Beth ddylid ei ystyried wrth bibellu cymysgeddau PCR?

Ar gyfer adweithiau mwyhau llwyddiannus, mae'n angenrheidiol bod y cydrannau adwaith unigol yn bresennol yn y crynodiad cywir ym mhob paratoad.Yn ogystal, mae'n bwysig nad oes unrhyw halogiad.

Yn enwedig pan fydd yn rhaid sefydlu llawer o adweithiau, fe'i sefydlwyd i baratoi prif gymysgedd fel y'i gelwir yn lle pibio pob adweithydd ar wahân i bob llong.Mae cymysgeddau wedi'u ffurfweddu ymlaen llaw ar gael yn fasnachol, lle ychwanegir cydrannau sampl-benodol (primer) a dŵr yn unig.Fel arall, gall y prif gymysgedd gael ei baratoi gennych chi'ch hun.Yn y ddau amrywiad, dosberthir y cymysgedd i bob llestr PCR heb dempled ac ychwanegir y sampl DNA unigol ar wahân ar y diwedd.

Mae gan ddefnyddio prif gymysgedd sawl mantais: Yn gyntaf, mae nifer y camau pibio sengl yn cael eu lleihau.Yn y modd hwn, mae'r risg o gamgymeriadau defnyddwyr yn ystod pibellau a'r risg o halogiad yn cael eu lleihau ac, wrth gwrs, mae amser yn cael ei arbed.Mewn egwyddor, mae cywirdeb pibio hefyd yn uwch, gan fod cyfeintiau mwy yn cael eu dosio.Mae hyn yn hawdd i'w ddeall wrth wirio data technegol pibedau: Po leiaf yw'r cyfaint dosio, yr uchaf y gall y gwyriadau fod .Mae'r ffaith bod yr holl baratoadau'n dod o'r un llestr yn cael effaith gadarnhaol ar homogenedd (os caiff ei gymysgu'n dda).Mae hyn hefyd yn gwella atgynhyrchu'r arbrofion.

Wrth baratoi'r prif gymysgedd, dylid ychwanegu o leiaf 10% o gyfaint ychwanegol (ee os oes angen 10 paratoad, cyfrifwch ar sail 11), fel bod hyd yn oed y llong olaf wedi'i llenwi'n iawn.Yn y modd hwn, gellir gwneud iawn am wallau pibio (mân), ac effaith colli sampl wrth ddosio toddiannau sy'n cynnwys glanedydd.Mae glanedyddion wedi'u cynnwys mewn hydoddiannau ensymau fel polymerasau a chymysgeddau meistr, gan achosi ffurfio ewyn a gweddillion ar wyneb mewnol arferolawgrymiadau pibed.

Yn dibynnu ar y cais a'r math o hylif sydd i'w ddosbarthu, dylid dewis y dechneg pibio gywir (1) a dewis yr offer priodol.Ar gyfer toddiannau sy'n cynnwys glanedyddion, argymhellir system dadleoli uniongyrchol neu'r awgrymiadau pibed “cadw isel” fel y'u gelwir fel dewis amgen ar gyfer pibedau clustog aer.Mae effaithtip PIPETTE ACEyn seiliedig ar arwyneb arbennig o hydroffobig.Nid yw hylifau sy'n cynnwys glanedyddion yn gadael ffilm weddillion ar y tu mewn a'r tu allan, fel y gellir lleihau colli hydoddiant.

Heblaw am union ddosio'r holl gydrannau, mae hefyd yn bwysig nad yw'r paratoadau'n cael eu halogi.Nid yw'n ddigon defnyddio nwyddau traul purdeb uchel, oherwydd gall y broses bipio mewn pibed clustog aer gynhyrchu aerosolau sy'n aros yn y pibed.Gellir trosglwyddo'r DNA a all fod yn yr aerosol o un sampl i'r llall yn y cam pibio canlynol a thrwy hynny arwain at halogiad.Gall y systemau dadleoli uniongyrchol a grybwyllwyd uchod hefyd leihau'r risg hon.Ar gyfer pibedau clustog aer mae'n gwneud synnwyr defnyddio blaenau ffilter i amddiffyn côn y pibed trwy gadw sblashiau, aerosolau a biomoleciwlau.


Amser post: Rhag-06-2022