5 enkle tips til at forhindre fejl ved arbejde med PCR-plader

Polymerasekædereaktioner (PCR) er en af ​​de mest kendte metoder, der anvendes i life science-laboratorier.

PCR-pladerne er fremstillet af førsteklasses plast for fremragende behandling og analyse af prøver eller indsamlede resultater.

De har tynde og homogene vægge for at give præcis varmeoverførsel.

Som forberedelse til realtidsapplikationer isoleres og opbevares små sektioner af DNA eller RNA i PCR-plader.

PCR-pladerne er yderst effektive til varmeforsegling og begrænser også varmestrømmen.

Men selvom PCR-pladerne er effektive og pålidelige, opstår der let fejl og unøjagtigheder under behandling af prøver.

Derfor, hvis du er interesseret i at få en god og høj kvalitetPCR-plader.Det er ideelt at kontakte en pålidelig producent af PCR-plader. Med dette er du sikret den bedste aftale.

Her er nogle forholdsregler, der skal følges for at undgå kontaminering af reagenser eller prøver og forhindre unøjagtigheder i at snige sig ind i resultaterne.

Sterilisering af omgivelserne
Forkerte positive eller negative resultater opstår på grund af tilstedeværelsen af ​​urenheder, hvilket får dig til at tvivle på resultaterne.

Urenheder og forurenende stoffer forekommer i forskellige former, såsom uafhængigt DNA eller kemiske tilsætningsstoffer, som i sidste ende mindsker reaktionens effektivitet og virkningsfuldhed.

Der er adskillige måder at reducere kontamineringsraten af ​​PCR-pladen betydeligt.

Brug af steriliserede filterspidser er en anden nyttig måde at forhindre urenheder i at snige sig ind i dine prøver gennem pipetterne.

Brug et fuldstændig rent sæt udstyr, bestående af pipetter og stativer, udelukkende til brug for PCR. Dette vil garantere minimal overførsel af urenheder eller forurenende stoffer rundt i laboratoriet.

Brug blegemidler og ethanol på pipetter, stativer og bænke til at fjerne forurenende stoffer.

Afsæt en reserveret plads til alle dine PCR-reaktioner for yderligere at minimere partikelkontaminering.

Brug rene handsker ved hvert trin, og udskift dem ofte.

PCR-plader
Undersøg skabelonens koncentration og renhed.
Renligheden af ​​bænken og det udstyr, der anvendes ved analyse af prøver med PCR, bør opretholdes. Det er vigtigt at validere prøvernes renhed før analyse og behandling.

Generelt tager analysatorer hensyn til koncentrationen og renhedsniveauet af DNA-prøverne.

Forholdet mellem absorbans og 260 nm/280 nm må ikke være mindre end 1,8. Der anvendes efterfølgende bølgelængder mellem 230 nm og 320 nm til at identificere urenheder.

I et tilfælde detekteres chaotropiske salte og andre organiske forbindelser ved en absorbanshastighed på 230 nm. Mens turbiditet i DNA-prøver også detekteres og verificeres ved en absorbanshastighed på 320 nm.

Undgå at overfylde PCR-pladerne med produkt
Selvom det er ønskeligt at køre flere produkter samtidigt, resulterer det i krydskontaminering af PCR-pladerne.

Overbelastning af PCR-pladerne med forskellige produkter er spild og gør det ekstremt vanskeligt at fastslå prøverne.

Hold styr på alikvot-PCR-reagenser
Kontinuerlige fryse-/optøningscyklusser og hyppig brug af aliquot kan beskadige PCR-reagenser, enzymer og DNTP'er gennem omkrystallisation.

Besøg altid at overvåge den anvendte aliquothastighed, når du forbereder prøver, der skal analyseres.

LIMS er foretrukkent mere egnet til at kontrollere lagerbeholdningen og mængden af ​​reagenser og prøver, der er frosset eller optøet.

Vælg den bedste udglødningstemperatur.
At vælge og bruge den forkerte udglødningstemperatur er endnu en metode, hvor PCR-resultater indeholder fejl.

Nogle gange går reaktionen ikke som planlagt. Det er ønskeligt at reducere udglødningstemperaturen for at fremme en vellykket reaktion.

Imidlertid øger sænkning af temperaturen risikoen for falske positiver og forekomst af primerdimerer.

Det er vigtigt at bekræfte analysen af ​​smeltekurven, når PCR-pladerne anvendes, da det er en god indikator for valg af den korrekte udglødningstemperatur.

Primerdesignsoftware hjælper med design og levering af den rigtige udglødningstemperatur, hvilket direkte reducerer fejl i PCR-pladerne.

Har du brug for en PCR-plade af høj kvalitet?
Hvis du har overvejet, hvor du kan finde en pålidelig producent afPCR-pladerSøg ikke længere, for du er kommet til det rette sted.

Venligstklik her for at kontakte osfor produkter og service af høj kvalitet til en pris, der ikke sprænger budgettet.


Opslagstidspunkt: 30. oktober 2021