ສິ່ງທີ່ຄວນພິຈາລະນາໃນເວລາທີ່ Pipetting PCR Mixtures?

ສໍາລັບປະຕິກິລິຍາການຂະຫຍາຍທີ່ປະສົບຜົນສໍາເລັດ, ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ອົງປະກອບຂອງຕິກິຣິຍາສ່ວນບຸກຄົນແມ່ນມີຢູ່ໃນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ຖືກຕ້ອງໃນແຕ່ລະການກະກຽມ.ນອກຈາກນັ້ນ, ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ບໍ່ມີການປົນເປື້ອນເກີດຂື້ນ.

ໂດຍສະເພາະໃນເວລາທີ່ປະຕິກິລິຍາຈໍານວນຫຼາຍຕ້ອງໄດ້ຮັບການສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນ, ມັນໄດ້ຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນເພື່ອກະກຽມອັນທີ່ເອີ້ນວ່າການຜະສົມຜະສານຕົ້ນສະບັບແທນທີ່ຈະເປັນທໍ່ແຕ່ລະ reagent ແຍກຕ່າງຫາກເຂົ້າໄປໃນແຕ່ລະເຮືອ.ເຄື່ອງປະສົມທີ່ກຳນົດຄ່າໄວ້ລ່ວງໜ້າແມ່ນມີຢູ່ທາງການຄ້າ, ເຊິ່ງມີພຽງສ່ວນປະກອບສະເພາະຕົວຢ່າງ (primer) ແລະ ນ້ຳເທົ່ານັ້ນທີ່ຖືກເພີ່ມ.ອີກທາງເລືອກ, ການປະສົມຕົ້ນສະບັບສາມາດກະກຽມດ້ວຍຕົວທ່ານເອງ.ໃນທັງສອງ variants, ປະສົມໄດ້ຖືກແຈກຢາຍໃຫ້ແຕ່ລະເຮືອ PCR ໂດຍບໍ່ມີແມ່ແບບແລະຕົວຢ່າງ DNA ສ່ວນບຸກຄົນຈະຖືກເພີ່ມແຍກຕ່າງຫາກໃນຕອນທ້າຍຂອງ.

ການນໍາໃຊ້ຕົ້ນສະບັບປະສົມມີຂໍ້ດີຫຼາຍ: ທໍາອິດ, ຈໍານວນຂອງຂັ້ນຕອນທໍ່ທໍ່ດຽວແມ່ນຫຼຸດລົງ.ດ້ວຍວິທີນີ້, ທັງສອງຄວາມສ່ຽງຂອງຄວາມຜິດພາດຂອງຜູ້ໃຊ້ໃນລະຫວ່າງການວາງທໍ່ແລະຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການປົນເປື້ອນແມ່ນຫນ້ອຍລົງແລະແນ່ນອນ, ເວລາຈະຖືກປະຫຍັດ.ໃນຫຼັກການ, ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງທໍ່ແມ່ນສູງກວ່າ, ເພາະວ່າປະລິມານທີ່ໃຫຍ່ກວ່າແມ່ນ dosed.ນີ້ແມ່ນງ່າຍທີ່ຈະເຂົ້າໃຈໃນເວລາທີ່ການກວດສອບຂໍ້ມູນດ້ານວິຊາການຂອງ pipettes: ປະລິມານປະລິມານຢາຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ, ການ deviations ສູງສາມາດເປັນ.ຄວາມຈິງທີ່ວ່າການກະກຽມທັງຫມົດແມ່ນມາຈາກເຮືອດຽວກັນມີຜົນກະທົບທາງບວກຕໍ່ຄວາມສາມັກຄີ (ຖ້າປະສົມດີ).ນີ້ຍັງປັບປຸງການສືບພັນຂອງການທົດລອງ.

ໃນ​ເວ​ລາ​ທີ່​ການ​ກະ​ກຽມ​ການ​ປະ​ສົມ​ແມ່​ບົດ​, ຢ່າງ​ຫນ້ອຍ 10 % ປະ​ລິ​ມານ​ພິ​ເສດ​ຄວນ​ຈະ​ໄດ້​ຮັບ​ການ​ເພີ່ມ (ເຊັ່ນ​: ຖ້າ​ຫາກ​ວ່າ​ການ​ກະ​ກຽມ 10 ຕ້ອງ​ການ​ຄິດ​ໄລ່​ບົນ​ພື້ນ​ຖານ​ຂອງ 11​)​, ດັ່ງ​ນັ້ນ​ເຖິງ​ແມ່ນ​ວ່າ​ເຮືອ​ສຸດ​ທ້າຍ​ເຕັມ​ໄປ​ຢ່າງ​ຖືກ​ຕ້ອງ​.ດ້ວຍວິທີນີ້, ຄວາມບໍ່ຖືກຕ້ອງຂອງທໍ່ທໍ່ (ເລັກນ້ອຍ), ແລະຜົນກະທົບຂອງການສູນເສຍຕົວຢ່າງເມື່ອໃຊ້ຢາແກ້ບັນຫາທີ່ມີສານຊັກຟອກສາມາດຊົດເຊີຍໄດ້.ຜົງຊັກຟອກມີຢູ່ໃນການແກ້ໄຂ enzyme ເຊັ່ນ: polymerases ແລະຜະສົມຜະສານຕົ້ນສະບັບ, ເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດການສ້າງໂຟມແລະສານຕົກຄ້າງຢູ່ດ້ານໃນຂອງປົກກະຕິ.ຄໍາແນະນໍາ pipette.

ອີງຕາມຄໍາຮ້ອງສະຫມັກແລະປະເພດຂອງແຫຼວທີ່ຈະແຈກຢາຍ, ຄວນເລືອກເຕັກນິກການທໍ່ທີ່ຖືກຕ້ອງ (1) ແລະອຸປະກອນທີ່ເຫມາະສົມ.ສໍາລັບການແກ້ໄຂທີ່ມີສານຊັກຟອກ, ລະບົບການໂຍກຍ້າຍໂດຍກົງຫຼືອັນທີ່ເອີ້ນວ່າຄໍາແນະນໍາ pipette "ການເກັບຮັກສາຕ່ໍາ" ເປັນທາງເລືອກສໍາລັບ pipettes ຜ້າອາກາດແມ່ນແນະນໍາໃຫ້.ຜົນກະທົບຂອງປາຍ ACE PIPETTEແມ່ນອີງໃສ່ພື້ນຜິວ hydrophobic ໂດຍສະເພາະ.ທາດແຫຼວທີ່ບັນຈຸມີສານຊັກຟອກບໍ່ໄດ້ປະໄວ້ເປັນຮູບເງົາທີ່ຕົກຄ້າງຢູ່ພາຍໃນ ແລະ ພາຍນອກ, ດັ່ງນັ້ນການສູນເສຍການແກ້ໄຂສາມາດຫຼຸດລົງໄດ້ໜ້ອຍທີ່ສຸດ.

ນອກ ເໜືອ ໄປຈາກປະລິມານຢາທີ່ແນ່ນອນຂອງສ່ວນປະກອບທັງ ໝົດ, ມັນຍັງມີຄວາມ ສຳ ຄັນທີ່ຈະບໍ່ມີການປົນເປື້ອນຂອງການກະກຽມ.ມັນບໍ່ພຽງພໍທີ່ຈະໃຊ້ເຄື່ອງບໍລິໂພກທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງ, ເພາະວ່າຂະບວນການທໍ່ທໍ່ຢູ່ໃນທໍ່ລະບາຍອາກາດສາມາດຜະລິດ aerosols ທີ່ຍັງຄົງຢູ່ໃນທໍ່.DNA ທີ່ອາດຈະບັນຈຸຢູ່ໃນ aerosol ສາມາດຖືກໂອນຈາກຕົວຢ່າງຫນຶ່ງໄປຫາຕົວຕໍ່ໄປໃນຂັ້ນຕອນທໍ່ຕໍ່ໄປນີ້ແລະດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງນໍາໄປສູ່ການປົນເປື້ອນ.ລະບົບການຍົກຍ້າຍໂດຍກົງທີ່ໄດ້ກ່າວມາຂ້າງເທິງອາດຈະຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງນີ້.ສໍາລັບທໍ່ລະບາຍອາກາດ, ມັນສົມເຫດສົມຜົນທີ່ຈະໃຊ້ຄໍາແນະນໍາການກັ່ນຕອງເພື່ອປົກປ້ອງກວຍ pipette ໂດຍການເກັບຮັກສາ splashes, aerosols, ແລະ biomolecules.


ເວລາປະກາດ: ວັນທີ 06-06-2022