பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினைகள் (PCR) என்பது உயிரியல் ஆய்வகங்களில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் முறைகளில் ஒன்றாகும்.
மாதிரிகள் அல்லது சேகரிக்கப்பட்ட முடிவுகளின் சிறந்த செயலாக்கம் மற்றும் பகுப்பாய்விற்காக PCR தகடுகள் முதல் தர பிளாஸ்டிக்குகளிலிருந்து தயாரிக்கப்படுகின்றன.
துல்லியமான வெப்ப பரிமாற்றத்தை வழங்க அவை மெல்லிய மற்றும் ஒரே மாதிரியான சுவர்களைக் கொண்டுள்ளன.
நிகழ்நேர பயன்பாடுகளுக்கான தயாரிப்பில், டி.என்.ஏ அல்லது ஆர்.என்.ஏவின் நுணுக்கமான பகுதி தனிமைப்படுத்தப்பட்டு பி.சி.ஆர் தகடுகளில் சேமிக்கப்படுகிறது.
PCR தகடுகள் வெப்ப சீலிங்கில் மிகவும் திறமையானவை மற்றும் வெப்ப ஓட்டத்தையும் கட்டுப்படுத்துகின்றன.
இருப்பினும், PCR தகடுகள் பயனுள்ளதாகவும் நம்பகமானதாகவும் இருப்பதால், மாதிரிகளைச் செயலாக்கும்போது பிழைகள் மற்றும் துல்லியமின்மைகள் எளிதில் மறைந்துவிடும்.
எனவே, நீங்கள் ஒரு நல்ல மற்றும் உயர் தரத்தைப் பெற ஆர்வமாக இருந்தால்PCR தகடுகள்.நம்பகமான PCR தகடு உற்பத்தியாளரைத் தொடர்புகொள்வது சிறந்தது. இதன் மூலம் நீங்கள் சிறந்த ஒப்பந்தத்தைப் பெறுவது உறுதி.
வினைப்பொருட்கள் அல்லது மாதிரிகள் மாசுபடுவதைத் தவிர்க்கவும், முடிவுகளில் தவறுகள் ஊடுருவுவதைத் தடுக்கவும் பின்பற்ற வேண்டிய சில முன்னெச்சரிக்கைகள் இங்கே.
சுற்றுப்புறங்களை கிருமி நீக்கம் செய்தல்
தவறான நேர்மறைகள் அல்லது எதிர்மறைகள் அசுத்தங்கள் இருப்பதால் ஏற்படுகின்றன, இது முடிவுகளை சந்தேகிக்க வைக்கிறது.
தொடர்பில்லாத டி.என்.ஏ அல்லது வேதியியல் சேர்க்கைகள் போன்ற பல்வேறு வடிவங்களில் அசுத்தங்கள் மற்றும் மாசுபாடுகள் ஏற்படுகின்றன, இது இறுதியில் வினையின் செயல்திறனையும் செயல்திறனையும் குறைக்கிறது.
PCR தகட்டின் மாசுபாட்டின் விகிதத்தை வெகுவாகக் குறைக்க ஏராளமான வழிகள் உள்ளன.
கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்ட வடிகட்டி முனைகளைப் பயன்படுத்துவது, பைப்பெட்டுகள் வழியாக உங்கள் மாதிரிகளில் அசுத்தங்கள் ஊடுருவுவதைத் தடுக்க மற்றொரு பயனுள்ள வழியாகும்.
PCR பயன்பாட்டிற்காக பிரத்தியேகமாக பைப்பெட்டுகள் மற்றும் ரேக்குகளைக் கொண்ட முற்றிலும் சுத்தமான உபகரணங்களை ஒதுக்குங்கள். இது ஆய்வகத்தைச் சுற்றி அசுத்தங்கள் அல்லது மாசுபாடுகள் மிகக் குறைவாகவே மாற்றப்படுவதை உறுதி செய்யும்.
அசுத்தங்களைத் துடைக்க பைப்பெட்டுகள், ரேக்குகள் மற்றும் பெஞ்சுகளில் ப்ளீச்கள், எத்தனால் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தவும்.
துகள் மாசுபாட்டை மேலும் குறைக்க உங்கள் அனைத்து PCR எதிர்வினைகளுக்கும் ஒதுக்கப்பட்ட இடத்தை ஒதுக்குங்கள்.
ஒவ்வொரு அடியிலும் சுத்தமான கையுறைகளைப் பயன்படுத்துங்கள், அவற்றை அடிக்கடி மாற்றவும்.
PCR தகடுகள்
வார்ப்புருவின் செறிவு மற்றும் தூய்மையை ஆய்வு செய்யவும்.
PCR மூலம் மாதிரிகளை பகுப்பாய்வு செய்யும் போது பயன்படுத்தப்படும் பெஞ்ச் மற்றும் உபகரணங்களின் தூய்மை பராமரிக்கப்பட வேண்டும். பகுப்பாய்வு மற்றும் செயலாக்கத்திற்கு முன் மாதிரிகளின் தூய்மையின் அளவை சரிபார்க்க வேண்டியது அவசியம்.
பொதுவாக, பகுப்பாய்விகள் டிஎன்ஏ மாதிரிகளின் செறிவு மற்றும் தூய்மை அளவைக் கருத்தில் கொள்கின்றன.
260nm/280nm க்கு உறிஞ்சுதல் விகிதம் 1.8 க்கும் குறைவாக இருக்கக்கூடாது. 230nm மற்றும் 320nm க்கு இடையிலான அலைநீளம் அசுத்தங்களை அடையாளம் காண பயன்படுத்தப்படுகிறது.
ஒரு சந்தர்ப்பத்தில், கேயோட்ரோபிக் உப்புகள் மற்றும் பிற கரிம சேர்மங்கள் 230nm உறிஞ்சுதல் விகிதத்தில் கண்டறியப்படுகின்றன. அதே நேரத்தில் DNA மாதிரிகளில் உள்ள கொந்தளிப்பு 320nm உறிஞ்சுதல் விகிதத்தில் கண்டறியப்பட்டு சரிபார்க்கப்படுகிறது.
தயாரிப்புடன் PCR தகடுகளை ஓவர்லோட் செய்வதைத் தவிர்க்கவும்.
ஒரே நேரத்தில் பல தயாரிப்புகளை இயக்க விரும்பினாலும், அது PCR தகடுகளின் குறுக்கு-மாசுபாட்டிற்கு வழிவகுக்கிறது.
PCR தகடுகளில் வெவ்வேறு பொருட்களின் கழிவுகளை அதிகமாக ஏற்றுவதால் மாதிரிகளைக் கண்டறிவது மிகவும் கடினமாகிறது.
அலிகோட் PCR வினைப்பொருட்களின் பதிவுகளை வைத்திருங்கள்.
தொடர்ச்சியான உறைதல்/உருகுதல் சுழற்சிகள் மற்றும் அடிக்கடி மதுபானங்களைப் பயன்படுத்துதல் ஆகியவை மறுபடிகமாக்கல் மூலம் PCR வினைப்பொருட்கள், நொதிகள் மற்றும் DNTP களை சேதப்படுத்தக்கூடும்.
பகுப்பாய்வு செய்ய மாதிரிகளைத் தயாரிக்கும்போது பயன்படுத்தப்படும் அலிகோட்டின் விகிதத்தை எப்போதும் கண்காணிக்க முயற்சிக்கவும்.
சரக்குகளைக் கட்டுப்படுத்தவும், உறைந்த அல்லது உருகிய வினைப்பொருட்கள் மற்றும் மாதிரிகளின் அளவைக் கட்டுப்படுத்தவும் விரும்பத்தக்க LIMS மிகவும் பொருத்தமானது.
சிறந்த அனீலிங் வெப்பநிலையைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்.
தவறான அனீலிங் வெப்பநிலையைத் தேர்ந்தெடுத்துப் பயன்படுத்துவது PCR முடிவுகளில் பிழையைக் கொண்டிருக்கும் மற்றொரு முறையாகும்.
சில நேரங்களில், வினை திட்டமிட்டபடி நடக்காது. வெற்றிகரமான வினையை எளிதாக்குவதற்காக, அனீலிங் வெப்பநிலையைக் குறைக்க விரும்பப்படுகிறது.
இருப்பினும், வெப்பநிலையைக் குறைப்பது தவறான நேர்மறைகள் மற்றும் ப்ரைமர் டைமர்கள் தோன்றுவதற்கான வாய்ப்புகளை அதிகரிக்கிறது.
PCR தகடுகளைப் பயன்படுத்தும் போது உருகும் வளைவின் பகுப்பாய்வை உறுதிப்படுத்துவது குறிப்பிடத்தக்கது, ஏனெனில் இது சரியான அனீலிங் வெப்பநிலையைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கான ஒரு நல்ல குறிகாட்டியாகும்.
ப்ரைமர் வடிவமைப்பு மென்பொருள் வடிவமைப்பிற்கு உதவுகிறது, சரியான அனீலிங் வெப்பநிலையை வழங்குகிறது, இது PCR தகடுகளில் ஏற்படும் பிழையை நேரடியாகக் குறைக்கிறது.
உயர்தர PCR தட்டு தேவையா?
நம்பகமான உற்பத்தியாளரை எங்கே கண்டுபிடிப்பது என்று நீங்கள் யோசித்துக்கொண்டிருந்தால்PCR தகடுகள். நீங்கள் சரியான இடத்தில் இருப்பதால் இனி தேட வேண்டாம்.
தயவுசெய்துஎங்களை தொடர்பு கொள்ள இங்கே கிளிக் செய்யவும்.உயர்தர தயாரிப்புகள் மற்றும் சேவைக்காக, வங்கியை உடைக்காத விலையில்.
இடுகை நேரம்: அக்டோபர்-30-2021