5 eenvoudige tips om fouten te voorkomen bij het werken met PCR-platen

Polymerasekettingreacties (PCR) zijn een van de meest gebruikte methoden in laboratoria voor biowetenschappen.

De PCR-platen worden vervaardigd uit eersteklas kunststoffen voor een uitstekende verwerking en analyse van de verzamelde monsters of resultaten.

Ze hebben dunne en homogene wanden die zorgen voor een nauwkeurige warmteoverdracht.

Ter voorbereiding op real-timetoepassingen worden minuscule stukjes DNA of RNA afgezonderd en opgeslagen in PCR-platen.

De PCR-platen zijn zeer efficiënt in het hitte-sealen en beperken tevens de warmtestroom.

Maar hoe effectief en betrouwbaar de PCR-platen ook zijn, fouten en onnauwkeurigheden kunnen gemakkelijk ontstaan ​​tijdens de verwerking van de monsters.

Als u dus geïnteresseerd bent in het verkrijgen van een goede en hoogwaardigePCR-platen.Het is ideaal om contact op te nemen met een betrouwbare fabrikant van PCR-platen. Zo bent u verzekerd van de beste deal.

Hieronder staan ​​een aantal voorzorgsmaatregelen die u kunt nemen om besmetting van reagentia of monsters te voorkomen en te voorkomen dat er onnauwkeurigheden in de resultaten sluipen.

De omgeving steriliseren
Onjuiste positieve of negatieve uitslagen ontstaan ​​door de aanwezigheid van onzuiverheden, waardoor u aan de uitslag gaat twijfelen.

Onzuiverheden en verontreinigingen komen in verschillende vormen voor, bijvoorbeeld als ongerelateerd DNA of als chemische toevoegingen. Deze verminderen uiteindelijk de efficiëntie en effectiviteit van de reactie.

Er zijn talloze manieren om de besmettingsgraad van de PCR-plaat aanzienlijk te verminderen.

Het gebruik van gesteriliseerde filtertips is een andere handige manier om te voorkomen dat er onzuiverheden via de pipetten in uw monsters terechtkomen.

Gebruik een volledig schone set apparatuur, bestaande uit pipetten en rekken, uitsluitend voor PCR-gebruik. Dit garandeert een minimale overdracht van onzuiverheden of contaminanten in het laboratorium.

Gebruik bleekmiddel en ethanol op de pipetten, rekken en werkbanken om verontreinigingen weg te vegen.

Reserveer een aparte ruimte voor al uw PCR-reacties om deeltjesverontreiniging verder te minimaliseren.

Gebruik bij elke stap schone handschoenen en vervang ze regelmatig.

PCR-platen
Controleer de concentratie en zuiverheid van het sjabloon.
De reinheid van de testbank en de apparatuur die gebruikt worden bij het analyseren van monsters met PCR moet gewaarborgd blijven. Het is essentieel om de zuiverheidsgraad van de monsters te valideren vóór analyse en verwerking.

Over het algemeen houden analysers rekening met de concentratie en zuiverheid van de DNA-monsters.

De absorptieverhouding voor 260 nm/280 nm mag niet kleiner zijn dan 1,8. De volgende golflengtes tussen 230 nm en 320 nm worden gebruikt om onzuiverheden te identificeren.

In een bepaald geval worden chaotrope zouten en andere organische verbindingen gedetecteerd met een absorptiesnelheid van 230 nm. Troebelheid in DNA-monsters wordt eveneens gedetecteerd en geverifieerd bij een absorptiesnelheid van 320 nm.

Vermijd het overladen van PCR-platen met product
Hoewel het wenselijk is om meerdere producten tegelijkertijd te testen, kan dit leiden tot kruisbesmetting van de PCR-platen.

Als u de PCR-platen overlaadt met verschillende producten, leidt dit tot verspilling en wordt het extreem moeilijk om de monsters te identificeren.

Houd gegevens bij van aliquot PCR-reagentia
Continue vries-/ontdooicycli en frequent gebruik van aliquots kunnen de PCR-reagentia, enzymen en DNTP's beschadigen door herkristallisatie.

Zorg ervoor dat u altijd de hoeveelheid gebruikte aliquot controleert tijdens het voorbereiden van de te analyseren monsters.

LIMS is bij voorkeur geschikter voor controle over de inventaris en de hoeveelheid reagentia en monsters die worden ingevroren of ontdooid.

Kies de beste gloeitemperatuur.
Het kiezen en gebruiken van de verkeerde annealingtemperatuur is een andere methode die ervoor kan zorgen dat PCR-resultaten fouten bevatten.

Soms verloopt de reactie niet zoals gepland. Het is dan wenselijk de gloeitemperatuur te verlagen om een ​​succesvolle reactie te vergemakkelijken.

Het verlagen van de temperatuur vergroot echter de kans op fout-positieve resultaten en het ontstaan ​​van primerdimeren.

Het is belangrijk om de analyse van de smeltcurve te bevestigen bij gebruik van PCR-platen, omdat dit een goede indicator is voor de selectie van de juiste gloeitemperatuur.

Primerontwerpsoftware helpt bij het ontwerpen en zorgt ervoor dat de juiste gloeitemperatuur wordt ingesteld, wat direct de fouten in de PCR-platen vermindert.

Heeft u een PCR-plaat van hoge kwaliteit nodig?
Als u zich afvraagt ​​waar u een betrouwbare fabrikant vanPCR-platenZoek niet verder, want u bent op de juiste plek.

VriendelijkKlik hier om contact met ons op te nemenvoor hoogwaardige producten en service, voor een prijs die niet te hoog is.


Plaatsingstijd: 30-10-2021