पोलिमरेज चेन रियाक्सन (PCR) जीवन विज्ञान प्रयोगशालाहरूमा प्रयोग हुने व्यापक रूपमा ज्ञात विधिहरू मध्ये एक हो।
संकलन गरिएका नमूना वा नतिजाहरूको उत्कृष्ट प्रशोधन र विश्लेषणको लागि PCR प्लेटहरू प्रथम श्रेणीको प्लास्टिकबाट उत्पादन गरिन्छ।
सटीक थर्मल स्थानान्तरण प्रदान गर्न तिनीहरूसँग पातलो र एकरूप पर्खालहरू छन्।
वास्तविक समय अनुप्रयोगहरूको तयारीमा, DNA वा RNA को सानो खण्डलाई अलग राखिन्छ र PCR प्लेटहरूमा भण्डारण गरिन्छ।
पीसीआर प्लेटहरू ताप सिल गर्न अत्यधिक कुशल छन् र तापको प्रवाहलाई पनि प्रतिबन्धित गर्छन्।
यद्यपि, PCR प्लेटहरू प्रभावकारी र भरपर्दो भए तापनि, नमूनाहरू प्रशोधन गर्दा त्रुटि र अशुद्धताहरू सजिलैसँग हुन सक्छन्।
त्यसकारण, यदि तपाईं राम्रो र उच्च गुणस्तर प्राप्त गर्न इच्छुक हुनुहुन्छ भनेPCR प्लेटहरू।भरपर्दो PCR प्लेट निर्मातालाई सम्पर्क गर्नु उपयुक्त हुन्छ। यसबाट तपाईंले उत्तम सम्झौता पाउने कुरामा ढुक्क हुनुहुन्छ।
अभिकर्मक वा नमूनाहरूको दूषितताबाट बच्न र नतिजाहरूमा अशुद्धताहरू आउनबाट रोक्नको लागि यहाँ केही सावधानीहरू पालना गर्नुपर्नेछ।
वरपरको भागलाई जीवाणुमुक्त बनाउने
गलत सकारात्मक वा नकारात्मक अशुद्धताको उपस्थितिको कारणले हुन्छ, जसले गर्दा नतिजामा शंका लाग्छ।
अशुद्धता र प्रदूषकहरू विभिन्न रूपहरूमा देखा पर्दछन् जस्तै असंबद्ध डीएनए वा रासायनिक additives जसले अन्ततः प्रतिक्रियाको दक्षता र प्रभावकारिता घटाउँछ।
PCR प्लेटको प्रदूषण दरलाई धेरै हदसम्म कम गर्ने धेरै तरिकाहरू छन्।
पिपेटहरू मार्फत तपाईंको नमुनाहरूमा अशुद्धताहरू पस्नबाट रोक्नको लागि जीवाणुमुक्त फिल्टर टिप्स प्रयोग गर्नु अर्को उपयोगी तरिका हो।
PCR को प्रयोगको लागि विशेष रूपमा पिपेट्स र र्याकहरू सहितको पूर्ण रूपमा सफा उपकरणहरूको सेट समर्पित गर्नुहोस्। यसले प्रयोगशाला वरिपरि अशुद्धता वा दूषित पदार्थहरूको नगण्य स्थानान्तरणको ग्यारेन्टी गर्नेछ।
दूषित पदार्थहरू सफा गर्न पिपेट, र्याक र बेन्चहरूमा ब्लीच, इथेनॉल प्रयोग गर्नुहोस्।
कण प्रदूषणलाई अझ कम गर्न तपाईंको सबै PCR प्रतिक्रियाहरूको लागि आरक्षित ठाउँ छुट्याउनुहोस्।
हरेक पाइलामा सफा पन्जा प्रयोग गर्नुहोस् र बारम्बार बदल्नुहोस्।
PCR प्लेटहरू
ढाँचाको एकाग्रता र शुद्धता निरीक्षण गर्नुहोस्।
PCR मार्फत नमूनाहरूको विश्लेषण गर्दा प्रयोग गरिने बेन्च र उपकरणहरूको सरसफाइ कायम राख्नुपर्छ। विश्लेषण र प्रशोधन गर्नु अघि नमूनाहरूको शुद्धताको डिग्री प्रमाणित गर्नु आवश्यक छ।
सामान्यतया, विश्लेषकहरूले डीएनए नमूनाहरूको सांद्रता र शुद्धता स्तरलाई ध्यानमा राख्छन्।
२६०nm/२८०nm को लागि अवशोषण अनुपात १.८ भन्दा कम हुनु हुँदैन भन्ने प्रयास गर्नुहोस्। जबकि २३०nm र ३२०nm बीचको तरंगदैर्ध्य अशुद्धता पहिचान गर्न प्रयोग गरिन्छ।
एक उदाहरणमा, चाओट्रोपिक लवण र अन्य जैविक यौगिकहरू २३० एनएम अवशोषण दरमा पत्ता लगाइन्छ। जबकि डीएनए नमूनाहरूमा टर्बिडिटी पनि ३२० एनएमको अवशोषण दरमा पत्ता लगाइन्छ र प्रमाणित गरिन्छ।
उत्पादनले PCR प्लेटहरू ओभरलोड नगर्नुहोस्
एकैसाथ धेरै उत्पादनहरू चलाउन जति चाहियो, यसले PCR प्लेटहरूको क्रस-दूषितता निम्त्याउँछ।
विभिन्न उत्पादनहरूले पीसीआर प्लेटहरू ओभरलोड गर्दा फोहोर हुन्छ र नमूनाहरू पत्ता लगाउन अत्यन्तै गाह्रो हुन्छ।
Aliquot PCR अभिकर्मकहरूको रेकर्ड राख्नुहोस्
निरन्तर फ्रिज/थाउ साइकल र एलिक्वोटको बारम्बार प्रयोगले पुन: क्रिस्टलाइजेसन मार्फत PCR अभिकर्मक, इन्जाइम र DNTP लाई क्षति पुर्याउन सक्छ।
विश्लेषण गरिने नमूनाहरू तयार गर्दा प्रयोग गरिएको एलिक्वोटको दर सधैं निगरानी गर्ने प्रयास गर्नुहोस्।
मनपर्ने LIMS भण्डारण र अभिकर्मक र नमूनाहरू जमेको वा पग्लिएको मात्रा नियन्त्रण गर्न बढी उपयुक्त हुन्छ।
उत्तम एनिलिंग तापक्रम छान्नुहोस्।
गलत एनिलिङ तापक्रम छनोट गर्नु र प्रयोग गर्नु अर्को तरिका हो जुन PCR नतिजाहरूमा त्रुटि हुन्छ।
कहिलेकाहीँ, प्रतिक्रिया योजना अनुसार हुँदैन। सफल प्रतिक्रियालाई सहज बनाउन एनिलिङ तापक्रम घटाउन आवश्यक हुन्छ।
यद्यपि, तापक्रम घटाउँदा गलत सकारात्मकता र प्राइमर डाइमरहरू देखा पर्ने सम्भावना बढ्छ।
PCR प्लेटहरू प्रयोग गर्दा पग्लने वक्रको विश्लेषण पुष्टि गर्नु महत्त्वपूर्ण छ किनकि यो सही एनिलिङ तापक्रम चयन गर्ने राम्रो सूचक हो।
प्राइमर डिजाइन सफ्टवेयरले डिजाइनिङमा मद्दत गर्छ, सही एनिलिङ तापक्रमको व्यवस्था गर्छ र PCR प्लेटहरूमा त्रुटिलाई प्रत्यक्ष रूपमा कम गर्छ।
उच्च गुणस्तरको PCR प्लेट चाहिन्छ?
यदि तपाईं भरपर्दो निर्माता कहाँ फेला पार्ने भनेर सोच्दै हुनुहुन्छ भनेPCR प्लेटहरू। अब खोज्नु पर्दैन किनकि तपाईं सही ठाउँमा हुनुहुन्छ।
कृपयाहामीलाई सम्पर्क गर्न यहाँ क्लिक गर्नुहोस्उच्च गुणस्तरका उत्पादनहरू र सेवाहरूको लागि, जुन मूल्यमा धेरै खर्च लाग्दैन।
पोस्ट समय: अक्टोबर-३०-२०२१