पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) जीवन विज्ञान प्रयोगशालाओं में उपयोग की जाने वाली व्यापक रूप से ज्ञात विधियों में से एक है।
पीसीआर प्लेटें नमूनों या एकत्रित परिणामों के उत्कृष्ट प्रसंस्करण और विश्लेषण के लिए प्रथम श्रेणी के प्लास्टिक से निर्मित की जाती हैं।
सटीक तापीय स्थानांतरण प्रदान करने के लिए इनमें पतली और समरूप दीवारें होती हैं।
वास्तविक समय अनुप्रयोगों की तैयारी के लिए, डीएनए या आरएनए के सूक्ष्म भाग को अलग कर लिया जाता है और पीसीआर प्लेटों में संग्रहित किया जाता है।
पीसीआर प्लेटें ताप सीलिंग में अत्यधिक कुशल होती हैं तथा ताप के प्रवाह को भी रोकती हैं।
हालांकि, पीसीआर प्लेटें प्रभावी और विश्वसनीय होने के बावजूद, नमूनों के प्रसंस्करण में त्रुटि और अशुद्धियां आसानी से हो जाती हैं।
इसलिए, यदि आप एक अच्छी और उच्च गुणवत्ता प्राप्त करने में रुचि रखते हैंपीसीआर प्लेटें.किसी विश्वसनीय पीसीआर प्लेट निर्माता से संपर्क करना आदर्श है। इससे आपको सबसे अच्छा सौदा मिलने का आश्वासन मिलता है।
अभिकर्मकों या नमूनों के संदूषण से बचने और परिणामों में अशुद्धि को रोकने के लिए यहां कुछ सावधानियां बताई गई हैं।
आस-पास के वातावरण को रोगाणुमुक्त करना
अशुद्धियों की उपस्थिति के कारण गलत सकारात्मक या नकारात्मक परिणाम सामने आते हैं, जिससे आपको परिणामों पर संदेह होता है।
अशुद्धियाँ और संदूषक विभिन्न रूपों में पाए जाते हैं, जैसे असंबंधित डीएनए या रासायनिक योजक, जो अंततः प्रतिक्रिया की दक्षता और प्रभावशीलता को कम कर देते हैं।
पीसीआर प्लेट के संदूषण की दर को काफी हद तक कम करने के कई तरीके हैं।
पिपेट के माध्यम से आपके नमूनों में अशुद्धियों को जाने से रोकने के लिए स्टेरलाइज्ड फिल्टर टिप्स का उपयोग करना एक और उपयोगी तरीका है।
पीसीआर के उपयोग के लिए विशेष रूप से पिपेट और रैक सहित उपकरणों का एक पूरी तरह से साफ सेट समर्पित करें। इससे प्रयोगशाला के आसपास अशुद्धियों या संदूषकों के नगण्य हस्तांतरण की गारंटी होगी।
दूषित पदार्थों को हटाने के लिए पिपेट, रैक और बेंच पर ब्लीच, इथेनॉल का उपयोग करें।
कण संदूषण को और भी कम करने के लिए अपनी सभी पीसीआर प्रतिक्रियाओं के लिए एक आरक्षित स्थान आवंटित करें।
हर कदम पर साफ़ दस्ताने का प्रयोग करें और उन्हें बार-बार बदलें।
पीसीआर प्लेटें
टेम्पलेट की सांद्रता और शुद्धता का निरीक्षण करें।
पीसीआर के साथ नमूनों का विश्लेषण करते समय इस्तेमाल की जाने वाली बेंच और उपकरणों की स्वच्छता बनाए रखी जानी चाहिए। विश्लेषण और प्रसंस्करण से पहले नमूनों की शुद्धता की डिग्री को सत्यापित करना आवश्यक है।
सामान्यतः विश्लेषक डीएनए नमूनों की सांद्रता और शुद्धता के स्तर को ध्यान में रखते हैं।
प्रयास करें कि 260nm/280nm के लिए अवशोषण का अनुपात 1.8 से कम न हो। जबकि अशुद्धियों की पहचान के लिए 230nm और 320nm के बीच की तरंगदैर्घ्य का उपयोग किया जाता है।
उदाहरण के लिए, 230nm अवशोषण दर पर कैओट्रोपिक लवण और अन्य कार्बनिक यौगिकों का पता लगाया जाता है। जबकि डीएनए नमूनों में टर्बिडिटी का भी पता लगाया जाता है और 320nm की अवशोषण दर पर सत्यापित किया जाता है।
पीसीआर प्लेट्स पर उत्पाद का अत्यधिक भार डालने से बचें
यद्यपि एक साथ कई उत्पादों को चलाना वांछनीय है, लेकिन इसके परिणामस्वरूप पीसीआर प्लेटों में क्रॉस-संदूषण होता है।
पीसीआर प्लेटों पर विभिन्न उत्पादों का अत्यधिक भार डालने से अपशिष्ट उत्पन्न होता है तथा नमूनों की पहचान करना अत्यंत कठिन हो जाता है।
एलिक्वॉट पीसीआर अभिकर्मकों का रिकॉर्ड रखें
निरंतर फ्रीज/थॉ चक्र और एलिक्वॉट के लगातार उपयोग से पीसीआर अभिकर्मकों, एंजाइमों और डीएनटीपी को पुनःक्रिस्टलीकरण के माध्यम से नुकसान हो सकता है।
विश्लेषण हेतु नमूने तैयार करते समय हमेशा प्रयुक्त अंश की दर पर नजर रखने का प्रयास करें।
बेहतर LIMS, भंडार और जमाए गए या पिघलाए गए अभिकर्मकों और नमूनों की मात्रा को नियंत्रित करने के लिए अधिक उपयुक्त है।
सर्वोत्तम एनीलिंग तापमान चुनें.
गलत एनीलिंग तापमान चुनना और उसका उपयोग करना भी एक अन्य तरीका है जिससे पीसीआर परिणाम में त्रुटि हो सकती है।
कभी-कभी, प्रतिक्रिया योजना के अनुसार नहीं होती है। सफल प्रतिक्रिया को सुविधाजनक बनाने के लिए एनीलिंग तापमान को कम करना वांछनीय है।
हालांकि, तापमान कम करने से झूठी सकारात्मकता और प्राइमर डिमर्स की उपस्थिति की संभावना बढ़ जाती है।
पीसीआर प्लेटों का उपयोग करते समय पिघलने वाले वक्र के विश्लेषण की पुष्टि करना महत्वपूर्ण है क्योंकि यह सही एनीलिंग तापमान का चयन करने का एक अच्छा संकेतक है।
प्राइमर डिजाइन सॉफ्टवेयर डिजाइनिंग में सहायता करता है, सही एनीलिंग तापमान का प्रावधान करता है और पीसीआर प्लेटों में त्रुटि को सीधे कम करता है।
क्या आपको उच्च गुणवत्ता वाली पीसीआर प्लेट की आवश्यकता है?
यदि आप इस बात पर विचार कर रहे हैं कि एक विश्वसनीय निर्माता कहां खोजेंपीसीआर प्लेटेंअब और मत खोजो क्योंकि आप सही जगह पर हैं।
कृपयाहमसे संपर्क करने के लिए यहां क्लिक करेंउच्च गुणवत्ता वाले उत्पाद और सेवा के लिए ऐसी कीमत जो बैंक को तोड़ न दे।
पोस्ट करने का समय: अक्टूबर-30-2021