Палімеразная ланцуговая рэакцыя (ПЛР) — адзін з шырока вядомых метадаў, якія выкарыстоўваюцца ў лабараторыях біялагічных навук.
ПЦР-пласціны вырабляюцца з першакласнага пластыка для выдатнай апрацоўкі і аналізу сабраных узораў або вынікаў.
Яны маюць тонкія і аднастайныя сценкі для забеспячэння дакладнай цеплаперадачы.
Для падрыхтоўкі да выкарыстання ў рэжыме рэальнага часу мікраскапічныя фрагменты ДНК або РНК ізалююцца і захоўваюцца ў ПЛР-пласцінах.
ПЦР-пласціны вельмі эфектыўныя пры цеплавой герметызацыі і абмяжоўваюць паток цяпла.
Аднак, нягледзячы на эфектыўнасць і надзейнасць ПЛР-пласцін, падчас апрацоўкі ўзораў лёгка ўзнікаюць памылкі і недакладнасці.
Такім чынам, калі вы зацікаўлены ў атрыманні добрага і якаснагаПЦР-пласціны.Ідэальна звязацца з надзейным вытворцам ПЛР-пласцін. Гэта гарантуе вам найлепшую прапанову.
Вось некаторыя меры засцярогі, якіх варта прытрымлівацца, каб пазбегнуць забруджвання рэагентаў або ўзораў і прадухіліць уплыў недакладнасцей на вынікі.
Стэрылізацыя наваколля
Няправільныя станоўчыя або адмоўныя вынікі ўзнікаюць з-за наяўнасці прымешак, што прымушае вас сумнявацца ў выніках.
Прымешкі і забруджвальнікі сустракаюцца ў розных формах, такіх як няроднасная ДНК або хімічныя дабаўкі, якія ў канчатковым выніку зніжаюць эфектыўнасць і прадукцыйнасць рэакцыі.
Існуе мноства спосабаў значна знізіць узровень забруджвання ПЛР-пласціны.
Выкарыстанне стэрылізаваных фільтруючых наканечнікаў — яшчэ адзін карысны спосаб прадухіліць трапленне прымешак у вашы ўзоры праз піпеткі.
Вылучыце цалкам чысты камплект абсталявання, які складаецца з піпетак і штатываў, выключна для выкарыстання ПЦР. Гэта гарантуе нязначнае перамяшчэнне прымешак або забруджвальных рэчываў па лабараторыі.
Выкарыстоўвайце адбельвальнікі і этанол для выдалення забруджванняў на піпетках, стойках і сталах.
Выдзеліце рэзервовае месца для ўсіх вашых ПЛР-рэакцый, каб яшчэ больш мінімізаваць забруджванне часціцамі.
Выкарыстоўвайце чыстыя пальчаткі на кожным этапе і часта мяняйце іх.
ПЦР-пласціны
Праверце канцэнтрацыю і чысціню шаблону.
Неабходна падтрымліваць чысціню лабараторыі і абсталявання, якія выкарыстоўваюцца пры аналізе ўзораў з дапамогай ПЦР. Перад аналізам і апрацоўкай важна праверыць ступень чысціні ўзораў.
Звычайна аналізатары ўлічваюць канцэнтрацыю і ўзровень чысціні ўзораў ДНК.
Старайцеся, каб суадносіны паглынання для 260 нм/280 нм было не менш за 1,8. У той жа час для ідэнтыфікацыі прымешак выкарыстоўваюцца даўжыні хваль паміж 230 нм і 320 нм.
Напрыклад, хаатропныя солі і іншыя арганічныя злучэнні выяўляюцца пры хуткасці паглынання 230 нм. У той жа час каламутнасць узораў ДНК таксама выяўляецца і правяраецца пры хуткасці паглынання 320 нм.
Пазбягайце перагрузкі ПЛР-пласцін прадуктам
Як бы ні было пажадана адначасова прааналізаваць некалькі прадуктаў, гэта прыводзіць да перакрыжаванага забруджвання ПЛР-пласцін.
Перагрузка ПЛР-пласцін рознымі прадуктамі прыводзіць да адходаў і надзвычай ускладняе праверку ўзораў.
Вядзіце ўлік аліквотных ПЦР-рэагентаў
Бесперапынныя цыклы замарожвання/размарожвання і частае выкарыстанне аліквот могуць пашкодзіць рэагенты ПЦР, ферменты і ДНТП праз перакрышталізацыю.
Заўсёды імкніцеся кантраляваць хуткасць выкарыстання аліквоты пры падрыхтоўцы ўзораў да аналізу.
Пераважнейшая LIMS-сістэма больш падыходзіць для кантролю запасаў і колькасці замарожаных або размарожаных рэагентаў і ўзораў.
Выберыце найлепшую тэмпературу адпалу.
Выбар і выкарыстанне няправільнай тэмпературы адпалу — яшчэ адзін метад, пры якім вынікі ПЦР утрымліваюць памылкі.
Часам рэакцыя ідзе не па плане. Пажадана знізіць тэмпературу адпалу, каб палегчыць яе паспяховае праходжанне.
Аднак паніжэнне тэмпературы павялічвае верагоднасць ілжывых спрацоўванняў і з'яўлення дымераў праймераў.
Важна пацвердзіць аналіз крывой плаўлення пры выкарыстанні ПЛР-пласцін, бо гэта добры паказчык выбару правільнай тэмпературы адпалу.
Праграмнае забеспячэнне для распрацоўкі праймераў дапамагае пры праектаванні, забяспечваючы правільную тэмпературу адпалу, што непасрэдна зніжае памылку ў ПЛР-пласцінах.
Патрэбен якасны ПЛР-пласцін?
Калі вы думалі, дзе знайсці надзейнага вытворцуПЦР-пласціныБольш не трэба шукаць, бо вы знаходзіцеся ў патрэбным месцы.
Калі ласканацісніце тут, каб звязацца з наміза высакаякасныя прадукты і паслугі па цане, якая не спустошыць ваш кашалёк.
Час публікацыі: 30 кастрычніка 2021 г.