Kini o yẹ ki a gbero nigbati Pipetting PCR Mixtures?

Fun awọn aati imudara aṣeyọri, o jẹ dandan pe awọn paati ifọkansi kọọkan wa ni ifọkansi ti o pe ni igbaradi kọọkan.Ni afikun, o jẹ pataki wipe ko si koto waye.

Paapa nigbati ọpọlọpọ awọn aati ni lati ṣeto, o ti fi idi mulẹ lati mura ohun ti a pe ni illa titunto si dipo pipe pipe reagenti kọọkan lọtọ sinu ọkọ oju-omi kọọkan.Awọn apopọ ti a ti tunto tẹlẹ wa ni iṣowo, ninu eyiti awọn paati pato-apejuwe (alakoko) ati omi ti wa ni afikun.Ni omiiran, adapọ titunto si le ṣee pese nipasẹ ararẹ.Ninu awọn iyatọ mejeeji, a pin adalu si ọkọ oju-omi PCR kọọkan laisi awoṣe kan ati pe a ṣafikun ayẹwo DNA kọọkan lọtọ ni ipari.

Lilo akojọpọ titunto si ni awọn anfani pupọ: Ni akọkọ, nọmba awọn igbesẹ pipetting ẹyọkan ti dinku.Ni ọna yii, mejeeji eewu ti awọn aṣiṣe olumulo lakoko pipetting ati eewu ti idoti ti dinku ati, nitorinaa, akoko ti wa ni fipamọ.Ni ipilẹ, deede pipetting tun ga julọ, niwọn igba ti awọn iwọn nla ti jẹ iwọn lilo.Eyi rọrun lati ni oye nigbati o ṣayẹwo data imọ-ẹrọ ti awọn pipettes: Ti o kere si iwọn iwọn lilo, ti o ga julọ awọn iyapa le jẹ.Otitọ pe gbogbo awọn igbaradi lati inu ọkọ oju omi kanna ni ipa rere lori isokan (ti o ba dapọ daradara).Eyi tun ṣe atunṣe atunṣe ti awọn adanwo.

Nigbati o ba ngbaradi akojọpọ titunto si, o kere ju 10% afikun iwọn didun yẹ ki o ṣafikun (fun apẹẹrẹ ti awọn igbaradi 10 ba nilo, ṣe iṣiro lori ipilẹ ti 11), nitorinaa paapaa ọkọ oju-omi ti o kẹhin ti o kun daradara.Ni ọna yii, (diẹ) awọn aiṣedeede pipetting, ati ipa ti ipadanu ayẹwo nigbati iwọn lilo awọn ojutu ti o ni awọn ohun elo le jẹ isanpada.Awọn olutọpa wa ninu awọn solusan henensiamu gẹgẹbi awọn polymerases ati awọn apopọ titunto si, nfa dida foomu ati awọn iṣẹku lori inu inu ti deede.pipette awọn italolobo.

Ti o da lori ohun elo ati iru omi lati pin, ilana pipetting ti o pe (1) yẹ ki o yan ati ohun elo ti o yẹ.Fun awọn solusan ti o ni awọn ifọṣọ, eto gbigbe taara tabi ohun ti a pe ni “idaduro kekere” awọn imọran pipette bi yiyan fun awọn pipette timutimu afẹfẹ ni a ṣe iṣeduro.Ipa tiACE PIPETTE sampleti wa ni da lori kan paapa hydrophobic dada.Awọn olomi ti o ni awọn ohun mimu ko fi fiimu ti o ku silẹ ni inu ati ita, ki isonu ti ojutu le dinku.

Yato si iwọn lilo deede ti gbogbo awọn paati, o tun ṣe pataki pe ko si ibajẹ ti awọn igbaradi waye.Ko to lati lo awọn ohun elo ti mimọ giga, nitori ilana pipetting ninu pipette timutimu afẹfẹ le ṣe awọn aerosols ti o ku ninu pipette.DNA ti o le wa ninu aerosol ni a le gbe lati apẹẹrẹ kan si ekeji ni igbesẹ pipetting ti o tẹle ati nitorinaa yori si ibajẹ.Awọn ọna gbigbe taara ti a mẹnuba loke le tun dinku eewu yii.Fun awọn pipette timutimu afẹfẹ o jẹ oye lati lo awọn imọran àlẹmọ lati daabobo konu pipette nipa didimu awọn splashes, aerosols, ati biomolecules.


Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu kejila-06-2022