No ka holomua o ka amplification reactions, pono e loaʻa nā ʻāpana hoʻololi i ka ʻike kūpono i kēlā me kēia hoʻomākaukau.Eia kekahi, he mea nui ʻaʻole hiki ke hoʻohaumia.
ʻOi loa i ka wā e hoʻonohonoho ʻia ai nā hopena he nui, ua hoʻokumu ʻia e hoʻomākaukau i kahi mea i kapa ʻia ʻo master mix ma mua o ka paipu ʻana i kēlā me kēia reagent i loko o kēlā me kēia moku.Loaʻa i nā hui ʻoihana i hoʻonohonoho mua ʻia, kahi i hoʻohui ʻia nā ʻāpana kikoʻī (primer) a me ka wai.ʻO kahi ʻē aʻe, hiki ke hoʻomākaukau ʻia ka master mix e ʻoe iho.Ma nā ʻano like ʻelua, ua puʻunaue ʻia ka hui ʻana i kēlā me kēia moku PCR me ka ʻole o ka laʻana a ua hoʻohui ʻia ka mea hoʻohālike DNA pākahi ma ka hope.
He nui nā pono o ka hoʻohana ʻana i kahi hui master: ʻO ka mea mua, ua hoʻemi ʻia ka helu o nā ʻanuʻu pipetting hoʻokahi.Ma kēia ala, hoʻemi ʻia ka pilikia o ka hewa o ka mea hoʻohana i ka wā pipetting a me ka pilikia o ka hoʻohaumia ʻana a, ʻoiaʻiʻo, mālama ʻia ka manawa.Ma ke kumu, ʻoi aku ka kiʻekiʻe o ka pololei o ka pipetting, no ka mea, ʻoi aku ka nui o nā puke.He maʻalahi kēia e hoʻomaopopo i ka nānā ʻana i ka ʻikepili ʻenehana o nā pipettes: ʻO ka liʻiliʻi o ka nui dosed, ʻoi aku ka kiʻekiʻe o nā deviations hiki ke .ʻO ka ʻoiaʻiʻo o ka hoʻomākaukau ʻana mai ka moku hoʻokahi he hopena maikaʻi i ka homogeneity (inā hui maikaʻi).Hoʻomaikaʻi kēia i ka reproducibility o nā hoʻokolohua.
I ka hoʻomākaukau ʻana i ka mix master, pono e hoʻohui ʻia ma ka liʻiliʻi he 10% o ka leo keu (e laʻa, inā he 10 mau hoʻomākaukau, e helu ma ke kumu o 11), i hoʻopiha pono ʻia ka ipu hope loa.Ma kēia ala, hiki ke hoʻopaʻi ʻia ka hopena o ka hāʻule ʻana o ka laʻana i ka wā e hoʻopaʻa ʻia ai ka wai holoi.Loaʻa nā mea holoi i loko o nā hopena enzyme e like me nā polymerases a me nā hui master, e hoʻokumu ai i ka pua a me nā koena ma ka ʻili o loko o ka maʻamau.ʻōlelo paipai pipette.
Ma muli o ka noi a me ke ʻano o ka wai e hāʻawi ʻia, pono e koho ʻia ke ʻano paipu kūpono (1) a koho ʻia nā mea pono kūpono.No nā mea hoʻonā i loaʻa nā mea holoi, ʻōlelo ʻia kahi ʻōnaehana hoʻoneʻe pololei a i ʻole nā ʻōlelo aʻoaʻo pipette "hoʻopaʻa haʻahaʻa" ma ke ʻano he ʻokoʻa no nā pipette air-cushion.Ka hopena oACE PIPETTE pikoua hoʻokumu ʻia ma kahi ʻili hydrophobic.ʻAʻole waiho nā wai i loko o nā mea holoi i ke koena kiʻiʻoniʻoni ma loko a ma waho, i hiki ke hoʻemi ʻia ka nalowale o ka hopena.
Ma waho aʻe o ka dosing pololei o nā mea āpau, he mea nui nō hoʻi ʻaʻole e hoʻopilikia ʻia nā mea hoʻomākaukau.ʻAʻole lawa ka hoʻohana ʻana i nā mea hoʻopau o ka maʻemaʻe kiʻekiʻe, no ka mea, ʻo ke kaʻina pipetting i loko o ka pipette air cushion hiki ke hana i nā aerosol e waiho nei i ka pipette.Hiki ke hoʻololi ʻia ka DNA i loko o ka aerosol mai kekahi laʻana a i ka mea aʻe ma ke kaʻina pipetting e hiki mai ana a pēlā e alakaʻi ai i ka haumia.Hiki i nā ʻōnaehana hoʻoneʻe pololei i ʻōlelo ʻia ma luna nei ke hōʻemi i kēia pilikia.No nā paipu ea-cushion he mea maʻalahi ke hoʻohana ʻana i nā ʻōlelo aʻoaʻo kānana no ka pale ʻana i ka cone pipette ma ka mālama ʻana i nā splashes, aerosols, a me nā biomolecules.
Ka manawa hoʻouna: Dec-06-2022