Tha ath-bheachdan slabhraidh polymerase (PCR) mar aon de na dòighean aithnichte a thathas a’ cleachdadh ann an deuchainn-lannan saidheans beatha.
Tha na pleitean PCR air an dèanamh à plastaig den chiad ìre airson giullachd agus mion-sgrùdadh sàr-mhath air sampallan no toraidhean a chaidh a chruinneachadh.
Tha ballachan tana agus aonfhoirmeil aca gus gluasad teirmeach mionaideach a thoirt seachad.
Mar ullachadh airson tagraidhean fìor-ùine, thèid earrannan beaga bìodach de DNA no RNA a sgaradh bho chèile agus a stòradh ann am pleitean PCR.
Tha na pleitean PCR gu math èifeachdach ann an seulachadh teas agus bidh iad a’ cuingealachadh sruthadh teas cuideachd.
Ach, cho èifeachdach agus earbsach ‘s a tha na pleitean PCR, bidh mearachdan agus neo-chruinneas a’ dol à bith gu furasta fhad ‘s a tha sampallan gan giullachd.
Mar sin, ma tha ùidh agad ann a bhith a’ faighinn deagh chàileachdPlàtaichean PCR.’S e deagh rud a th’ ann fios a chur gu neach-dèanamh truinnsearan PCR earbsach. Le seo, tha thu cinnteach gum faigh thu a’ chùmhnant as fheàrr.
Seo beagan cheumannan ri leantainn gus casg a chur air truailleadh ath-bheachdan no sampallan agus casg a chur air mearachdan bho bhith a’ snàgadh a-steach do na toraidhean.
A’ sterilachadh na h-àrainneachd
Bidh toraidhean adhartach no àicheil ceàrr a’ tachairt air sgàth làthaireachd neo-chunbhalachdan, a bheir ort teagamh a bhith agad mu na toraidhean.
Bidh neo-ghlainean agus truailleadh a’ nochdadh ann an diofar chruthan leithid DNA neo-cheangailte no stuthan cur-ris ceimigeach a lùghdaicheas èifeachdas agus buaidh an ath-bhualadh mu dheireadh.
Tha grunn dhòighean ann air ìre truailleadh a’ phlàta PCR a lùghdachadh gu mòr.
'S e cleachdadh chinn-sìoltachain sterilichte dòigh fheumail eile air casg a chur air neo-chunbhalachdan bho bhith a' snàgadh a-steach do na sampallan agad tron phìobaidean.
Cuir seata uidheamachd gu tur glan, anns a bheil pìobaidean agus racaichean, air leth freagarrach airson PCR. Nì seo cinnteach nach tèid mòran neo-chunbhalachdan no thruailleadh a ghluasad timcheall an obair-lann.
Cleachd bleaches, ethanol air na pipettes, racaichean agus beingidhean gus truailleadh a thoirt air falbh.
Cuir àite glèidhte air leth airson na h-ath-bheachdan PCR agad uile gus truailleadh mìrean a lughdachadh tuilleadh.
Cleachd miotagan glan aig gach ceum agus cuir nan àite iad gu tric.
Plàtaichean PCR
Dèan sgrùdadh air dùmhlachd agus purrachd an teamplaid.
Bu chòir cumail suas glanachd a’ bheing agus an uidheamachd a thathar a’ cleachdadh nuair a thathar a’ dèanamh anailis air sampallan leis an PCR. Tha e riatanach ìre purrachd nan sampallan a dhearbhadh mus tèid an anailis agus an giullachd a dhèanamh.
San fharsaingeachd, bidh luchd-anailis a’ toirt aire do dùmhlachd agus ìre purrachd nan sampallan DNA.
Feuch ri dèanamh cinnteach nach bi an co-mheas sùghaidh airson 260nm/280nm nas lugha na 1.8. Cleachdar tonn-fhaid eile eadar 230nm agus 320nm gus neo-chunbhalachdan aithneachadh.
Aig aon eisimpleir, lorgar salainn chaotropic agus todhar organach eile aig ìre sùghaidh 230nm. Fhad ‘s a lorgar agus a dhearbhasar ceòthachd ann an sampallan DNA aig ìre sùghaidh 320nm cuideachd.
Seachain cus luchdachadh a dhèanamh air na Plàtaichean PCR leis an toradh
Ged a tha e airson iomadh toradh a ruith aig an aon àm, bidh e ag adhbhrachadh tar-thruailleadh nam pleitean PCR.
Tha cus luchdachadh de dhiofar thoraidhean air na truinnsearan PCR a’ cur sgudal air falbh agus ga dhèanamh air leth duilich na sampallan a dhearbhadh.
Cùm Clàran de Reagents PCR Aliquot
Dh’fhaodadh cearcallan reòta/leaghadh leantainneach agus cleachdadh tric de aliquot cron a dhèanamh air na h-ath-bheachdan PCR, na h-einsìmean agus na DNTPn tro ath-chriostalachadh.
Feuch an-còmhnaidh ri sùil a chumail air an ìre de dh’atharrachadh a thathar a’ cleachdadh nuair a bhios tu ag ullachadh shamhlaichean airson an sgrùdadh.
Tha LIMS nas freagarraiche airson smachd a chumail air clàr-stuthan agus air meud nan ath-bheachdan agus nan sampallan a tha reòta no leaghte.
Tagh an teòthachd annealing as fheàrr.
'S e dòigh eile anns a bheil mearachdan ann an toraidhean PCR a bhith a' taghadh agus a' cleachdadh teòthachd an annealing ceàrr.
Uaireannan, chan eil an ath-bhualadh a’ dol mar a bha dùil. Tha e riatanach teòthachd an teasachaidh a lùghdachadh gus ath-bhualadh soirbheachail a dhèanamh comasach.
Ach, ma lùghdaicheas tu an teòthachd, bidh barrachd chothroman ann gum bi toraidhean meallta agus coltas dimers primer ann.
Tha e cudromach dearbhadh a dhèanamh air mion-sgrùdadh a’ lùb leaghaidh nuair a thathar a’ cleachdadh nam pleitean PCR oir ’s e deagh chomharradh a th’ ann air an teòthachd annealing cheart a thaghadh.
Bidh bathar-bog dealbhaidh primer a’ cuideachadh le dealbhadh, a’ toirt seachad teòthachd annealing cheart a lughdaicheas mearachd anns na pleitean PCR gu dìreach.
A bheil feum agad air truinnsear PCR àrd-inbhe?
Ma tha thu air a bhith a’ beachdachadh air càite an lorg thu neach-dèanamh earbsach dePlàtaichean PCRNa bi a’ sireadh tuilleadh oir tha thu san àite cheart.
Gu coibhneilbriog an seo gus fios a chur thugainnairson bathar is seirbheis àrd-inbhe aig prìs nach bris am banca.
Àm puist: 30 Dàmhair 2021