为了成功的扩增反应，每种制剂中的各个反应组分必须以正确的浓度存在。此外，重要的是不发生污染。
特别是当必须设置许多反应时，已经确定制备所谓的主混合物，而不是将每种试剂分别移入每个容器中。预配置的混合物是市售的，其中仅添加样品特定的成分（底漆）和水。或者，可以自己准备主混合物。在这两种变体中，混合物在没有模板的情况下被分配到每个 PCR 容器中，并且在最后单独添加单个 DNA 样本。
使用预混液有几个优点：首先，减少了单次移液步骤的数量。通过这种方式，可以最大限度地降低移液过程中用户出错的风险和污染的风险，当然还可以节省时间。原则上，由于剂量更大，移液精度也更高。在查看移液器的技术数据时，这一点很容易理解：剂量越小，偏差就越大。事实上，所有制剂均来自同一容器，这对同质性（如果混合良好）具有积极影响。这也提高了实验的可重复性。
配制预混液时，应至少添加 10% 的额外体积（例如，如果需要 10 份制剂，则以 11 份为基础计算），以便即使最后一个容器也能正确填充。通过这种方式，可以补偿（轻微）移液误差以及添加含清洁剂溶液时样品损失的影响。聚合酶和主混合物等酶溶液中含有洗涤剂，会导致泡沫形成并残留在正常物体的内表面上。移液器吸头.
根据应用和待分配液体的类型，应选择正确的移液技术 (1) 并选择适当的设备。对于含有清洁剂的溶液，建议使用直接置换系统或所谓的“低保留”移液器吸头作为气垫移液器的替代品。的效果ACE 移液器吸头基于特别疏水的表面。含有清洁剂的液体不会在内外留下残膜，从而可以最大程度地减少溶液的损失。
除了所有成分的精确剂量外，制剂不发生污染也很重要。使用高纯度的耗材是不够的，因为气垫移液器中的移液过程会产生残留在移液器中的气溶胶。气溶胶中可能含有的 DNA 可能会在接下来的移液步骤中从一个样品转移到下一个样品，从而导致污染。上述直接位移系统也可以最大限度地降低这种风险。对于气垫移液器，使用过滤吸头通过保留飞溅物、气溶胶和生物分子来保护移液器锥体是有意义的。
发布时间：2022年12月6日