Reakcje łańcuchowe polimerazy (PCR) są jedną z najpowszechniej znanych metod stosowanych w laboratoriach nauk przyrodniczych.
Płytki PCR są produkowane z najwyższej jakości tworzyw sztucznych, co zapewnia doskonałą obróbkę i analizę zebranych próbek lub wyników.
Mają cienkie i jednorodne ścianki, co zapewnia precyzyjny transfer ciepła.
W celu przygotowania do zastosowań w czasie rzeczywistym, drobne fragmenty DNA lub RNA są izolowane i przechowywane na płytkach PCR.
Płytki PCR są niezwykle skuteczne w zgrzewaniu termicznym i ograniczają przepływ ciepła.
Jednak pomimo skuteczności i niezawodności płytek PCR, podczas przetwarzania próbek łatwo o błędy i nieścisłości.
Dlatego jeśli jesteś zainteresowany otrzymaniem dobrego i wysokiej jakościPłytki PCR.Najlepiej skontaktować się z wiarygodnym producentem płytek PCR. Dzięki temu masz pewność, że otrzymasz najlepszą ofertę.
Poniżej przedstawiono środki ostrożności, które należy podjąć, aby uniknąć zanieczyszczenia odczynników lub próbek oraz zapobiec wprowadzeniu nieścisłości do wyników.
Sterylizacja otoczenia
Nieprawidłowe wyniki dodatnie lub ujemne pojawiają się z powodu obecności zanieczyszczeń, co powoduje wątpliwości co do wyników.
Zanieczyszczenia i substancje szkodliwe występują w różnych formach, np. w postaci niezwiązanego DNA lub dodatków chemicznych, które ostatecznie zmniejszają wydajność i skuteczność reakcji.
Istnieje wiele sposobów na znaczne ograniczenie ryzyka zanieczyszczenia płytki PCR.
Kolejnym skutecznym sposobem zapobiegania przedostawaniu się zanieczyszczeń do próbek przez pipety jest stosowanie sterylizowanych końcówek filtrów.
Przeznacz całkowicie czysty zestaw sprzętu, składający się z pipet i stojaków, wyłącznie do użytku PCR. Zagwarantuje to znikome przenoszenie zanieczyszczeń lub skażeń w laboratorium.
Do usuwania zanieczyszczeń z pipet, stojaków i ław należy używać wybielaczy i etanolu.
Aby jeszcze bardziej zminimalizować zanieczyszczenie cząsteczkami, wyznacz zarezerwowaną przestrzeń dla wszystkich reakcji PCR.
Używaj czystych rękawiczek na każdym kroku i często je wymieniaj.
Płytki PCR
Sprawdź stężenie i czystość matrycy.
Należy zachować czystość stołu i sprzętu używanego podczas analizy próbek metodą PCR. Przed analizą i przetwarzaniem próbek należy koniecznie sprawdzić stopień ich czystości.
Analizatory biorą zazwyczaj pod uwagę stężenie i stopień czystości próbek DNA.
Należy dążyć do tego, aby stosunek absorbancji dla 260 nm/280 nm nie był mniejszy niż 1,8. Natomiast do identyfikacji zanieczyszczeń wykorzystuje się kolejne długości fal pomiędzy 230 nm i 320 nm.
W pewnym przypadku sole chaotropowe i inne związki organiczne są wykrywane przy współczynniku absorbancji 230 nm. Natomiast zmętnienie w próbkach DNA jest również wykrywane i weryfikowane przy współczynniku absorbancji 320 nm.
Unikaj przeciążania płytek PCR produktem
Mimo że pożądane jest równoczesne testowanie wielu produktów, skutkuje to krzyżowym zanieczyszczeniem płytek PCR.
Przeładowanie płytek PCR różnymi produktami powoduje marnotrawstwo i znacznie utrudnia identyfikację próbek.
Przechowuj zapisy odczynników do PCR w alikwotach
Ciągłe cykle zamrażania/rozmrażania i częste stosowanie alikwotów może spowodować uszkodzenie odczynników PCR, enzymów i DNTP poprzez rekrystalizację.
Podczas przygotowywania próbek do analizy należy zawsze starać się monitorować szybkość podawania alikwotu.
Preferowany system LIMS jest bardziej odpowiedni do kontrolowania zapasów oraz ilości odczynników i próbek zamrażanych lub rozmrażanych.
Wybierz najlepszą temperaturę wyżarzania.
Wybór i użycie niewłaściwej temperatury wyżarzania to kolejny sposób, w jaki wyniki PCR zawierają błędy.
Czasami reakcja nie przebiega zgodnie z planem. Pożądane jest obniżenie temperatury wyżarzania w celu ułatwienia pomyślnej reakcji.
Jednak obniżenie temperatury zwiększa ryzyko otrzymania wyników fałszywie dodatnich i pojawienia się dimerów primerów.
W przypadku stosowania płytek PCR istotne jest potwierdzenie analizy krzywej topnienia, gdyż jest to dobry wskaźnik wyboru właściwej temperatury wyżarzania.
Oprogramowanie do projektowania starterów wspomaga projektowanie i zapewnia właściwą temperaturę wyżarzania, co bezpośrednio zmniejsza ryzyko błędów w płytkach PCR.
Potrzebujesz wysokiej jakości płytki PCR?
Jeśli zastanawiasz się, gdzie znaleźć niezawodnego producentaPłytki PCR. Nie szukaj dalej, bo jesteś we właściwym miejscu.
UprzejmieKliknij tutaj, aby się z nami skontaktowaćza wysokiej jakości produkty i usługi w cenie, która nie zrujnuje Twojego budżetu.
Czas publikacji: 30-paź-2021