यशस्वी प्रवर्धन प्रतिक्रियांसाठी, प्रत्येक तयारीमध्ये वैयक्तिक प्रतिक्रिया घटक योग्य एकाग्रतेमध्ये उपस्थित असणे आवश्यक आहे.याव्यतिरिक्त, हे महत्वाचे आहे की कोणतेही प्रदूषण होत नाही.
विशेषत: जेव्हा अनेक प्रतिक्रिया सेट-अप कराव्या लागतात, तेव्हा प्रत्येक पात्रामध्ये प्रत्येक अभिकर्मक स्वतंत्रपणे पाईप टाकण्याऐवजी तथाकथित मास्टर मिक्स तयार करण्याची स्थापना केली गेली आहे.पूर्व-कॉन्फिगर केलेले मिश्रण व्यावसायिकरित्या उपलब्ध आहेत, ज्यामध्ये केवळ नमुना-विशिष्ट घटक (प्राइमर) आणि पाणी जोडले जातात.वैकल्पिकरित्या, मास्टर मिक्स स्वतः तयार केले जाऊ शकते.दोन्ही प्रकारांमध्ये, मिश्रण प्रत्येक पीसीआर भांड्यात टेम्पलेटशिवाय वितरित केले जाते आणि शेवटी वैयक्तिक डीएनए नमुना स्वतंत्रपणे जोडला जातो.
मास्टर मिक्स वापरण्याचे अनेक फायदे आहेत: प्रथम, सिंगल पाइपिंग चरणांची संख्या कमी केली जाते.अशा प्रकारे, पाइपिंग दरम्यान वापरकर्त्याच्या त्रुटींचा धोका आणि दूषित होण्याचा धोका दोन्ही कमी केला जातो आणि अर्थातच, वेळ वाचतो.तत्त्वानुसार, पाईपिंगची अचूकता देखील जास्त आहे, कारण मोठ्या प्रमाणात डोस केले जाते.पिपेट्सचा तांत्रिक डेटा तपासताना हे समजणे सोपे आहे: डोसचे प्रमाण जितके लहान असेल तितके विचलन जास्त असू शकते.सर्व तयारी एकाच भांड्यातून येतात या वस्तुस्थितीमुळे एकजिनसीपणावर सकारात्मक परिणाम होतो (जर चांगले मिसळले तर).हे प्रयोगांची पुनरुत्पादनक्षमता देखील सुधारते.
मास्टर मिक्स तयार करताना, कमीतकमी 10% अतिरिक्त व्हॉल्यूम जोडणे आवश्यक आहे (उदा. 10 तयारी आवश्यक असल्यास, 11 च्या आधारे गणना करा), जेणेकरून शेवटचे भांडे देखील योग्यरित्या भरले जाईल.अशा प्रकारे, (किंचित) पाइपिंग चुकीची, आणि डिटर्जंट-युक्त सोल्यूशन्स डोस करताना नमुना गमावण्याच्या परिणामाची भरपाई केली जाऊ शकते.पॉलिमरेसेस आणि मास्टर मिक्स सारख्या एन्झाइम सोल्युशन्समध्ये डिटर्जंट असतात, ज्यामुळे सामान्यच्या आतील पृष्ठभागावर फोम तयार होतो आणि अवशेष होतात.पिपेट टिपा.
अर्ज आणि वितरीत केल्या जाणार्‍या द्रवाच्या प्रकारावर अवलंबून, योग्य पाइपिंग तंत्र (1) निवडले पाहिजे आणि योग्य उपकरणे निवडली पाहिजेत.डिटर्जंट्स असलेल्या सोल्यूशन्ससाठी, डायरेक्ट डिस्प्लेसमेंट सिस्टम किंवा एअर-कुशन पिपेट्सला पर्याय म्हणून तथाकथित "लो रिटेन्शन" विंदुक टिपांची शिफारस केली जाते.चा प्रभावACE PIPETTE टीपविशेषतः हायड्रोफोबिक पृष्ठभागावर आधारित आहे.डिटर्जंट्स असलेले द्रव आत आणि बाहेर एक अवशेष फिल्म सोडत नाहीत, जेणेकरून द्रावणाचे नुकसान कमी करता येईल.
सर्व घटकांच्या अचूक डोस व्यतिरिक्त, हे देखील महत्वाचे आहे की तयारीचे कोणतेही प्रदूषण होत नाही.उच्च शुद्धतेच्या उपभोग्य वस्तूंचा वापर करणे पुरेसे नाही, कारण एअर कुशन विंदुकातील पाइपटिंग प्रक्रियेमुळे पिपेटमध्ये राहून एरोसोल तयार होऊ शकतात.एरोसोलमध्ये समाविष्ट असलेले डीएनए खालील पाइपिंग चरणात एका नमुन्यातून दुसऱ्या नमुन्यात हस्तांतरित केले जाऊ शकते आणि त्यामुळे दूषित होऊ शकते.वर नमूद केलेल्या थेट विस्थापन प्रणाली देखील हा धोका कमी करू शकतात.एअर-कुशन पिपेट्ससाठी, स्प्लॅश, एरोसोल आणि बायोमोलेक्यूल्स राखून पिपेट शंकूचे संरक्षण करण्यासाठी फिल्टर टिप्स वापरणे अर्थपूर्ण आहे.
पोस्ट वेळ: डिसेंबर-०६-२०२२