תגובות שרשרת פולימראז (PCR) הן אחת השיטות הידועות ביותר המשמשות במעבדות מדעי החיים.
פלטות ה-PCR מיוצרות מפלסטיק מהשורה הראשונה לעיבוד וניתוח מעולים של דגימות או תוצאות שנאספו.
יש להם דפנות דקות והומוגניות כדי לספק העברת חום מדויקת.
כהכנה ליישומים בזמן אמת, קטעים זעירים של DNA או RNA מבודדים ומאוחסנים בלוחות PCR.
לוחות ה-PCR יעילים מאוד באיטום חום וגם מגבילים את זרימת החום.
עם זאת, למרות יעילותן ואמינותן של פלטות ה-PCR, שגיאות ואי דיוקים נעלמו בקלות בעת עיבוד הדגימות.
לכן, אם אתם מעוניינים לקבל מוצר איכותי וטובפלטות PCR.מומלץ ליצור קשר עם יצרן אמין של פלטות PCR. כך אתם מובטחים לקבל את העסקה הטובה ביותר.
להלן מספר אמצעי זהירות שיש לנקוט כדי למנוע זיהום של ריאגנטים או דגימות ולמנוע אי דיוקים מלהיכנס לתוצאות.
עיקור הסביבה
תוצאות חיוביות או שליליות שגויות מתרחשות עקב נוכחות של זיהומים, מה שגורם לך לפקפק בתוצאות.
זיהומים ומזהמים מופיעים בצורות שונות כגון DNA לא קשור או תוספים כימיים אשר בסופו של דבר מפחיתים את יעילות התגובה.
ישנן דרכים רבות להפחית באופן משמעותי את קצב הזיהום של צלחת ה-PCR.
שימוש בקצוות סינון מעוקרים הוא דרך שימושית נוספת למנוע חדירת זיהומים לדגימות דרך הפיפטות.
הקדישו סט ציוד נקי לחלוטין, הכולל פיפטות ומדפים, לשימוש בלעדי ב-PCR. פעולה זו תבטיח העברה זניחה של זיהומים או מזהמים ברחבי המעבדה.
השתמשו באקונומיקה, אתנול על פיפטות, מתלים וספסלים כדי לנגב מזהמים.
הקצו מקום שמור לכל תגובות ה-PCR שלכם כדי למזער עוד יותר את זיהום החלקיקים.
השתמשו בכפפות נקיות בכל שלב והחליפו אותן לעתים קרובות.
צלחות PCR
בדוק את הריכוז והטוהר של התבנית.
יש לשמור על ניקיון הספסל והציוד המשמשים בעת ניתוח דגימות באמצעות PCR. חיוני לאמת את דרגת הטוהר של הדגימות לפני הניתוח והעיבוד.
באופן כללי, אנליזטורים לוקחים בחשבון את הריכוז ורמת הטוהר של דגימות ה-DNA.
יש לשאוף שיחס הבליעה עבור 260 ננומטר/280 ננומטר לא יפחת מ-1.8. בעוד שאורך גל עוקב בין 230 ננומטר ל-320 ננומטר משמש לזיהוי זיהומים.
במקרה אחד, מלחים כאוטרופיים ותרכובות אורגניות אחרות מזוהים בקצב ספיגה של 230 ננומטר. בעוד שעכירות בדגימות DNA מזוהה ומאומתת גם היא בקצב ספיגה של 320 ננומטר.
הימנעו מעומס יתר של פלטות PCR עם מוצר
למרות שרצוי להפעיל מספר מוצרים בו זמנית, הדבר גורם לזיהום צולב של לוחות ה-PCR.
עומס יתר על פלטות ה-PCR עם מוצרים שונים גורמת לבזבוז ומקשה מאוד על אימות הדגימות.
שמור תיעוד של ריאגנטים ל-PCR בקבוצות קטנות
מחזורי הקפאה/הפשרה רציפים ושימוש תכוף במנות חלקיות עלולים לפגוע בריאגנטים של PCR, אנזימים ו-DNTP באמצעות התגבשות מחדש.
יש להשתדל תמיד לנטר את קצב החלוקה המשמשת בעת הכנת הדגימות לניתוח.
LIMS עדיף מתאים יותר לשליטה במלאי ובכמות הריאגנטים והדגימות שהוקפאו או הופשרו.
בחר את טמפרטורת החישול הטובה ביותר.
בחירה ושימוש בטמפרטורת חישול שגויה היא שיטה נוספת שבה תוצאות PCR מכילות שגיאה.
לעיתים, התגובה לא מתנהלת כמתוכנן. רצוי להפחית את טמפרטורת החישול על מנת להקל על תגובה מוצלחת.
עם זאת, הורדת הטמפרטורה מגדילה את הסיכויים לתוצאות חיוביות שגויות ולהופעת דימרים של פריימר.
חשוב לאשר את ניתוח עקומת ההיתוך בעת שימוש בלוחות PCR, שכן זהו אינדיקטור טוב לבחירת טמפרטורת החישול הנכונה.
תוכנת תכנון פריימרים מסייעת בתכנון, מתן טמפרטורת חישול נכונה, מה שמפחית ישירות שגיאות בלוחות ה-PCR.
זקוקים לצלחת PCR איכותית?
במקרה ששקלתם היכן למצוא יצרן אמין שלצלחות PCRאל תחפשו יותר, הגעתם למקום הנכון.
אָדִיבלחצו כאן ליצירת קשרלמוצרים ושירות איכותיים במחיר שלא ירוקן את הכיס.
זמן פרסום: 30 באוקטובר 2021