5 jednoduchých tipů, jak předcházet chybám při práci s PCR destičkami

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je jednou z nejznámějších metod používaných v laboratořích biologických věd.

PCR destičky jsou vyrobeny z prvotřídních plastů pro vynikající zpracování a analýzu vzorků nebo odebraných výsledků.

Mají tenké a homogenní stěny pro zajištění přesného přenosu tepla.

V rámci přípravy na aplikace v reálném čase jsou nepatrné řezy DNA nebo RNA izolovány a uloženy na PCR destičkách.

PCR destičky jsou vysoce účinné při tepelném svařování a také omezují tok tepla.

Nicméně, jakkoli jsou PCR destičky efektivní a spolehlivé, při zpracování vzorků se snadno vyskytují chyby a nepřesnosti.

Pokud tedy máte zájem o získání dobrého a kvalitníhoPCR destičky.Ideální je kontaktovat spolehlivého výrobce PCR destiček. Díky tomu máte jistotu, že získáte nejlepší nabídku.

Zde je několik opatření, která je třeba dodržovat, abyste zabránili kontaminaci činidel nebo vzorků a zabránili nepřesnostem ve výsledcích.

Sterilizace okolí
K nesprávným pozitivním nebo negativním výsledkům dochází v důsledku přítomnosti nečistot, což vede k pochybnostem o výsledcích.

Nečistoty a kontaminanty se vyskytují v různých formách, jako je nepříbuzná DNA nebo chemické přísady, které nakonec snižují účinnost a efektivitu reakce.

Existuje mnoho způsobů, jak výrazně snížit míru kontaminace PCR destičky.

Použití sterilizovaných filtračních špiček je dalším užitečným způsobem, jak zabránit vniknutí nečistot do vzorků pipetami.

Vyhraďte kompletně čistou sadu vybavení, která se skládá z pipet a stojanů, výhradně pro použití PCR. To zaručí zanedbatelný přenos nečistot nebo kontaminantů v laboratoři.

K otření kontaminantů použijte na pipety, stojany a pracovní stoly bělidla a etanol.

Vyhraďte si vyhrazený prostor pro všechny PCR reakce, abyste dále minimalizovali kontaminaci částicemi.

Používejte čisté rukavice při každém kroku a často je vyměňujte.

PCR destičky
Zkontrolujte koncentraci a čistotu šablony.
Při analýze vzorků pomocí PCR je třeba dbát na čistotu laboratoře a vybavení používaného v praxi. Před analýzou a zpracováním je nezbytné ověřit stupeň čistoty vzorků.

Analyzátory obecně berou v úvahu koncentraci a úroveň čistoty vzorků DNA.

Snažte se, aby poměr absorbance pro 260 nm/280 nm nebyl menší než 1,8. Vlnové délky mezi 230 nm a 320 nm se používají k identifikaci nečistot.

Například chaotropní soli a další organické sloučeniny jsou detekovány při absorbanci 230 nm. Zákal ve vzorcích DNA je detekován a ověřen také při absorbanci 320 nm.

Zabraňte přetížení PCR destiček produktem.
I když je žádoucí provádět simultánní analýzu více produktů, dochází ke křížové kontaminaci PCR destiček.

Přetížení PCR destiček různými produkty způsobuje plýtvání a extrémně ztěžuje určení vzorků.

Veďte záznamy o alikvotních PCR činidlech
Neustálé cykly zmrazování/rozmrazování a časté používání alikvotních podílů mohou poškodit PCR činidla, enzymy a DNTP rekrystalizací.

Při přípravě vzorků k analýze se vždy snažte sledovat rychlost použitého alikvotního podílu.

Pro kontrolu zásob a množství zmrazených nebo rozmrazených činidel a vzorků je vhodnější systém LIMS.

Vyberte nejlepší teplotu žíhání.
Výběr a použití nesprávné teploty žíhání je další metodou, která vede k chybám ve výsledcích PCR.

Někdy reakce neprobíhá podle plánu. Pro usnadnění úspěšného průběhu reakce je žádoucí snížit teplotu žíhání.

Snížení teploty však zvyšuje pravděpodobnost falešně pozitivních výsledků a výskytu primerových dimerů.

Při použití PCR destiček je důležité potvrdit analýzu křivky tání, protože je to dobrý ukazatel výběru správné teploty žíhání.

Software pro návrh primerů pomáhá s návrhem, zajištěním správné teploty žíhání, což přímo snižuje chyby v PCR destičkách.

Potřebujete vysoce kvalitní PCR destičku?
Pokud jste přemýšleli, kde najít spolehlivého výrobcePCR destičkyUž nemusíte hledat, protože jste na správném místě.

Laskavěklikněte zde a kontaktujte násza vysoce kvalitní produkty a služby za cenu, která vás nezruinuje.


Čas zveřejnění: 30. října 2021