Polymeraasiketjureaktiot (PCR) ovat yksi biotieteiden laboratorioissa käytetyistä tunnetuimmista menetelmistä.
PCR-levyt on valmistettu ensiluokkaisista muoveista, jotka takaavat erinomaisen käsittelyn ja kerättyjen näytteiden tai tulosten analysoinnin.
Niillä on ohuet ja homogeeniset seinät tarkan lämmönsiirron varmistamiseksi.
Reaaliaikaisia sovelluksia varten pienet DNA- tai RNA-pätkät eristetään ja säilytetään PCR-levyillä.
PCR-levyt ovat erittäin tehokkaita lämpösaumauksessa ja rajoittavat myös lämmön virtausta.
Vaikka PCR-levyt ovatkin tehokkaita ja luotettavia, virheitä ja epätarkkuuksia esiintyy helposti näytteiden käsittelyssä.
Siksi, jos olet kiinnostunut saamaan hyvän ja laadukkaanPCR-levyt.On ihanteellista ottaa yhteyttä luotettavaan PCR-levyvalmistajaan. Näin voit olla varma, että saat parhaan tarjouksen.
Tässä on joitakin varotoimia, joita on noudatettava reagenssien tai näytteiden kontaminaation välttämiseksi ja epätarkkuuksien hiipimisen estämiseksi tuloksiin.
Ympäristön sterilointi
Vääriä positiivisia tai negatiivisia tuloksia esiintyy epäpuhtauksien läsnäolon vuoksi, mikä saa sinut epäilemään tuloksia.
Epäpuhtauksia ja kontaminantteja esiintyy eri muodoissa, kuten toisiinsa liittymättömässä DNA:ssa tai kemiallisissa lisäaineissa, jotka lopulta vähentävät reaktion tehokkuutta ja vaikuttavuutta.
PCR-levyn kontaminaationopeutta voidaan vähentää merkittävästi useilla tavoilla.
Sterilisoitujen suodatinkärkien käyttö on toinen hyödyllinen tapa estää epäpuhtauksien pääsy näytteisiin pipettien kautta.
Käytä täysin puhdasta PCR-käyttöön tarkoitettua laitteistoa, joka koostuu pipetteistä ja telineistä. Tämä takaa epäpuhtauksien ja kontaminanttien vähäisen siirtymisen laboratoriossa.
Käytä valkaisuaineita ja etanolia pipettien, telineiden ja työpöytien puhdistukseen epäpuhtauksien poistamiseksi.
Varaa kaikille PCR-reaktioillesi oma tila hiukkaskontaminaation minimoimiseksi entisestään.
Käytä puhtaita käsineitä jokaisessa vaiheessa ja vaihda ne usein.
PCR-levyt
Tarkista mallineen pitoisuus ja puhtaus.
PCR-näytteiden analysoinnissa käytettävän pöydän ja laitteiden puhtaudesta on huolehdittava. Näytteiden puhtausaste on tärkeää validoida ennen analysointia ja käsittelyä.
Yleensä analysaattorit ottavat huomioon DNA-näytteiden pitoisuuden ja puhtaustason.
Pyri siihen, että absorbanssien suhde 260 nm:n ja 280 nm:n aallonpituuksilla ei saa olla alle 1,8. Myöhempiä aallonpituuksia 230 nm:n ja 320 nm:n välillä käytetään epäpuhtauksien tunnistamiseen.
Esimerkiksi kaotrooppiset suolat ja muut orgaaniset yhdisteet havaitaan 230 nm:n absorbanssinopeudella. Myös DNA-näytteiden sameus havaitaan ja varmistetaan 320 nm:n absorbanssinopeudella.
Vältä PCR-levyjen ylikuormittamista tuotteella
Vaikka kuinka haluttaisiin ajaa useita tuotteita samanaikaisesti, se johtaa PCR-levyjen ristikontaminaatioon.
PCR-levyjen ylikuormittaminen erilaisilla tuotteilla aiheuttaa jätettä ja vaikeuttaa näytteiden tunnistusta huomattavasti.
Pidä kirjaa alikvootti-PCR-reagensseista
Jatkuvat pakastus-/sulatusjaksot ja alikvootin tiheä käyttö voivat vahingoittaa PCR-reagensseja, entsyymejä ja DNTP:itä uudelleenkiteytymisen kautta.
Pyri aina seuraamaan käytetyn alikvootin määrää analysoitavia näytteitä valmistellessa.
Edullisempi LIMS soveltuu paremmin pakastettujen tai sulatettujen reagenssien ja näytteiden varaston ja määrän hallintaan.
Valitse paras hehkutuslämpötila.
Väärän hehkutuslämpötilan valitseminen ja käyttäminen on jälleen yksi tapa, jolla PCR-tulokset voivat sisältää virheitä.
Joskus reaktio ei mene suunnitelmien mukaan. On toivottavaa alentaa hehkutuslämpötilaa reaktion onnistumisen mahdollistamiseksi.
Lämpötilan alentaminen lisää kuitenkin väärien positiivisten ja alukedimeerien esiintymisen todennäköisyyttä.
Sulamiskäyrän analyysin vahvistaminen PCR-levyjä käytettäessä on tärkeää, koska se on hyvä indikaattori oikean hehkutuslämpötilan valinnalle.
Alukesuunnitteluohjelmisto auttaa suunnittelussa ja oikean hehkutuslämpötilan varmistamisessa, mikä vähentää suoraan PCR-levyjen virheitä.
Tarvitsetko korkealaatuista PCR-levyä?
Jos olet miettinyt, mistä löydät luotettavan valmistajanPCR-levytÄlä enää etsi, sillä olet oikeassa paikassa.
Ystävällisestiklikkaa tästä ottaaksesi meihin yhteyttäkorkealaatuisia tuotteita ja palvelua hintaan, joka ei tyhjennä pankkitiliäsi.
Julkaisun aika: 30.10.2021