Polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) ir viena no plaši pazīstamajām metodēm, ko izmanto dzīvības zinātņu laboratorijās.
PCR plāksnes ir izgatavotas no pirmklasīgas plastmasas, lai nodrošinātu izcilu paraugu vai savākto rezultātu apstrādi un analīzi.
Tām ir plānas un viendabīgas sienas, lai nodrošinātu precīzu siltuma pārnesi.
Gatavojoties reāllaika lietojumprogrammām, nelielas DNS vai RNS daļas tiek izolētas un uzglabātas PCR plāksnēs.
PCR plāksnes ir ļoti efektīvas karstuma noslēgšanā un ierobežo arī siltuma plūsmu.
Tomēr, lai arī PCR plāksnes ir efektīvas un uzticamas, paraugu apstrādes laikā viegli rodas kļūdas un neprecizitātes.
Tāpēc, ja jūs interesē iegūt labu un kvalitatīvuPCR plāksnes.Ideālā gadījumā ir sazināties ar uzticamu PCR plākšņu ražotāju. Tādā veidā jūs varat būt pārliecināti, ka saņemsiet vislabāko piedāvājumu.
Šeit ir daži piesardzības pasākumi, kas jāievēro, lai izvairītos no reaģentu vai paraugu piesārņojuma un novērstu neprecizitāšu iekļūšanu rezultātos.
Apkārtnes sterilizācija
Nepareizi pozitīvi vai negatīvi rezultāti rodas piemaisījumu klātbūtnes dēļ, kas liek apšaubīt rezultātus.
Piemaisījumi un piesārņotāji rodas dažādās formās, piemēram, nesaistītā DNS vai ķīmiskās piedevās, kas galu galā samazina reakcijas efektivitāti un lietderību.
Ir daudz veidu, kā ievērojami samazināt PCR plāksnes piesārņojuma ātrumu.
Sterilizētu filtru uzgaļu izmantošana ir vēl viens noderīgs veids, kā novērst piemaisījumu iekļūšanu paraugos caur pipetēm.
Izmantojiet pilnīgi tīru aprīkojumu, kas sastāv no pipetēm un statīviem, tikai PCR lietošanai. Tas garantēs niecīgu piemaisījumu vai kontaminantu pārnesi laboratorijā.
Pipešu, statīvu un darba virsmu tīrīšanai izmantojiet balinātājus un etanolu, lai noslaucītu piesārņotājus.
Atvēliet rezervētu vietu visām PCR reakcijām, lai vēl vairāk samazinātu daļiņu piesārņojumu.
Katrā solī izmantojiet tīrus cimdus un regulāri tos nomainiet.
PCR plāksnes
Pārbaudiet veidnes koncentrāciju un tīrību.
Analizējot paraugus ar PCR, jāuztur galda un aprīkojuma tīrība. Pirms analīzes un apstrādes ir svarīgi apstiprināt paraugu tīrības pakāpi.
Parasti analizatori ņem vērā DNS paraugu koncentrāciju un tīrības līmeni.
Centieties, lai absorbcijas attiecība 260 nm/280 nm viļņu garumā nebūtu mazāka par 1,8. Savukārt piemaisījumu identificēšanai tiek izmantoti nākamie viļņu garumi no 230 nm līdz 320 nm.
Piemēram, haotropiskie sāļi un citi organiskie savienojumi tiek noteikti ar absorbcijas ātrumu 230 nm. Savukārt DNS paraugu duļķainība tiek noteikta un pārbaudīta arī ar absorbcijas ātrumu 320 nm.
Izvairieties no PCR plākšņu pārslodzes ar produktu
Lai gan ir vēlams vienlaikus apstrādāt vairākus produktus, tas izraisa PCR plākšņu savstarpēju kontamināciju.
PCR plākšņu pārslodze ar dažādiem produktiem rada atkritumus un ārkārtīgi apgrūtina paraugu noteikšanu.
Veiciet alikvotu PCR reaģentu uzskaiti
Nepārtraukti sasaldēšanas/atkausēšanas cikli un bieža alikvotu lietošana var sabojāt PCR reaģentus, enzīmus un DNTP, tos pārkristalizējot.
Sagatavojot analizējamos paraugus, vienmēr centieties uzraudzīt izmantotās alikvotas ātrumu.
Vēlamā LIMS sistēma ir piemērotāka, lai kontrolētu krājumus un sasaldēto vai atkausēto reaģentu un paraugu daudzumu.
Izvēlieties labāko atkvēlināšanas temperatūru.
Nepareizas atkvēlināšanas temperatūras izvēle un izmantošana ir vēl viena metode, kā PCR rezultāti var saturēt kļūdas.
Dažreiz reakcija nenotiek, kā plānots. Lai veicinātu veiksmīgu reakciju, ir vēlams samazināt atkvēlināšanas temperatūru.
Tomēr temperatūras pazemināšana palielina viltus pozitīvu rezultātu un primeru dimēru parādīšanās iespējamību.
Izmantojot PCR plāksnes, ir svarīgi apstiprināt kušanas līknes analīzi, jo tas ir labs rādītājs pareizas atkvēlināšanas temperatūras izvēlei.
Gruntēšanas dizaina programmatūra palīdz projektēšanā, nodrošinot pareizu atkvēlināšanas temperatūru, kas tieši samazina kļūdas PCR plāksnēs.
Vai nepieciešama augstas kvalitātes PCR plate?
Ja esat apsvēris, kur atrast uzticamu ražotājuPCR plāksnes. Vairs nemeklējiet, jo esat īstajā vietā.
Laipninoklikšķiniet šeit, lai sazinātos ar mumsaugstas kvalitātes produktiem un pakalpojumiem par cenu, kas neiztukšos bankas kontu.
Publicēšanas laiks: 2021. gada 30. oktobris