5 jednostavnih savjeta za sprječavanje pogrešaka pri radu s PCR pločama

Lančana reakcija polimeraze (PCR) jedna je od široko poznatih metoda koje se koriste u laboratorijima za biološke znanosti.

PCR ploče su proizvedene od prvoklasne plastike za izvrsnu obradu i analizu prikupljenih uzoraka ili rezultata.

Imaju tanke i homogene stijenke kako bi se osigurao precizan prijenos topline.

Kao priprema za primjene u stvarnom vremenu, sićušni dijelovi DNK ili RNK se izdvajaju i pohranjuju na PCR ploče.

PCR ploče su vrlo učinkovite u toplinskom brtvljenju i ograničavaju protok topline.

Međutim, koliko god PCR ploče bile učinkovite i pouzdane, pogreške i netočnosti se lako pojavljuju tijekom obrade uzoraka.

Stoga, ako ste zainteresirani za dobivanje dobrog i visokokvalitetnogPCR ploče.Idealno je kontaktirati pouzdanog proizvođača PCR ploča. Time ste sigurni da ćete dobiti najbolju ponudu.

Evo nekoliko mjera opreza koje treba slijediti kako biste izbjegli kontaminaciju reagensa ili uzoraka i spriječili da se netočnosti uvuku u rezultate.

Sterilizacija okoline
Netočni pozitivni ili negativni rezultati nastaju zbog prisutnosti nečistoća, što vas navodi na sumnju u rezultate.

Nečistoće i kontaminanti javljaju se u raznim oblicima poput nepovezane DNK ili kemijskih aditiva koji na kraju smanjuju učinkovitost i djelotvornost reakcije.

Postoje brojni načini za značajno smanjenje stope kontaminacije PCR ploče.

Korištenje steriliziranih filterskih vrhova još je jedan koristan način sprječavanja ulaska nečistoća u uzorke kroz pipete.

Namijenite potpuno čist set opreme, koji se sastoji od pipeta i stalaka, isključivo za korištenje PCR-a. To će jamčiti zanemariv prijenos nečistoća ili kontaminanata po laboratoriju.

Koristite izbjeljivače i etanol na pipetama, stalcima i radnim stolovima kako biste obrisali onečišćujuće tvari.

Dodijelite rezervirani prostor za sve vaše PCR reakcije kako biste dodatno smanjili kontaminaciju česticama.

Koristite čiste rukavice na svakom koraku i često ih mijenjajte.

PCR ploče
Provjerite koncentraciju i čistoću predloška.
Treba održavati čistoću stola i opreme koja se koristi pri analizi uzoraka PCR-om. Prije analize i obrade bitno je potvrditi stupanj čistoće uzoraka.

Općenito, analizatori uzimaju u obzir koncentraciju i razinu čistoće uzoraka DNK.

Nastojte da omjer apsorbancije za 260 nm/280 nm ne bude manji od 1,8. Dok se sljedeće valne duljine između 230 nm i 320 nm koriste za identifikaciju nečistoća.

Na primjer, kaotropne soli i drugi organski spojevi detektiraju se pri brzini apsorbancije od 230 nm. Dok se mutnoća u uzorcima DNK također detektira i provjerava pri brzini apsorbancije od 320 nm.

Izbjegavajte preopterećenje PCR ploča proizvodom
Koliko god je poželjno istovremeno koristiti više proizvoda, to dovodi do unakrsne kontaminacije PCR ploča.

Preopterećenje PCR ploča različitim proizvodima uzrokuje rasipanje i izuzetno otežava utvrđivanje uzoraka.

Vodite evidenciju alikvotnih PCR reagensa
Kontinuirani ciklusi zamrzavanja/odmrzavanja i česta upotreba alikvota mogu oštetiti PCR reagense, enzime i DNTP-ove rekristalizacijom.

Uvijek nastojte pratiti brzinu korištenog alikvota tijekom pripreme uzoraka za analizu.

Poželjni LIMS je prikladniji za kontrolu zaliha i količine reagensa i uzoraka koji su zamrznuti ili odmrznuti.

Odaberite najbolju temperaturu žarenja.
Odabir i korištenje pogrešne temperature žarenja još je jedna metoda zbog koje PCR rezultati sadrže pogreške.

Ponekad reakcija ne ide po planu. Poželjno je smanjiti temperaturu žarenja kako bi se olakšala uspješna reakcija.

Međutim, snižavanje temperature povećava vjerojatnost lažno pozitivnih rezultata i pojave dimera primera.

Važno je potvrditi analizu krivulje taljenja pri korištenju PCR ploča jer je to dobar pokazatelj odabira ispravne temperature žarenja.

Softver za dizajn primera pomaže pri dizajniranju, osiguravajući pravu temperaturu žarenja izravno smanjujući pogreške u PCR pločama.

Trebate visokokvalitetnu PCR ploču?
U slučaju da ste razmišljali gdje pronaći pouzdanog proizvođačaPCR pločeNe tražite više jer ste na pravom mjestu.

Ljubaznokliknite ovdje da nas kontaktirateza visokokvalitetne proizvode i usluge po cijeni koja vas neće isprazniti.


Vrijeme objave: 30. listopada 2021.