E reazzioni in catena di a polimerasi (PCR) sò unu di i metudi più cunnisciuti utilizati in i laboratorii di scienze di a vita.
E piastre PCR sò prudutte da plastiche di prima classe per un eccellente trattamentu è analisi di campioni o risultati raccolti.
Anu muri fini è omogenei per furnisce un trasferimentu termicu precisu.
In preparazione per applicazioni in tempu reale, sezioni minuscule di DNA o RNA sò isolate è almacenate in piastre PCR.
E piastre PCR sò assai efficaci in a sigillatura à calore è limitanu ancu u flussu di calore.
Tuttavia, per quantu efficaci è affidabili sianu e piastre PCR, l'errori è l'inesattezze si presentanu facilmente durante u trattamentu di i campioni.
Dunque, sè vo site interessatu à ottene una bona è di alta qualitàPiastre PCR.Hè ideale cuntattà un fabricatore di piastre PCR affidabile. Cù questu avete a garanzia di ottene u megliu affare.
Eccu alcune precauzioni da seguità per evità contaminazioni di reagenti o campioni è impedisce chì l'inesattezze si insinuinu in i risultati.
Sterilizà l'ambiente circundante
I pusitivi o i negativi incorretti si verificanu per via di a presenza d'impurità, ciò chì face dubità di i risultati.
L'impurità è i contaminanti si presentanu in varie forme cum'è l'ADN senza relazione o additivi chimichi chì diminuiscenu eventualmente l'efficienza è l'efficacia di a reazione.
Ci sò numerosi modi per riduce assai a velocità di contaminazione di a piastra PCR.
L'usu di punte di filtru sterilizzate hè un altru modu utile per impedisce à l'impurità di infiltrà si in i vostri campioni attraversu e pipette.
Dedicate un inseme d'attrezzatura cumpletamente pulitu, cumpostu di pipette è rack, esclusivamente per l'usu di a PCR. Questu garantirà un trasferimentu trascurabile d'impurità o contaminanti intornu à u laburatoriu.
Aduprate candeggina, etanolu nantu à e pipette, i rack è i banchi per sguassà i contaminanti.
Assigne un spaziu riservatu per tutte e vostre reazioni PCR per minimizà ulteriormente a contaminazione di particelle.
Aduprate guanti puliti à ogni passu è rimpiazzateli spessu.
Piastre PCR
Ispettate a cuncentrazione è a purità di u mudellu.
A pulizia di u bancu è di l'attrezzatura aduprata quandu si analizanu i campioni cù a PCR deve esse mantenuta. Hè essenziale validà u gradu di purità di i campioni prima di l'analisi è di u trattamentu.
In generale, l'analizzatori tenenu contu di a cuncentrazione è di u livellu di purità di i campioni di DNA.
Pruvate à chì u rapportu di l'assorbanza per 260nm/280nm ùn sia micca inferiore à 1,8. Mentre chì e lunghezze d'onda successive trà 230nm è 320nm sò aduprate per identificà l'impurità.
À un esempiu, i sali caotropichi è altri cumposti organici sò rilevati à una velocità di assorbanza di 230 nm. Mentre a torbidità in i campioni di DNA hè ancu rilevata è verificata à una velocità di assorbanza di 320 nm.
Evitate di sovraccaricà e piastre PCR cù u pruduttu
Ancu s'ellu si vole eseguisce parechji prudutti simultaneamente, si verifica una contaminazione incrociata di e piastre PCR.
Sopraccaricà e piastre PCR cù diversi prudutti spreca è rende estremamente difficiule l'accertamentu di i campioni.
Mantene i registri di l'aliquote di reagenti PCR
I cicli cuntinui di congelazione/scongelazione è l'usu frequente di aliquote puderanu dannà i reagenti PCR, l'enzimi è i DNTP per via di a ricristallizazione.
Pruvate sempre à monitorà a velocità di l'aliquota aduprata mentre preparate i campioni da analizà.
Un LIMS preferibile hè più adattatu per cuntrullà l'inventariu è a quantità di reagenti è campioni congelati o scongelati.
Sceglite a megliu temperatura di ricottura.
Sceglie è aduprà a temperatura di ricottura sbagliata hè un altru metudu chì i risultati di a PCR cuntenenu errori.
Calchì volta, a reazione ùn si svolge micca cum'è previstu. Hè vulsutu riduce a temperatura di ricottura per facilità una reazione riescita.
Tuttavia, abbassà a temperatura aumenta e probabilità di falsi pusitivi è di apparizione di dimeri di primer.
Hè impurtante cunfirmà l'analisi di a curva di fusione quandu si utilizanu e piastre PCR, postu chì hè un bon indicatore di a selezzione di a temperatura di ricottura curretta.
U software di cuncepimentu di primer aiuta à cuncepisce, furnisce a temperatura di ricottura ghjusta cù una riduzione diretta di l'errore in e piastre PCR.
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Data di publicazione: 30 d'ottobre di u 2021