5 Mẹo đơn giản để tránh lỗi khi làm việc với đĩa PCR

Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) là một trong những phương pháp được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm khoa học sự sống.

Các đĩa PCR được sản xuất từ ​​nhựa cao cấp để xử lý và phân tích mẫu hoặc kết quả thu thập được một cách tối ưu.

Chúng có thành mỏng và đồng nhất để cung cấp khả năng truyền nhiệt chính xác.

Để chuẩn bị cho các ứng dụng thời gian thực, các đoạn DNA hoặc RNA nhỏ được tách riêng và lưu trữ trong các đĩa PCR.

Các tấm PCR có hiệu quả cao trong việc hàn nhiệt và hạn chế luồng nhiệt.

Tuy nhiên, mặc dù đĩa PCR có hiệu quả và đáng tin cậy đến đâu, lỗi và sự không chính xác vẫn dễ dàng xảy ra trong quá trình xử lý mẫu.

Vì vậy, nếu bạn quan tâm đến việc có được một sản phẩm tốt và chất lượng caoĐĩa PCR.Tốt nhất là liên hệ với một nhà sản xuất đĩa PCR đáng tin cậy. Với điều này, bạn chắc chắn sẽ nhận được thỏa thuận tốt nhất.

Sau đây là một số biện pháp phòng ngừa cần tuân theo để tránh nhiễm bẩn thuốc thử hoặc mẫu và ngăn ngừa những sai sót ảnh hưởng đến kết quả.

Khử trùng môi trường xung quanh
Kết quả dương tính hoặc âm tính không chính xác xảy ra do sự hiện diện của tạp chất, khiến bạn nghi ngờ kết quả.

Các tạp chất và chất gây ô nhiễm xuất hiện ở nhiều dạng khác nhau như DNA không liên quan hoặc các chất phụ gia hóa học, cuối cùng làm giảm hiệu quả của phản ứng.

Có nhiều cách để giảm đáng kể tỷ lệ nhiễm bẩn của đĩa PCR.

Sử dụng đầu lọc đã khử trùng cũng là một cách hữu ích để ngăn tạp chất xâm nhập vào mẫu thông qua pipet.

Dành riêng một bộ thiết bị hoàn toàn sạch sẽ, bao gồm pipet và giá đỡ, dành riêng cho việc sử dụng PCR. Điều này sẽ đảm bảo việc truyền tạp chất hoặc chất gây ô nhiễm không đáng kể xung quanh phòng thí nghiệm.

Sử dụng thuốc tẩy, etanol trên pipet, giá đỡ và băng ghế để lau sạch chất bẩn.

Dành riêng một không gian cho tất cả các phản ứng PCR của bạn để giảm thiểu tối đa sự nhiễm bẩn của các hạt.

Sử dụng găng tay sạch ở mọi bước và thay găng tay thường xuyên.

Đĩa PCR
Kiểm tra nồng độ và độ tinh khiết của mẫu.
Cần duy trì độ sạch của băng ghế và thiết bị được sử dụng khi phân tích mẫu bằng PCR. Điều cần thiết là phải xác nhận mức độ tinh khiết của mẫu trước khi phân tích và xử lý.

Nhìn chung, máy phân tích sẽ xem xét nồng độ và mức độ tinh khiết của mẫu DNA.

Cố gắng tỷ lệ hấp thụ ở 260nm/280nm không được nhỏ hơn 1,8. Trong khi bước sóng tiếp theo giữa 230nm và 320nm được sử dụng để xác định tạp chất.

Trong một trường hợp, muối hỗn loạn và các hợp chất hữu cơ khác được phát hiện ở tốc độ hấp thụ 230nm. Trong khi độ đục trong các mẫu DNA cũng được phát hiện và xác minh ở tốc độ hấp thụ 320nm.

Tránh quá tải các tấm PCR với sản phẩm
Mặc dù mong muốn chạy nhiều sản phẩm cùng lúc nhưng điều này lại dẫn đến tình trạng nhiễm chéo các đĩa PCR.

Việc cho quá nhiều sản phẩm khác nhau vào đĩa PCR sẽ gây lãng phí và khiến việc xác định mẫu trở nên cực kỳ khó khăn.

Lưu giữ hồ sơ thuốc thử PCR Aliquot
Các chu kỳ đông/rã đông liên tục và việc sử dụng thường xuyên một phần mẫu có thể làm hỏng thuốc thử PCR, enzyme và DNTP thông qua quá trình kết tinh lại.

Luôn cố gắng theo dõi tỷ lệ phần mẫu được sử dụng trong khi chuẩn bị mẫu để phân tích.

Hệ thống LIMS thích hợp hơn để kiểm soát hàng tồn kho và số lượng thuốc thử và mẫu đông lạnh hoặc rã đông.

Chọn nhiệt độ ủ tốt nhất.
Chọn và sử dụng nhiệt độ gắn kết không đúng cũng là một nguyên nhân khiến kết quả PCR có thể bị lỗi.

Đôi khi, phản ứng không diễn ra theo kế hoạch. Người ta muốn giảm nhiệt độ ủ để tạo điều kiện cho phản ứng thành công.

Tuy nhiên, việc hạ nhiệt độ sẽ làm tăng khả năng xuất hiện kết quả dương tính giả và hiện tượng trùng hợp mồi.

Việc xác nhận phân tích đường cong nóng chảy là rất quan trọng khi sử dụng đĩa PCR vì đây là chỉ báo tốt để lựa chọn nhiệt độ gắn kết phù hợp.

Phần mềm thiết kế mồi hỗ trợ thiết kế, cung cấp nhiệt độ gắn phù hợp giúp giảm trực tiếp lỗi trong các đĩa PCR.

Bạn đang cần đĩa PCR chất lượng cao?
Trong trường hợp bạn đang cân nhắc tìm một nhà sản xuất đáng tin cậy ở đâuĐĩa PCR. Không cần tìm kiếm nữa vì bạn đã đến đúng nơi.

Vui lòngnhấp vào đây để liên hệ với chúng tôiđể có được những sản phẩm và dịch vụ chất lượng cao với mức giá phải chăng.


Thời gian đăng: 30-10-2021