtar an “éifeacht imeall”.
Galú
Níor cheart go n-athródh tiúchan na gcomhpháirteanna imoibrithe aonair le linn an imoibrithe mar gheall ar ghalú. Seachas sin, is féidir nach mbeidh mórán annTáirge PCRféadfar é a ghiniúint, nó gan aon cheann ar chor ar bith. Dá bhrí sin, tá sé ríthábhachtach galú a íoslaghdú trí shéala slán a chinntiú. Sa chás seo, oibríonn clúdach téite an teirmeachicléire agus séala an tsoithigh lámh ar láimh. Tá roghanna séalaithe éagsúla ar fáil le haghaidhPlátaí PCR (nasc: Alt faoi shéalú), trína mbaintear an séala is fearr amach trí shéalú teasa. D’fhéadfadh dúnadh eile a bheith oiriúnach freisin, fad is féidir brú teagmhála chlúdán an timthriallóra a choigeartú don séala roghnaithe.
Tá caighdeánú próiseas i bhfeidhm chun torthaí cruinne agus in-athchruthaithe a chosaint san fhadtéarma. Áirítear leis seo cothabháil rialta ar an trealamh lena chinntiú go bhfuil sé i riocht oibre maith i gcónaí. Ba chóir go mbeadh gach tomhaltán d’ardchaighdeán comhsheasmhach ar fud na mbaicteanna uile a tháirgtear, agus ní mór a n-infhaighteacht iontaofa a ráthú.
Am an phoist: 29 Samhain 2022