Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je jednou zo široko známych metód používaných v laboratóriách biologických vied.
PCR platne sú vyrobené z prvotriednych plastov pre vynikajúce spracovanie a analýzu zozbieraných vzoriek alebo výsledkov.
Majú tenké a homogénne steny, ktoré zabezpečujú presný prenos tepla.
Pri príprave na aplikácie v reálnom čase sa nepatrné rezy DNA alebo RNA izolujú a ukladajú na PCR platne.
PCR platne sú vysoko účinné pri tepelnom utesňovaní a tiež obmedzujú tok tepla.
Aj keď sú PCR platne účinné a spoľahlivé, pri spracovaní vzoriek sa ľahko vyskytujú chyby a nepresnosti.
Preto, ak máte záujem o získanie dobrého a kvalitnéhoPCR platne.Ideálne je kontaktovať spoľahlivého výrobcu PCR platní. Takto si môžete byť istí, že získate najlepšiu ponuku.
Tu je niekoľko preventívnych opatrení, ktoré treba dodržiavať, aby ste predišli kontaminácii činidiel alebo vzoriek a zabránili nepresnostiam vo výsledkoch.
Sterilizácia okolia
Nesprávne pozitívne alebo negatívne výsledky sa vyskytujú v dôsledku prítomnosti nečistôt, čo vedie k pochybnostiam o výsledkoch.
Nečistoty a kontaminanty sa vyskytujú v rôznych formách, ako napríklad nesúvisiaca DNA alebo chemické prísady, ktoré nakoniec znižujú účinnosť a efektívnosť reakcie.
Existuje množstvo spôsobov, ako výrazne znížiť mieru kontaminácie PCR platne.
Používanie sterilizovaných filtračných špičiek je ďalším užitočným spôsobom, ako zabrániť vnikaniu nečistôt do vzoriek cez pipety.
Vyhraďte úplne čistú sadu vybavenia, pozostávajúcu z pipiet a stojanov, výhradne na použitie PCR. To zaručí zanedbateľný prenos nečistôt alebo kontaminantov v laboratóriu.
Na odstránenie nečistôt použite na pipety, stojany a stoly bielidlá a etanol.
Vyhradte si priestor pre všetky PCR reakcie, aby ste ešte viac minimalizovali kontamináciu časticami.
Pri každom kroku používajte čisté rukavice a často ich vymieňajte.
PCR platne
Skontrolujte koncentráciu a čistotu šablóny.
Pri analýze vzoriek pomocou PCR je potrebné udržiavať čistotu laboratórneho stola a vybavenia používaného v praxi. Pred analýzou a spracovaním je nevyhnutné overiť stupeň čistoty vzoriek.
Analyzátory vo všeobecnosti zohľadňujú koncentráciu a úroveň čistoty vzoriek DNA.
Snažte sa, aby pomer absorbancie pre 260 nm/280 nm nebol menší ako 1,8. Na identifikáciu nečistôt sa používajú vlnové dĺžky medzi 230 nm a 320 nm.
Napríklad chaotropné soli a iné organické zlúčeniny sa detegujú pri absorbancii 230 nm. Zákal vo vzorkách DNA sa tiež deteguje a overuje pri absorbancii 320 nm.
Zabráňte preťaženiu PCR platní produktom
Aj keď je žiaduce spracovávať viacero produktov súčasne, vedie to ku krížovej kontaminácii PCR platní.
Preťaženie PCR platní rôznymi produktmi vedie k plytvaniu a extrémne sťažuje určenie pôvodu vzoriek.
Uchovávajte záznamy o alikvotných PCR činidlách
Nepretržité cykly zmrazovania/rozmrazovania a časté používanie alikvotných podielov môžu poškodiť PCR činidlá, enzýmy a DNTP v dôsledku rekryštalizácie.
Pri príprave vzoriek na analýzu sa vždy snažte sledovať rýchlosť použitého alikvotného podielu.
Na kontrolu zásob a množstva zmrazených alebo rozmrazených činidiel a vzoriek je vhodnejší systém LIMS.
Vyberte si najlepšiu teplotu žíhania.
Výber a použitie nesprávnej teploty žíhania je ďalšou metódou, ktorá vedie k chybám vo výsledkoch PCR.
Niekedy reakcia neprebieha podľa plánu. Pre úspešný priebeh reakcie je žiaduce znížiť teplotu žíhania.
Zníženie teploty však zvyšuje pravdepodobnosť falošne pozitívnych výsledkov a výskytu dimérov primerov.
Pri použití PCR platní je dôležité potvrdiť analýzu krivky topenia, pretože je to dobrý indikátor výberu správnej teploty žíhania.
Softvér na návrh primerov pomáha s navrhovaním, zabezpečením správnej teploty žíhania, čím priamo znižuje chybovosť v PCR platniach.
Potrebujete vysokokvalitnú PCR platňu?
V prípade, že ste premýšľali, kde nájsť spoľahlivého výrobcuPCR platneUž viac nehľadajte, pretože ste na správnom mieste.
Láskavokliknite sem a kontaktujte násza vysoko kvalitné produkty a služby za cenu, ktorá vás nezruinuje.
Čas uverejnenia: 30. októbra 2021