Уңышлы көчәйтү реакцияләре өчен индивидуаль реакция компонентлары һәр әзерлектә дөрес концентрациядә булырга тиеш.Моннан тыш, пычрану булмаска тиеш.
Бигрәк тә күп реакцияләр урнаштырырга туры килгәндә, һәр реагентны һәр савытка аерым кую урынына мастер-катнашма дип аталган әзерлек булдырылды.Алдан конфигурацияләнгән катнашмалар коммерцияле, аларда махсус компонентлар (праймер) һәм су өстәлә.Альтернатив рәвештә, мастер-катнашманы үзегез әзерли аласыз.Ике вариантта да катнашма һәр PCR савытына шаблонсыз таратыла һәм ахырда аерым ДНК үрнәге өстәлә.
Мастер катнашманы куллануның берничә өстенлеге бар: Беренчедән, бер адым ясау адымнары саны кими.Шул рәвешле, пипетинг вакытында кулланучының хаталары һәм пычрану куркынычы минимальләштерелә һәм, әлбәттә, вакыт саклана.Принципта, торбаларның төгәллеге дә югарырак, чөнки зуррак күләмнәр доза.Пипеткаларның техник мәгълүматларын тикшергәндә моны аңлау җиңел: доза күләме кечерәк булса, тайпылышлар шулкадәр зур булырга мөмкин.Барлык препаратларның да бер савыттан булуы бертөрлелеккә уңай тәэсир итә (яхшы катнашса).Бу шулай ук экспериментларның репродуктивлыгын яхшырта.
Мастер катнашманы әзерләгәндә ким дигәндә 10% өстәмә күләм өстәргә кирәк (мәсәлән, 10 препарат кирәк булса, 11 нигезендә исәпләгез), хәтта соңгы суднолар да дөрес тутырылган.Шул рәвешле, (аз) торбалар төгәлсезлекләр, һәм юу юлы булган эремәләрне дозалаганда үрнәк югалту эффекты компенсацияләнергә мөмкин.Деттерентлар полимеразалар һәм мастер катнашмалар кебек фермент эремәләрендә бар, нормаль эчке өслектә күбек барлыкка килүгә һәм калдыкларга китерә.пипетта киңәшләре.
Кушымта һәм таратыла торган сыеклык төренә карап, дөрес үткәргеч техникасы (1) сайланырга һәм тиешле җиһазлар сайланырга тиеш.Деттержентларны үз эченә алган чишелешләр өчен туры күчерү системасы яки "түбән тоту" дип аталган пипетка киңәшләре һава-ястык пипеталарга альтернатива буларак тәкъдим ителә.ЭффектACE PIPETTE киңәшеаеруча гидрофобик өслеккә нигезләнгән.Деттерентлар булган сыеклыклар эчтә һәм тышта калдык пленка калдырмыйлар, шуңа күрә эремә югалту минимумга төшә ала.
Барлык компонентларның төгәл дозасыннан тыш, препаратларның пычрануы да мөһим түгел.Highгары чисталык куллану материалларын куллану гына җитми, чөнки һава ястык пипеткасында торба үткәрү процессы пипетта калган аэрозоллар чыгарырга мөмкин.Аэрозолда булган ДНКны бер үрнәктән икенчесенә түбәндәге пипетинг адымында күчерергә һәм шулай итеп пычрануга китерергә мөмкин.Aboveгарыда телгә алынган туры күчерү системалары да бу куркынычны киметергә мөмкин.Airава ястык пипеткалары өчен чистарту, аэрозоллар һәм биомолекулаларны саклап, пипетка конусын саклау өчен фильтр киңәшләрен куллану мәгънәле.
Пост вакыты: дек-06-2022