Le haghaidh imoibrithe aimpliúcháin rathúla, is gá go mbeadh na comhpháirteanna imoibrithe aonair i láthair sa tiúchan ceart i ngach ullmhúchán.Ina theannta sin, tá sé tábhachtach nach dtarlóidh aon éilliú.
Go háirithe nuair is gá go leor frithghníomhartha a shocrú, tá sé bunaithe chun máistir-mheascán mar a thugtar air a ullmhú in ionad gach imoibrí a phíobáil ar leithligh isteach i ngach soitheach.Tá meascáin réamhchumraithe ar fáil ar bhonn tráchtála, agus ní chuirtear ach comhpháirteanna a bhaineann go sonrach le samplaí (primer) agus uisce leis.De rogha air sin, is féidir an máistir-mheascán a ullmhú leat féin.Sa dá leagan, déantar an meascán a dháileadh ar gach soitheach PCR gan teimpléad agus cuirtear an sampla DNA aonair leis féin ag an deireadh.
Tá roinnt buntáistí ag baint le húsáid máistir-mheascán: Ar dtús, laghdaítear líon na gcéimeanna píbéireachta aonair.Ar an mbealach seo, íoslaghdaítear an baol earráidí úsáideora le linn píobaireachta agus an baol éillithe agus, ar ndóigh, sábhálfar am.I bprionsabal, tá cruinneas an phíbéireachta níos airde freisin, ós rud é go ndéantar méideanna níos mó a dháileadh.Is furasta é seo a thuiscint agus sonraí teicniúla na bpípéad á seiceáil: Dá lú an méid dáileog, is airde is féidir na diallais a bheith .Tá éifeacht dhearfach ag an bhfíric go dtagann na hullmhúcháin go léir ón soitheach céanna ar aonchineálacht (má measctha go maith).Feabhsaíonn sé seo in-atáirgtheacht na dturgnamh freisin.
Agus an máistir-mheascán á ullmhú, ba cheart ar a laghad 10 % de thoirt breise a chur leis (eg má tá 10 n-ullmhú ag teastáil, ríomh ar bhonn 11), ionas go líontar fiú an soitheach deiridh i gceart.Ar an mbealach seo, is féidir míchruinneas píbéireachta (beag), agus éifeacht an chaillteanais sampla nuair a dhéantar réitigh ina bhfuil glantach a dháileadh a chúiteamh.Tá glantaigh i dtuaslagáin einsíme mar pholaiméiráis agus máistir-mheascáin, rud is cúis le foirmiú cúr agus iarmhair ar an dromchla istigh de ghnáth.leideanna pípéad.
Ag brath ar an iarratas agus ar an gcineál leachta a bheidh le dáileadh, ba cheart an teicníc cheart píopaithe (1) a roghnú agus an trealamh cuí a roghnú.Maidir le réitigh ina bhfuil glantaigh, moltar córas díláithrithe díreach nó leideanna pípéad “coimeád íseal” mar mhalairt ar phípéid aer-mhaolú.Éifeacht naLeid ACE PIPETTEbunaithe ar dhromchla go háirithe hidreafóbach.Ní fhágann leachtanna ina bhfuil glantaigh scannán iarmhar ar an taobh istigh agus lasmuigh, ionas gur féidir an caillteanas réitigh a íoslaghdú.
Seachas dáileog cruinn na gcomhpháirteanna go léir, tá sé tábhachtach freisin nach dtarlóidh aon éilliú ar na hullmhúcháin.Ní leor earraí inchaite ardíonachta a úsáid, mar is féidir leis an bpróiseas pípéadaithe i bpípéad mhaolú aer aerasóil a fhanann sa phípéad a tháirgeadh.Is féidir an DNA a d’fhéadfadh a bheith san aerasól a aistriú ó shampla amháin go dtí an chéad sampla eile sa chéim phíopála seo a leanas agus mar sin éilliú a bheith mar thoradh air.Féadfaidh na córais díláithrithe díreacha thuasluaite an riosca seo a íoslaghdú freisin.Maidir le pípéid aer-mhaolúine is ciall leideanna scagaire a úsáid chun an cón pípéad a chosaint trí splancscáileán, aerasóil agus bithmhóilíní a choinneáil.
Am postála: Dec-06-2022